GDP解离抑制因子2对猪胚胎发育的影响

[目的]观察GDP解离抑制因子2(GDI2)对猪胚胎发育过程的影响.[方法]采用改良的退火对照引物(ACPs)差异表达技术检测人工授精及核移植猪胚胎中的差异表达基因,利用实时定量PCR法确认基因的表达情况.[结果]通过改良的ACP技术获得了若干个差异表达基因,采用实时定量PCR技术进行了进一步确认,结果显示GDI2基因在核移植猪胚胎中的表达水平明显低于人工授精猪胚胎(P<0.01).[结论]GDI2可能参与猪胚胎的发育过程.

RhoGDI2基因抑制膀胱癌转移涉及基因和信号通路的生物信息学分析

目的利用生物信息学方法探讨Rho GTP酶GDP解离抑制因子2(rho GDP dissociation inhibitor 2,Rho GDI2)基因抑制膀胱癌转移涉及的基因和信号通路。方法从GEO datasets数据库搜索膀胱癌转移相关的全基因组表达谱芯片数据,使用GEO2R在线工具分析膀胱癌组织中Rho GDI2基因高表达组与低表达组之间的差异表达基因,再筛选出多组表达谱芯片数据中一致性上调或下调的基因,最后使用DAVID在线工具进行差异表达基因信号通路富集。结果得到Rho GDI2基因在膀胱癌组织中高表达组和低表达组一致性高的差异表达基因,其中A2M、CORO1A、ENC1、FGD3为上调基因中一致性高的差异表达基因。通过基因信号通路富集分析得到膀胱癌组织中Rho GDI2基因调控的主要信号通路为Vav-Rho A-ROCK-MLC和Ras-Raf-MEK。结论 Rho GDI2基因可能通过Vav-Rho A-ROCK-MLC和Ras-Raf-MEK信号通路调节肌丝蛋白、细胞骨架以及细胞的增殖、分化等,进而抑制膀胱癌转移。

缺氧缺血性脑损伤新生大鼠脑神经细胞凋亡及脑组织中Rho GDP解离抑制因子和Bcl-2表达的变化

目的研究RhoGDP解离抑制因子（Rho GDP dissociation inhibitor 2，RhoGDI2）mRNA及Bcl-2mRNA的表达在缺氧缺血性脑损伤（hypoxic-ischemic brain damage，HIBD）中的作用和机制。方法30只新生7日龄SD大鼠按照完全随机化方法分为假手术组及HIBD6h和48h组，每组10只。采用流式细胞仪检测脑细胞凋亡情况，并用Real—timeRT—PCR方法测定脑组织中RhoGDI2和Bcl-2mRNA表达水平。结果（1）新生大鼠HIBD后48h结扎侧大脑半球脑水肿明显。（2）HIBD6h出现典型的凋亡细胞峰，细胞凋亡率为（1．40±0．12）％。HIBD48h凋亡峰更为明显，细胞凋亡率达到（15．86±0．98）％。缺氧缺血后与假手术组相比，差异有统计学意义（P〈0．01）。（3）假手术组大鼠RhoGDI2和Bcl-2mRNA表达水平较高（4．12±0．74、2．55±0．65），在HIBD6h后二者表达开始下降（3．19±0．77、1．96±0．36），48h降低更加明显（1．04±0．18、1．06±0．17），与假手术组比较，HIBD各时间点RhoGDI2和Bcl-2mRNA的表达均明显降低，差异有统计学意义（P〈0．01）。（4）缺氧缺血后各时间点RhoGDI2mRNA的表达和Bcl-2mRNA的表达呈正相关（r=0．831，P〈0．05）。结论脑缺氧缺血后，随着凋亡的出现，RhoGDI2和Bcl-2mRNA表达水平降低，提示RhoGDI2表达失衡可能通过Bcl-2参与新生大鼠HIBD中凋亡的发生。

GDI2通过p75NTR通路调节结直肠癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡

目的:探讨GDP解离抑制因子2(GDI2)对结直肠癌(CRC)细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡以及细胞周期的影响及其机制。方法:TCGA数据库分析GDI2 mRNA在CRC肿瘤组织中的表达。将CRC细胞分为sh-NC组和sh-GDI2组,采用CCK-8法检测细胞活力,克隆形成实验检测细胞增殖,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭,流式细胞术检测细胞凋亡和周期,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测GDI2基因表达,western blotting检测GDI2蛋白和神经生长因子受体(p75NTR)通路关键因子(IKK、p-NF-κB和p-IκB)的表达。构建异种移植瘤裸鼠模型,观察GDI2对CRC肿瘤生长的影响。结果:与癌旁正常组织和正常结肠上皮细胞相比,GDI2在CRC患者肿瘤组织和细胞系中的表达上调(P<0.05)。sh-GDI2能抑制CRC细胞增殖、迁移、侵袭,阻滞细胞周期进程,并促进凋亡(均P<0.05)。与sh-NC组相比,sh-GDI2组p75NTR蛋白表达上调,IKK、p-NF-κB、p-IκB蛋白表达下调(均P<0.05)。敲低GDI2可明显抑制裸鼠体内CRC肿瘤的生长(P<0.05)。结论:敲低GDI2可能通过p75NTR信号通路抑制CRC细胞增殖、侵袭和迁移,促进细胞凋亡。

胃癌中RhoGDI2、CIAPIN1的原位表达及其相关性

目的:观察RhoGTP酶解离抑制蛋白2(RhoGTPase dissociation inhibitor 2,RhoGDI2)、细胞因子诱导的凋亡抑制因子1(cytokineinduced apoptosis inhibitor 1,CIAPIN1)在胃癌患者组织中的表达状况,并评价其与胃癌临床病理特征的相关性,分析两者表达相关性.方法:采用免疫组织化学技术检测94例胃癌组织中RhoGDI2、CIAPIN1的表达状况,并分析两者表达相关性.结果:胃癌组织中RhoGDI2和CIAPIN1蛋白表达阳性率分别为67.02%、77.66%;RhoGDI2和CIAPIN1在胃癌中的蛋白表达与胃癌分化程度、肿瘤浸润深度、淋巴结转移个数、有无远处转移和TNM分期显著相关;RhoGDI2与CIAPIN1的表达正相关.结论:胃癌组织RhoGDI2、CIAPIN1的蛋白表达水平密切相关.CIAPIN1极可能受到RhoGDI2的调控,为RhoGDI2在胃癌浸润转移过程中的下游靶点基因,两者很可能共同参与调节胃癌的侵袭转移过程.

RhoGDI2蛋白的高表达与结直肠癌侵袭和转移的相关性分析

目的通过检测Rho GTP酶解离抑制因子2(Rho GTPase dissociation inhibitor 2,Rho GDI2)在结直肠癌和癌旁组织中的表达并结合临床病理特点进行分析,探讨Rho GDI2的蛋白表达水平与结直肠癌侵袭转移的关系及在肿瘤发生发展中的作用。方法选取山东省医学科学院附属医院2012年07月至2014年07月采取手术切除的153例结直肠癌病例,采用免疫组织化学检测153例肿瘤组织标本和癌旁标本中Rho GDI2蛋白的表达水平。结果 Rho GDI2蛋白在结肠癌组织中呈阳性表达,且主要在胞浆中表达;但在癌旁正常组织中无阳性表达(57.5%vs 0.00%)。结直肠癌组织中Rho GDI2蛋白的表达在低分化组显著高于高中分化组(χ2=2.090,P<0.05)。Rho GDI2的阳性表达与结直肠肿瘤的大小呈正相关,肿瘤越大阳性表达率越高(χ2=4.293,P<0.05),并随着肿瘤浸润深度阳性表达率增加(χ2=1.711,P<0.05),其在有淋巴结转移者表达显著高于无淋巴结转移者(χ2=5.925,P<0.05)、有远处转移者显著高于无远处转移者(χ2=5.519,P<0.05),并且与临床分期密切相关,分期较晚的显著高于分期较早的(χ2=5.683,P<0.05)。Rho GDI2在结直肠癌中的阳性表达与年龄(<60 years vs≥60 years)(χ2=0.054,P>0.05),性别(χ2=0.037,P>0.05)无相关性。结论Rho GDI2在结直肠癌中高表达,并且与结直肠癌的局部侵袭和远处转移呈正相关。Rho GDI2可能在结直肠的发生发展和侵袭转移过程中起着重要的作用。