高山红景天(Rhodiola sachalinensis A.Bor)茎尖包埋-玻璃化法超低温保存与植株再生

使用包埋-玻璃化法对两种来源的高山红景天茎尖进行超低温保存研究，探讨蔗糖预处理、包埋过程中渗透处理和不同温度下玻璃化液PVS2处理的时间对超低温保存后茎尖存活率的影响．结果表明，茎尖依次在0．3、0．5、0．7、1．0mol·L^-1的蔗糖溶液中各预培养1d后，转入1．0mol·L^-1的蔗糖溶液中继续培养4d，然后使用附加2mol·L^-1甘油和1mol·L^-1蔗糖的包埋液渗透处理60min，包埋珠在0℃处理180～210min后投入液氮，48h后用40℃水浴快速化冻3min，用含有1mol·L。蔗糖的改良MS培养液洗涤20min，转入MS＋6-BA1mg·L^-1＋NAAO．1mg·L^-1固体培养基中在22℃条件下进行暗培养，2d后转移入光照培养，最高成活率接近100％，再生植株生长和分化正常．

高山红景天对肝纤维化大鼠Smad_3 mRNA表达的影响

目的目前国内外尚缺乏理想的抗肝纤维化药物。为科学研制新型、高效、安全的抗肝纤维化药物,观察单方生药高山红景天对实验性肝纤维化大鼠的治疗效果,并探讨其作用机制。方法用四氯化碳诱导大鼠肝纤维化模型,将实验动物随机分为正常对照组、模型组、秋水仙碱组、红景天高剂量组、红景天低剂量组。除正常对照组外,其余4组均用四氯化碳诱发肝纤维化。各组于造模第8周末处死动物,分别用放射免疫法检测血清层黏连蛋白(laminin,LN),Ⅲ型前胶原(pro-collagen typeⅢ,PCⅢ),透明质酸(hyaluronic acid,HA)及Ⅳ型胶原(collagen typeⅣpeptide,CⅣ);RT-PCR检测肝组织Smad3mRNA的表达;作HE染色和胶原纤维特殊染色行肝组织病理形态学观察及电镜观察各组大鼠肝超微结构。结果与模型组大鼠比较,经该中药治疗,大鼠血清中LN、PCⅢ、HA、CⅣ水平明显降低(P<0.01);大鼠肝组织内Smad3mRNA表达明显下降(P<0.01);病理学检测大鼠肝组织病理学检测红景天高剂量组改善显著。结论高山红景天高剂量组能有效地抑制肝纤维化的发展,可能是通过下调肝组织内Smad3mRNA表达,降低肝细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的分泌而达到的。

复方红景天对肝纤维化大鼠肝组织Na^+/Ca^(2+)泵、TGF-β1 mRNA表达的影响

目的:探索复方红景天抗实验性大鼠肝纤维化的疗效与可能的分子机制.方法:用CC l4皮下注射法诱导SD大鼠肝纤维化模型,同时给予复方红景天颗粒口服进行干预性治疗,观察大鼠血清Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原、透明质酸含量及肝组织Na+/Ca2+泵、TGF-β1,Ⅰ型前胶原α1 mRNA表达水平、肝组织病理学变化.结果:与模型组相比,复方红景天可明显降低大鼠血清PCⅢ(μg/L)(164.25±45.68vs265.54±98.21),CⅣ(96.73±14.68vs159.67±29.64),HA(289.35±75.68vs455.79±113.55)水平,(q=4.26,4.94,3.68,均为P<0.05);复方红景天可抑制NCX,TGF-β1,α1(Ⅰ)mRNA表达(半定量积分分别为1.50±0.19vs2.45±0.31,1.06±0.12vs2.47±0.37,1.26±0.17vs2.50±0.40,q值分别为3.52,3.93,4.04,均为P<0.05).肝组织纤维沉积明显减少(肝纤维化积分为2.43±0.70vs3.53±0.68,q=3.69,P<0.05).NCX,TGF-β1 mRNA表达与PCⅢ,CⅣ,HA,α1(Ⅰ)mRNA及肝组织的纤维化积分呈正相关,相关系数r分别为0.52,0.49,0.56,0.48,0.60及0.47,0.61,0.56,0.49,0.51(均为P<0.05).结论:复方红景天良好的抗肝纤维化作用,其分子机制可能与抑制NCX及TGF-β1mRNA表达从而减少胶原纤维合成有关.

一种高山红景天成分FT-IR和FT-Raman光谱的研究

本文对高山红景天提取物中的一种新化合物进行了红外和拉曼光谱的测定 。

高山红景天雌株特异性SRAP标记发掘及其关联基因功能分析

以长白山高山红景天雌株、雄株和两性株构建的不同性别植株的DNA集团混池(BSA池),利用相关序列多态性(SRAP)标记技术,发掘雌雄植株特异性SRAP标记,并通过生物信息学分析,阐明与其相关联基因的功能。结果表明:用228个SRAP引物组合在7个BSA池中所检出的1 044条SRAP条带中,仅Me03-Em02SRAP引物组合在雌株BSA池中获得1条DNA序列长度为678bp的雌株特异性Me03-Em02SRAPDNA片段;该片段属于叶绿体基因组的核骨架scaffold-ZJUL-2062946。Me03-Em02,SRAP-DNA片段作为高山红景天雌株特异性Me03-Em02SRAP标记与叶绿体基因组上光合代谢途径中的psbE基因相关联;该基因编码的蛋白为细胞色素b559蛋白的α亚基,是一种叶绿体跨膜蛋白。

库页红景天提取物对刀豆蛋白A诱导的小鼠免疫性肝损伤的保护作用

[目的]探讨库页红景天乙醇提取物对刀豆蛋白A(Con A)诱导的小鼠免疫性肝损伤的保护作用.[方法]取昆明种雄性小鼠,随机分为空白对照组、模型对照组和库页红景天提取物高、低剂量(1.0,0.5g/kg)组.库页红景天提取物高、低剂量组每日灌胃给予相应剂量的库页红景天提取物,连续7d.末次给药1h后,模型对照组、库页红景天提取物高、低剂量组均尾静脉注射给予Con A溶液18mg/kg.8h后采集血液,收集肝脏,测定各组血清AST,ALT,TNF-α,IL-6,IFN-γ和IL-4水平及肝脏MDA,GSH,SOD水平,并观察肝组织病理变化.[结果]与模型对照组比较,库页红景天提取物高、低剂量组肝脏指数、血清ALT水平及肝组织MDA含量均明显降低(P<0.05,P<0.01),肝脏GSH,SOD水平均明显升高(P<0.05,P<0.01),血清TNF-α,IL-6,IFN-γ和IL-4水平均明显降低(P<0.05,P<0.01),库页红景天提取物高剂量组AST活性明显降低(P<0.05).[结论]库页红景天乙醇提取物对Con A诱导的小鼠免疫性肝损伤具有保护作用.

高山红景天细胞悬浮培养生长和营养成分摄取动力学及其计量关系

探讨了高山红景天细胞悬浮培养过程中生长及主要营养成分摄取的动力学，计算了碳源、氮源对生物量的得率系数．通过对细胞基本元素组成的分析，建立了细胞生长的基本计量方程、并从理论上测算出得率系数和呼吸商．最后，从碳平衡及氧平衡方程建立了细胞生长速率、底物摄取速率与O2消耗速率及CO2排出速率之间的关联式．

红景天甙抗二倍体细胞衰老的实验研究

目的 观察红景天甙对人胚肺二倍体成纤维细胞的抗老化作用。方法 在培养的二倍体细胞营养液中加入适量的红景天甙 ,待细胞传至 1 0代后 ,检测二倍体细胞内 SOD活性及 L PO含量。结果 实验组二倍体细胞内 SOD活性明显高于对照组 (P<0 .0 1 ) ,而 L PO含量实验组低于对照组 (P<0 .0 5)。结论 红景天甙可显著提高二倍体细胞中 SOD活性 ,降低 LPO含量 ,延长二倍体细胞的老化。

红景天水提液对酪氨酸酶抑制效果的初步研究

To discuss the inhibiting mechanism of water extraxt solution from Rhodiola on theTyrosinase activity.Tyrosinase inhibiting rate is determined and Lineweaver-Burk curve is made by determining the tyrosinase activity before and after drug（water extract solution） interference oxidant of method,on which we deduce the inhibiting types of the drug.The water extract solutioncan inhibit the tyrosinase activity remarkably with the half inhibiting concentration IC50 3.9g/L.The water extract solution can inhibitthe tyrosinase activity and it is thenoncompetitive inhibitor of tyrosinase.

冰冻切片技术在高山红景天细胞学研究中的应用

为了解决利用普通石蜡切片观察植物样品需要进行脱水、浸透、包埋操作且耗时长的问题,以高山红景天为试材,对其根和茎进行冰冻切片,过程简单有效且图版清晰,在1d内即可获得高质量图片。冰冻切片的关键步骤是选择合适的甘油浓度、切片时采用的温度及展片技术。

长白山地区几种红景天品种的傅里叶变换红外光谱法鉴别研究

分别用石油醚 ,氯仿 ,甲醇对长白山地区的野生和栽培高山红景天和长白红景天进行了提取 ,并首次对提取物进行了傅里叶变换红外光谱法测定 ,还用红景天块做了相应的验证研究。结果表明 ,长白山地区的野生和栽培高山红景天和长白红景天的红外光谱图谱有明显不同 。

高山红景天叶片愈伤组织诱导与植株再生

以高山红景天叶片作为外植体,研究了影响愈伤组织诱导、芽增殖、生根的主要因素。结果表明:高山红景天叶片切块诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+6-BA 2mg/L+NAA0.5mg/L,诱导率达88.33%;高山红景天叶片切块经诱导可产生3种色泽的愈伤组织,其中只有绿色愈伤组织诱芽容易,绿色愈伤组织在附加1mg/L6-BA+0.1mg/LNAA的MS培养基中有利于芽的分化和增殖,培养7周左右,平均每个外植体分化形成的再生小植株数达到21.33个;增殖苗转入1/2MS培养基中生根率高达100%。

超临界CO_2萃取红景天中红景天苷、苷元酪醇的研究

采用超临界CO2 萃取法和乙醇常温浸提法相比较 ,研究从红景天中提取红景天苷、苷元酪醇的工艺条件 ,结论是 :采用超临界CO2 萃取法能萃取出红景天生药中红景天苷的 1 .2 % ,提取率不高 ,但该方法能萃取出80 %的苷元酪醇 ,萃取液中苷元酪醇的相对含量可达 45 .68% ;乙醇常温浸提法能将红景天苷、苷元酪醇同时有效萃取 ,且得率较高 ,但是萃取液中两物质相对含量较低 ,进一步分离纯化将有难度。本研究结果表明 ,将超临界CO2 萃取法和乙醇常温浸提法有效结合 ,可实现两物质的有效分离 ,推进红景天有效成分的产业化进程。

复方红景天对肝纤维化模型大鼠血清中TNFα、TGFβ_1和IL-6的作用

目的 探讨中药复方红景天对CCl4 诱导肝纤维化模型大鼠血清中TNFα、TGFβ1与IL - 6水平的影响。方法 雄性SD大鼠以CCl4 造模 ,并ig复方红景天。血清中肿瘤坏死因子α(TNFα)、转化生长因子β1(TGFβ1)、白介素 6 (IL - 6 )测定采用ELISA法 ,组织切片采用HE染色、VG和Masson染色。结果 治疗组TNFα、TGFβ1和IL - 6血清水平与未给予复方红景天组比较均存在非常显著的差异 (P <0 .0 0 1)。 3种细胞因子水平与肝组织切片的肝纤维化积分呈现良好的相关性。结论 复方红景天能显著降低肝纤维化模型大鼠血清中TNFα、TGFβ1与IL - 6水平 ,抑制肝组织纤维化形成。

高山红景天多糖对病毒感染大鼠心肌细胞的抑制作用

目的：观察高山红景天多糖对柯萨奇Ｂ３病毒感染ＳＤ大鼠心肌细胞的抑制作用。方法：采用原代培养乳鼠心肌细胞的方法，建立实验性病毒性心肌炎模型。结果：高山红景天多糖能明显的抑制体外培养心肌细胞在受到柯萨奇Ｂ３病毒感染后导致的心肌酶释放；显著降低病毒在心肌细胞中的增殖量；其半数有效抑制浓度为１５０ｍｇ·Ｌ－１；有效浓度平均抑制率为７１．３％。结论：高山红景天多糖对在ＳＤ大鼠心肌细胞内增殖的柯萨奇Ｂ３病毒具有一定的抑制作用。

药剂防治高山红景天根腐病初步研究

调查发现，从长白山引种至辽宁省栽培的高山红景天根茎腐烂十分严重，蔓延迅速．１～２年生植株发病率为３０％～４０％，３～４年生植株死亡率高达８０％～９０％。由发病区采集典型病株，在病健交界处取样，以组织分离法分离纯化，鉴定为高山红景天根腐病，属尖镰孢菌（ＦｕｓａｒｉｕｍｏｘｙｓｐｏｒｕｍＳｃｈｌｏｏｈｔ）引起。根据室内抑菌试验结果，进行田间药剂试验。试验结果表明，使用杀菌剂进行防治高山红景天根腐病，可以抑制极腐病的发展，有减轻根腐病的作用。

红景天对大鼠血清和组织匀浆中肝纤维化相关酶活性的影响

目的 观察红景天干预性治疗对大鼠血清与肝组织匀浆中 β -NAG、BDGP、MAO、ALD 4种肝纤维化相关酶活性的影响 ,探讨组织和血清中肝纤维化相关酶活性变化的关系及其与肝组织病理学变化的相关性。方法 SD大鼠随机分 3组 ,A组用四氯化碳皮下注射法诱导大鼠肝纤维化模型 ,B组造模同时给予红景天粉剂口服 ,C组为正常对照组。造模结束检测大鼠血清及肝组织匀浆中 4种肝纤维化相关酶活性的变化以及肝脏组织病理学的改变 ,并进行相关性分析。结果 口服红景天可抑制大鼠血清及肝组织匀浆 β -NAG、BDGP、MAO、ALD的活性 ,明显改善大鼠肝组织病理学变化 ,其组织匀浆酶活性、血清酶活性、肝组织病理变化三者呈正相关。结论 红景天可明显降低组织及血清肝纤维化酶谱活性 ,改善肝组织病理学变化 。

高山红景天愈伤颗粒组织悬浮培养动力学及工艺的研究

研究了高山红景天愈伤组织颗粒悬浮培养过程的生长及红景天甙合成的规律,发现红景天甙合成与细胞生长偶联,两者之间的关系表示为q=5.38×10^(-3)μ。其产率系数Y_(x/s)及维持系数m分别为0.66g·g^(-1)和0.033g·(g·d)^(-1)。在3.5L气升式反应器中研究了培养过程的操作特性,发现“发泡”现象几乎不存在,氧传递系数K_La的变化不同常规植物细胞的悬浮培养,愈伤组织颗粒在培养过程中经历一个由小变大,后又变小的过程。

高山红景天细胞悬浮培养中红景天甙生物合成代谢调控Ⅱ:真菌诱导物的影响

考察了6种真菌诱导物对高山红景天(Rhodiola sachalinensis A. Bor)细胞生长与红景天甙积累的影响。其中以黑曲霉诱导物效果最好。在细胞培养初期添加浓度为10mg(carbohydrate)/L的黑曲霉诱导物能使培养细胞中红景天甙含量提高到0.995％。前体与诱导物调控组合运用最终使红景天甙产量达到167.4mg/L,是对照培养的3.5倍。另外,对真菌诱导物的作用机理也进行了探讨,真菌诱导物添加促进红景天甙的积累应该与激活培养细胞中的苯丙烷类代谢途径有关。

高山红景天愈伤组织的诱导及培养研究

分别以高山红景天根、茎、叶及种子萌发的子叶为外植体诱导出５种愈伤组织，并比较了这５种愈伤组织的生长速率及红景天甙的积累能力。通过对茎诱导愈伤组织的继代培养，初步选择了适宜的激素配比为３ｍｇ／ＬＢＡＡ＋０．３ｍｇ／ＬＮＡＡ，最适温度范围为２１－２５℃，ｐＨ值为５．８。光照对愈伤组织生长影响不显著，但不利于红景天甙的合成。