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线粒体DNA缺失HepG2细胞系的建立、鉴定及放射生物学特性
被引量:
2
1
作者
孙恒文
潘燚
+5 位作者
曾子君
方良毅
张红丹
谢松喜
李伟雄
许家彬
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第6期783-788,共6页
目的为研究人肝癌细胞系Hep G2线粒体DNA(mt DNA)缺失后的放射生物学特性,建立并鉴定mt DNA缺失Hep G2(ρ0Hep G2)细胞系。测定辐射干预下mt DNA缺失(Rho0)肝癌细胞的凋亡情况、侵袭能力以及辐射敏感性的变化。方法在含有溴化乙锭(EB)...
目的为研究人肝癌细胞系Hep G2线粒体DNA(mt DNA)缺失后的放射生物学特性,建立并鉴定mt DNA缺失Hep G2(ρ0Hep G2)细胞系。测定辐射干预下mt DNA缺失(Rho0)肝癌细胞的凋亡情况、侵袭能力以及辐射敏感性的变化。方法在含有溴化乙锭(EB)、丙酮酸、尿嘧啶的特殊培养基中培养Hep G2细胞,经30次传代后,有限稀释法筛选完全去除mt DNA的克隆。去除丙酮酸及尿嘧啶后,观察细胞的存活情况。PCR法鉴定mt DNA的缺失。用6Mv X射线梯度剂量照射Hep G2细胞和ρ0Hep G2细胞,平板克隆法绘制生长曲线,线性二次方程拟合生存曲线,计算α/β。2Gy剂量辐射细胞,24 h后用Hochest33342细胞核染色,比较Hep G2细胞与ρ0Hep G2凋亡率的差异。用Transwell法测定两种不同细胞的侵袭能力。结果在含EB特殊培养环境下,Hep G2细胞可持续生长传代至30代,去除丙酮酸和尿嘧啶后,细胞短时间内大量死亡。经PCR法证实mt DNA完全缺失。ρ0Hep G2细胞α/β显著低于正常Hep G2细胞,辐射抵抗能力增强。辐射干预后ρ0Hep G2的凋亡比例显著减少。ρ0Hep G2穿膜细胞数显著增多。结论在EB长期诱导下,Hep G2肝癌细胞可被成功诱导为mt DNA缺失细胞。ρ0Hep G2细胞的辐射抵抗性显著增强,抗凋亡能力及侵袭能力均提高。
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关键词
辐射敏感性
HEPG2
rho0
CELLS
凋亡
下载PDF
职称材料
题名
线粒体DNA缺失HepG2细胞系的建立、鉴定及放射生物学特性
被引量:
2
1
作者
孙恒文
潘燚
曾子君
方良毅
张红丹
谢松喜
李伟雄
许家彬
机构
广东省人民医院//广东省医学科学院肿瘤中心放疗科
广东医学院附属彭湃纪念医院肿瘤科
出处
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第6期783-788,共6页
基金
国家自然科学基金(81302033)~~
文摘
目的为研究人肝癌细胞系Hep G2线粒体DNA(mt DNA)缺失后的放射生物学特性,建立并鉴定mt DNA缺失Hep G2(ρ0Hep G2)细胞系。测定辐射干预下mt DNA缺失(Rho0)肝癌细胞的凋亡情况、侵袭能力以及辐射敏感性的变化。方法在含有溴化乙锭(EB)、丙酮酸、尿嘧啶的特殊培养基中培养Hep G2细胞,经30次传代后,有限稀释法筛选完全去除mt DNA的克隆。去除丙酮酸及尿嘧啶后,观察细胞的存活情况。PCR法鉴定mt DNA的缺失。用6Mv X射线梯度剂量照射Hep G2细胞和ρ0Hep G2细胞,平板克隆法绘制生长曲线,线性二次方程拟合生存曲线,计算α/β。2Gy剂量辐射细胞,24 h后用Hochest33342细胞核染色,比较Hep G2细胞与ρ0Hep G2凋亡率的差异。用Transwell法测定两种不同细胞的侵袭能力。结果在含EB特殊培养环境下,Hep G2细胞可持续生长传代至30代,去除丙酮酸和尿嘧啶后,细胞短时间内大量死亡。经PCR法证实mt DNA完全缺失。ρ0Hep G2细胞α/β显著低于正常Hep G2细胞,辐射抵抗能力增强。辐射干预后ρ0Hep G2的凋亡比例显著减少。ρ0Hep G2穿膜细胞数显著增多。结论在EB长期诱导下,Hep G2肝癌细胞可被成功诱导为mt DNA缺失细胞。ρ0Hep G2细胞的辐射抵抗性显著增强,抗凋亡能力及侵袭能力均提高。
关键词
辐射敏感性
HEPG2
rho0
CELLS
凋亡
Keywords
radiosensitivity
HepG2
rho0
cells
apoptosis
分类号
R735.7 [医药卫生—肿瘤]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
线粒体DNA缺失HepG2细胞系的建立、鉴定及放射生物学特性
孙恒文
潘燚
曾子君
方良毅
张红丹
谢松喜
李伟雄
许家彬
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015
2
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