Rho鸟苷三磷酸酶调节细胞迁移中细胞骨架结构的研究进展

细胞迁移是胃肠黏膜损伤修复的重要步骤,胃肠黏膜损伤修复是益气健脾中药的作用机理之一。细胞迁移与细胞骨架的动态变化密切相关。Rho鸟苷三磷酸酶(Rho GTPases)对细胞骨架动态变化的调节有重要作用。通过综述细胞迁移中细胞骨架(微管、肌动蛋白丝、中间丝状体)所发生的动态变化和Rho GTPases调控细胞骨架的分子机制,以期为益气健脾中药治疗脾胃病的分子机理研究提供新思路,也为中医药胃黏膜保护机制研究提供参考。

乳腺癌组织中lncRNA ARHGAP5-AS1的表达观察及患者预后影响因素分析

目的观察乳腺癌组织中长链非编码核糖核酸Rho鸟苷三磷酸酶激活蛋白5反义RNA(lncRNA ARHGAP5-AS1)的表达变化,并分析患者预后的影响因素。方法选取乳腺癌及癌旁组织各82例份,采用实时荧光定量聚合链反应法(qRT-PCR法)检测上述组织lncRNA ARHGAP5-AS1,分析lncRNA ARHGAP5-AS1表达与乳腺癌患者临床病理参数的关系,比较不同lncRNA ARHGAP5-AS1表达的乳腺癌患者生存率,分析乳腺癌患者的预后影响因素。结果乳腺癌及其癌旁组织lncRNA ARHGAP5-AS1相对表达量分别为4.53±1.32、1.12±0.31,两者比较,P<0.05。lncRNA ARHGAP5-AS1表达与乳腺癌有无淋巴结转移、TNM分期、肿瘤分化程度、Ki-67表达有关(P均<0.05)。lncRNA ARHGAP5-AS1高表达者(lncRNA ARHGAP5-AS1≥4.53,42例)3年OS生存率为57.14%、3年FPS生存率为42.86%,lncRNA ARHGAP5-AS1低表达者(lncRNA ARHGAP5-AS1<4.53,40例)分别为82.50%、67.50%,两者比较,P均<0.05。有淋巴结转移、TNM分期、lncRNA ARHGAP5-AS1高表达是乳腺癌患者不良预后的影响因素(P均<0.05)。结论乳腺癌组织中lncRNA ARHGAP5-AS1表达升高,其过表达与乳腺癌淋巴结转移、分化程度、TNM分期及患者不良预后有关,可作为乳腺癌预后评估的潜在生物学指标,lncRNA ARHGAP5-AS1高表达、淋巴结转移、TNM分期是乳腺癌患者不良预后的影响因素。

小G蛋白与动脉粥样硬化

随着他汀类药物的多效性或降脂外作用被广泛研究,小G蛋白在心血管疾病中的作用越来越来受到关注。小G蛋白在调节血管内皮细胞功能、炎症细胞浸润和平滑肌细胞收缩、迁移、增殖以及基因表达等过程发挥重要作用,越来越多证据表明小G蛋白在动脉粥样硬化/再狭窄、血管痉挛、缺血再灌注损伤、肺动脉高压以及心肌肥厚等过程中扮演重要角色,靶向干预小G蛋白例如他汀或法舒地尔等为治疗这些心血管疾病提供一个新策略,现就小G蛋白与动脉粥样硬化的关系作一综述。

p62^(dok)酪氨酸磷酸化与STZ大鼠类Ⅰ型糖尿病关系的研究

为探讨 p62 dok在链脲酶素大鼠类 I型糖尿病中的变化和作用 ,采用 STZ复制大鼠类 I型糖尿病 ,实验分正常对照组、链脲酶素类 I型糖尿病组和 pervanadate治疗组。以免疫沉淀和蛋白印迹检测 p62 dok和 p2 1ras GAP及两者关系 ,同时观察体重和血糖的变化 ,并利用 SDS/PAGE检测肝、骨骼肌和脂肪组织中蛋白组成的变化。结果显示 ,链脲酶素组大鼠脂肪组织中酪氨酸磷酸化的p62 dok量明显降低 ,同时大鼠体重减轻 ,血糖明显升高 ,脂肪组织蛋白组成发生变化 ;而骨骼肌和肝组织蛋白组成未见明显异常。per-vanadate可升高酪氨酸磷酸化的 p62 dok量 ,并明显降低血糖浓度 ,恢复脂肪组织蛋白组成。三组间 p2 1ras

靶向Rho通路的抗高血压治疗策略研究进展

在过去几十年中,高血压的患病率呈逐年上升趋势。它不但增加左心室肥厚、心绞痛、心肌梗死和心力衰竭等心血管疾病的患病风险,还可能导致卒中(中风)、肾衰竭等相关后遗症。尽管目前有多种降压方案可供选择,但经过药物治疗后,只有半数患者可有效控制血压,这意味着需要进一步了解潜在的致病因素并寻求更有效的治疗方法。然而血压稳态非常复杂,涉及多个系统的综合控制,其中平滑肌收缩力和动脉阻力是重要因素。来自临床前动物模型和全基因组关联研究的有力证据表明,平滑肌收缩和血压稳态受小分子GTP酶RhoA及其下游靶点Rho激酶控制。本文总结了平滑肌细胞中对RhoA活性进行严格控制的信号通路及调节器的相关进展,并讨论了当前针对这些RhoA通路成分的高血压治疗策略。还讨论了RhoA通路中已知的等位基因变异,并介绍了这些遗传多态性对高血压遗传风险的影响及其临床表现。

胃肠安通过靶向ARHGAP25抑制裸鼠结肠癌原位移植瘤侵袭转移的机制研究

目的研究胃肠安对裸鼠结肠癌原位移植瘤Rho鸟苷三磷酸酶激活蛋白25(ARHGAP25)表达的影响,探索胃肠安抑制结肠癌侵袭转移的分子机制。方法采用人结肠癌HCT-116细胞制作原位移植瘤模型,将造模后的裸鼠随机分为空载体组、ARHGAP25过表达组、空载体+胃肠安低浓度组和空载体+胃肠安高浓度组,每组6只。比较各组原位移植瘤的瘤质量、体积、抑瘤率;免疫组织化学法检测原位移植瘤中ARHGAP25阳性表达;RT-PCR法检测原位移植瘤中ARHGAP25 mRNA表达,Western blot法检测ARHGAP25、基质金属蛋白酶7(MMP-7)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、E盒结合锌指蛋白1(ZEB1)及β-连环蛋白(β-catenin)的表达。结果各组裸鼠原位移植成瘤率为100%。ARHGAP25过表达组、空载体+胃肠安低浓度组和空载体+胃肠安高浓度组的抑瘤率分别为88.03%、22.79%和51.48%。ARHGAP25过表达组的原位移植瘤质量较空载体组显著减少(P<0.05);ARHGAP25过表达组和空载体+胃肠安高浓度组的原位移植瘤体积较空载体组显著减小(P<0.05)。与空载体组相比,ARHGAP25过表达组、空载体+胃肠安低浓度组原位移植瘤中ARHGAP25阳性表达面积显著升高(P<0.05);ARHGAP25过表达组、空载体+胃肠安低浓度组、空载体+胃肠安高浓度组的原位移植瘤ARHGAP25 mRNA的表达显著上调(P<0.05);ARHGAP25过表达组、空载体+胃肠安低浓度组、空载体+胃肠安高浓度组的原位移植瘤ARHGAP25蛋白表达显著上调(P<0.05),MMP-7、MMP-9、ZEB1及β-catenin蛋白表达明显下调(P<0.05)。结论胃肠安可抑制裸鼠结肠癌原位移植瘤的生长,促进ARHGAP25表达,降低上皮-间充质转化相关分子ZEB1、β-catenin、MMP-7及MMP-9的表达,抑制结肠癌裸鼠原位移植瘤的侵袭转移。

牛磺酸对裸鼠乳腺癌模型肿瘤生长的影响及其机制

目的探讨牛磺酸对裸鼠乳腺癌模型肿瘤生长的影响及机制。方法 10只SPF级5周龄裸鼠接种MDA-MB-231乳腺癌细胞后随机分为牛磺酸干预组和对照组,每组5只。牛磺酸干预组给予添加5%的牛磺酸饮水,对照组给予正常无菌饮水。测量两组小鼠肿瘤体积和肿瘤质量,采用蛋白免疫印迹法检测雌激素受体(estrogen receptor,ER)、孕激素受体(progesterone receptor,PR)、人类表皮生长因子受体2(human epidemic growth factor receptor2,HER-2)和鸟苷三磷酸酶激活蛋白(guanosine triphosphatase activating protein,p21ras)表达量的变化。结果实验结束时所有裸鼠均存活,裸鼠乳腺癌模型造模成功。牛磺酸对裸鼠乳腺癌模型肿瘤的抑制率为41.6%。相对于对照组,牛磺酸干预组裸鼠肿瘤组织中ER表达量提高了134%(P<0.05),PR表达量提高了47.5%(P<0.05),HER-2表达量降低了67%(P<0.05),p21ras表达量降低了62.2%(P<0.01)。结论牛磺酸可抑制裸鼠乳腺癌模型肿瘤生长,其机制可能与上调ER、PR和下调HER-2、p21ras有关。

辛伐他汀抑制心肌细胞Rho A、Rho GTPase表达对心室肥厚的影响

目的探讨辛伐他汀对心力衰竭模型兔抑制心肌肥厚、改善心功能的影响及机制。方法24只新西兰白兔,均分四组,除假手术组外,通过破坏主动脉瓣和缩窄腹主动脉,增加左心室前、后负荷,建立慢性心力衰竭模型;术后(除心衰对照组)早干预组(即起,连续8周)和晚干预组(第5周起,连续4周)予辛伐他汀每天5mg/kg灌胃,实验结束取心肌细胞,Western-blot检测细胞膜RhoA蛋白表达,[γ-32P]电泳分析RhoGTPase活性;实验前、结束时均行超声心动图检查。结果心衰对照组室间隔厚度(LVSd)、左心室舒张期内径(LVIDd)、左心室后壁厚度(LVPwd)、左心室收缩期内径(LVIDs)、心脏重量(HW)、左心室重量(LVW)、心脏/体重(HW/BWradio)、左心室/体重(LVW/BWradio)明显高于假手术和早、晚干预组(P<0.05,P<0.01);左室射血分数(EF)、左室长轴缩短率(FS)明显低于假手术组和早、晚干预组(P<0.05,P<0.01);心肌细胞膜RhoA蛋白表达、RhoGTPase活性明显高于假手术组和早、晚干预组(P<0.01)。结论辛伐他汀可抑制细胞膜RhoA蛋白表达、RhoGTPase活性,从而抑制心肌肥厚、改善心功能。

Rho GTPases与骨髓间充质干细胞的迁移和分化

Rho家族小分子鸟苷三磷酸酶（small GTPases of Rho family，Rho GTPases）是调节细胞许多生理病理活动的关键分子开关，参与细胞骨架、基因转录、细胞周期进程、细胞黏附的调控及多条信号通路的调节。骨髓间充质干细胞（bone marrow-derived mesenchymal stem cells，MSCs）是一类具有自我更新和多向分化潜能的特殊细胞，通过增殖、迁移、分化等途径参与机体损伤组织的修复过程。研究表明，Rho GT-Pases在MSCs迁移、分化等过程中起着重要的调节作用。