损伤相关分子模式在葡萄膜炎中的作用

天然免疫系统是宿主防御的第一道防线,主要由组织屏障、天然免疫分子和天然免疫细胞组成。天然免疫细胞通过模式识别受体识别病原相关分子模式(pathogen associated molecular pattern,PAMP)或损伤相关分子模式(damage associated molecular pattern,DAMP)启动炎症反应。DAMP是细胞应激或组织损伤后释放的多种具有免疫调节活性的细胞内分子,即内源性危险信号[1]。

β-榄香烯对VEGF诱导的人脐静脉内皮细胞迁移的影响及机制

目的探讨β-榄香烯对血管内皮生长因子(VEGF)诱导的人脐静脉内皮细胞迁移的影响及其作用机制。方法人脐静脉内皮细胞EA.hy926体外传代培养,随机分为对照组、VEGF组、VEGF+榄香烯组。对照组仅予无血清的DMEM培养基处理;VEGF组在对照组基础上予适量VEGF,使其终浓度为10 ng/m L;VEGF+榄香烯组在VEGF组基础上予适量β-榄香烯,使其终浓度为100μg/m L。各组处理24 h,收集细胞,采用Transwell小室法检测细胞迁移能力,Real-time PCR法检测细胞转录因子ETS1及迁移相关分子CDC42、RAC1、RAC2 mRNA表达,JASPAR数据库分析迁移相关分子CDC42、RAC1、RAC2启动子序列中可能的转录因子ETS1结合位点。结果对照组、VEGF组、VEGF+榄香烯组细胞迁移数分别为(9.4±3.7)、(50.4±13.9)、(23.7±8.4)个;与对照组比较,VEGF组细胞迁移能力明显增强(P<0.05);与VEGF组比较,VEGF+榄香烯组细胞迁移能力明显降低(P<0.05)。与对照组比较,VEGF组细胞转录因子ETS1及迁移相关分子CDC42、RAC1、RAC2 mRNA相对表达量均明显升高(P均<0.05);与VEGF组比较,VEGF+榄香烯组细胞转录因子ETS1及迁移相关分子CDC42、RAC1、RAC2mRNA相对表达量均明显降低(P均<0.05)。在迁移相关分子CDC42、RAC1、RAC2启动子序列中分别发现1、2、7个转录因子ETS1结合位点。结论β-榄香烯可抑制VEGF诱导的人脐静脉内皮细胞迁移,其机制可能与抑制转录因子ETS1表达,调控Rho GTP酶家族迁移相关分子CDC42、RAC1和RAC2的转录表达有关。

高迁移率族蛋白与真核基因表达调控

高迁移率族蛋白(high mobility group protein,HMG)是一系列的染色质相关蛋白,广泛存在于真核生物细胞中,含量丰富,因其在聚丙烯酰胺凝胶电泳中的高迁移率而得名.HMG蛋白家族可分为HMGB、HMGA和HMGN三类亚家族,各亚家族有其特征的结构域,这些结构域介导了HMG和DNA或染色质相关区域的相互作用.现已发现这些蛋白质具有多种重要生物学功能,其中几乎所有HMG都可以通过修饰、弯曲或改变染色质/DNA的结构,促进各种蛋白质因子形成大分子复合物来调节基因转录.

血浆Ras相关区域家族蛋白1A基因甲基化在肝细胞癌分子诊断中的价值

目的:建立一种可检测微量DNA标本中DNA甲基化的甲基化敏感性限制性内切酶-定量PCR(methylation-sensitive restriction enzymes-based quantitative PCR,MSRE-qPCR)方法,并运用该技术探讨血浆Ras相关区域家族蛋白1A(Ras association domain family1A,RASSF1A)基因甲基化检测在肝细胞癌(hepatocellutar carcinoma,HCC)非侵入性诊断中的价值。方法:用MSRE HhaⅠ消化DNA样品,再用qPCR技术分析酶切结果,建立检测RASSF1A基因甲基化的MSRE-qPCR方法。以45例肝组织(20对HCC患者手术切除肿瘤标本及匹配非癌组织和5例正常肝)为材料,测试该方法的应用价值;运用亚硫酸氢盐测序PCR(bisulf ite sequencing PCR,BSP)技术进行进一步验证,并与甲基化特异性PCR(methylation specif ic PCR,MSP)方法相比较。再运用该技术检测150例血浆标本(包括72例HCC患者、37例肝硬化或慢性肝炎等良性病变患者和41例健康对照)的RASSF1A基因甲基化状态,并分析其与HCC患者临床病理参数的关系。结果:MSRE-qPCR法可定量检测低至1%以下的RASSF1A甲基化片段。20例HCC组织中有14例(70%)发生RASSF1A高甲基化,对应非癌组织中RASSF1A甲基化阳性率为25%,而5例正常肝组织均为阴性。MSRE-qPCR结果经BSP验证无误,且与MSP检测结果具有较好的一致性。HCC患者血浆RASSF1A甲基化阳性率(47/72,65.3%)显著高于健康对照(1/41,2.4%)和肝良性病变组(3/37,8.1%),差异均有统计学意义(P<0.0001)。联合检测血浆RASSF1A甲基化与血清AFP可显著提高HCC诊断效率。结论:建立的MSRE-qPCR方法要求样本少、操作简便、成本低廉,可定量检测RASSF1A基因甲基化水平。血浆RASSF1A甲基化分析对于HCC的非侵入性诊断具有重要价值。

热休克蛋白27与妊娠及其相关疾病的关系

热休克蛋白27（heatshockprotein27，Hsp27）是小分子热休克蛋白（smallheatshockprotein，sHsp）家族成员，广泛存在于各种组织中。作为一种伴侣蛋白，其序列高度保守，能够协助细胞内其他多肽链完成正确的折叠、组装、转运和降解，在调节细胞迁移、凋亡、收缩、氧化应激状态等方面发挥重要作用。