据医学空间网9月6日报道（原载Immunol Lett 2005 Aug 13），在特定位点含有非甲基化的胞嘧啶-鸟嘌呤二核苷酸（CpG元件）的寡脱氧核苷酸（ODNs）是有力的免疫激活剂，还可诱导若干Th1类免疫调节因子的生成。动物试验提示，CpG ODNs有...据医学空间网9月6日报道（原载Immunol Lett 2005 Aug 13），在特定位点含有非甲基化的胞嘧啶-鸟嘌呤二核苷酸（CpG元件）的寡脱氧核苷酸（ODNs）是有力的免疫激活剂，还可诱导若干Th1类免疫调节因子的生成。动物试验提示，CpG ODNs有望作为疫苗佐剂及免疫保护因子。展开更多
目的研究鸟嘌呤核苷酸转化因子交换蛋白1对大鼠糖尿病机械性疼痛的影响。
方法雄性SD大鼠随机分为CON组和STZ组，CON组随机分为CONshRNA组、CONEpac1shRNA组，STZ组大鼠诱导成为糖尿病机械性疼痛（DMA）模型后随机分为DMAshRNA组、DMAE...目的研究鸟嘌呤核苷酸转化因子交换蛋白1对大鼠糖尿病机械性疼痛的影响。
方法雄性SD大鼠随机分为CON组和STZ组，CON组随机分为CONshRNA组、CONEpac1shRNA组，STZ组大鼠诱导成为糖尿病机械性疼痛（DMA）模型后随机分为DMAshRNA组、DMAEpac1shRNA组、DMANS组、DMA8-pCPT组。Epac1shRNA慢病毒载体用于抑制Epac1的表达，对照shRNA慢病毒载体为阴性对照，8-pCPT为Epac1的激活剂。CONshRNA组、DMAshRNA组鞘内注射对照shRNA慢病毒载体，CONEpac1shRNA组、DMAEpac1shRNA组鞘内注射Epac1shRNA慢病毒载体，DMANS组足底注射生理盐水，DMA8-pCPT组足底注射8-pCPT。观察各组大鼠的后爪回缩阈值（PWT）变化，用实时PCR、Western印迹检测大鼠背根神经节（DRG）部位鸟嘌呤核苷酸转化因子交换蛋白1（Epac1）mRNA和蛋白表达的变化。
结果与CON组大鼠相比，STZ组大鼠的机械疼痛敏感性阈值下降（P＝0.035）。DMA大鼠注射Epac1激活剂8-pCPT组与生理盐水组相比，疼痛时间延长（2 h P＝0.012，4 h P＝0.020）。DMA组与CON组相比Epac1mRNA和蛋白的表达升高（均P〈0.01），鞘内注射shRNA可降低Epac1的mRNA和蛋白表达（P〈0.01, P＝0.020）。DMA组的PWT值明显低于CON组（P＝0.006）。
结论Epac1在糖尿病机械性疼痛大鼠中表达增高，下调Epac1可缓解疼痛。展开更多
Dbl家族鸟苷交换因子(GEFs)是Rho家族蛋白发生恶性转化的主要调控单位,它通过使Rho蛋白从无活性的GDP形式转换为GTP形式的Rho蛋白而发挥作用,参与细胞骨架重排,细胞的生长和活力。P92GEF是一GEFs家族分子。本研究通过Real time PCR对P92...Dbl家族鸟苷交换因子(GEFs)是Rho家族蛋白发生恶性转化的主要调控单位,它通过使Rho蛋白从无活性的GDP形式转换为GTP形式的Rho蛋白而发挥作用,参与细胞骨架重排,细胞的生长和活力。P92GEF是一GEFs家族分子。本研究通过Real time PCR对P92GEF在人体48种正常组织中的表达情况进行了测定;GST-pulldown技术对P92GEF的体内GEF活性进行了检测;双荧光素酶报告基因检测技术对下游小分子进行转录因子活性检测;应用免疫荧光双染标记法完成了高表达P92GEF对正常细胞骨架形态的影响;在细胞表型实验中分别使用CCK8法、Transwell法及软琼脂克隆形成实验检测了高表达P92GEF对细胞增殖侵袭迁移及体外成瘤能力的影响。研究结果显示P92GEF有841个氨基酸,具有典型的Dbl家族分子结构域,在肺组织中表达量最高,能够促使正常成纤维细胞中的应力纤维(stress fiber)增多,P92GEF转染的NIH3T3细胞可以独立生长和形成继发性病灶,同时促使细胞增殖,侵袭及克隆形成能力增强,体外转录因子活性检测发现该基因可能与JAK/STAT通路有关。因此,P92GEF是一个典型的鸟苷交换因子家族分子,能激活Rho家族分子Rho A,具有明显的癌基因特征。展开更多
文摘目的研究鸟嘌呤核苷酸转化因子交换蛋白1对大鼠糖尿病机械性疼痛的影响。
方法雄性SD大鼠随机分为CON组和STZ组，CON组随机分为CONshRNA组、CONEpac1shRNA组，STZ组大鼠诱导成为糖尿病机械性疼痛（DMA）模型后随机分为DMAshRNA组、DMAEpac1shRNA组、DMANS组、DMA8-pCPT组。Epac1shRNA慢病毒载体用于抑制Epac1的表达，对照shRNA慢病毒载体为阴性对照，8-pCPT为Epac1的激活剂。CONshRNA组、DMAshRNA组鞘内注射对照shRNA慢病毒载体，CONEpac1shRNA组、DMAEpac1shRNA组鞘内注射Epac1shRNA慢病毒载体，DMANS组足底注射生理盐水，DMA8-pCPT组足底注射8-pCPT。观察各组大鼠的后爪回缩阈值（PWT）变化，用实时PCR、Western印迹检测大鼠背根神经节（DRG）部位鸟嘌呤核苷酸转化因子交换蛋白1（Epac1）mRNA和蛋白表达的变化。
结果与CON组大鼠相比，STZ组大鼠的机械疼痛敏感性阈值下降（P＝0.035）。DMA大鼠注射Epac1激活剂8-pCPT组与生理盐水组相比，疼痛时间延长（2 h P＝0.012，4 h P＝0.020）。DMA组与CON组相比Epac1mRNA和蛋白的表达升高（均P〈0.01），鞘内注射shRNA可降低Epac1的mRNA和蛋白表达（P〈0.01, P＝0.020）。DMA组的PWT值明显低于CON组（P＝0.006）。
结论Epac1在糖尿病机械性疼痛大鼠中表达增高，下调Epac1可缓解疼痛。
基金Natural Science Foundation of China(30701719 30701519)~~
文摘Dbl家族鸟苷交换因子(GEFs)是Rho家族蛋白发生恶性转化的主要调控单位,它通过使Rho蛋白从无活性的GDP形式转换为GTP形式的Rho蛋白而发挥作用,参与细胞骨架重排,细胞的生长和活力。P92GEF是一GEFs家族分子。本研究通过Real time PCR对P92GEF在人体48种正常组织中的表达情况进行了测定;GST-pulldown技术对P92GEF的体内GEF活性进行了检测;双荧光素酶报告基因检测技术对下游小分子进行转录因子活性检测;应用免疫荧光双染标记法完成了高表达P92GEF对正常细胞骨架形态的影响;在细胞表型实验中分别使用CCK8法、Transwell法及软琼脂克隆形成实验检测了高表达P92GEF对细胞增殖侵袭迁移及体外成瘤能力的影响。研究结果显示P92GEF有841个氨基酸,具有典型的Dbl家族分子结构域,在肺组织中表达量最高,能够促使正常成纤维细胞中的应力纤维(stress fiber)增多,P92GEF转染的NIH3T3细胞可以独立生长和形成继发性病灶,同时促使细胞增殖,侵袭及克隆形成能力增强,体外转录因子活性检测发现该基因可能与JAK/STAT通路有关。因此,P92GEF是一个典型的鸟苷交换因子家族分子,能激活Rho家族分子Rho A,具有明显的癌基因特征。
