暖地大叶藓化学成分的研究

从真藓科大叶藓属植物暖地大叶藓Rhodobryum giganteum(schwaegr.)Par.的乙醇提取物中分离得到9个化合物,通过波谱分析鉴定其分别为麦角甾-7,22-双烯-3β,5α,6β-三醇(1),乌苏酸(2),琥珀酸(3),尿嘧啶(4),棕榈酸(5),槲皮素(6),碳二十九烷(7),β-谷甾醇(8),胡萝卜苷(9)。化合物1～9均为首次从该植物中分离得到。

苔藓植物光合色素含量测定方法——以暖地大叶藓为例

为了探讨苔藓植物光合色素含量测定方法的可靠性,设计了材料研磨或不研磨以及常见的80%丙酮和95%乙醇作为溶剂所组成的6个组合提取暖地大叶藓叶光合色素; 并采用光谱比色方法,比较了所测定叶绿素a、b以及类胡罗卜素含量之间的差异.发现研磨是藓叶光合色素提取的必要步骤,而提取溶剂以95%乙醇最佳,明显优于目前广泛应用的丙酮.综合分析表明, 95%乙醇提取并经研磨处理提取光合色素、光谱比色方法是苔藓植物光合色素含量测定的可靠方法.

聚酰胺柱层析法分离回心草总黄酮的研究

目的:确定聚酰胺柱层析法分离回心草总黄酮的条件。方法:对聚酰胺用量、乙醇洗脱浓度、洗脱速度等方面进行考察。结果:干法上样,聚酰胺用量以药材:聚酰胺=1:1为佳,以50%的乙醇为洗脱溶剂,2倍柱体积/h为最佳的洗脱速率。结论:聚酰胺可较好地用于回心草总黄酮的分离富集。

云南习用药材回心草的质量标准研究

系统研究了云南习用药材回心草的质量标准,明确其基源植物为真藓科植物暖地大叶藓Rhodobryum giganteum(Hook.)Par.,并对药材正名、生药性状、鉴别、检查、热水浸出物等质量标准项目进行了全面的对比研究和归纳,研究结果已经为云南省中药材标准采用。

暖地大叶藓的气候适应性及其在中国的潜在分布区预测

基于13个环境因子（海拔、植被覆盖率和11个气候因子）和51个地理分布记录数据,预测了暖地大叶藓在中国的潜在地理分布区和其他对13个环境因子的需求特点.结果发现：暖地大叶藓在贵州、云南、重庆、福建、浙江、湖北、四川、湖南、台湾和江西有很高的气候适应性,而在西北、东北和华北的适生能力低;在最冷季节、最干季节、最暖季节的平均温度分别为5~10℃、5~10℃和20~24℃,以及季节雨量变化、植被覆盖度和海拔分别为55~60mm、30%~60%和600~2 500m的区域下,暖地大叶藓具有高的潜在分布概率;随着最湿月份雨量增加和平均昼夜温差的下降,暖地大叶藓的分布概率上升.

云南不同地区回心草中多糖的含量测定

目的测定云南不同地区回心草中多糖的含量。方法通过正交实验确定提取回心草冻干粉的最佳工艺,采用苯酚-硫酸法进行多糖的含量测定,并进行方法学考察。结果最佳水提工艺为煎煮2次,一煎30 min,加水24倍,二煎25 min,加水22倍。葡萄糖在0.01~0.05 mg/mL范围内与其吸收度呈良好的线性关系,其线性回归方程为y=14.29x+0.2097(R2=0.9994),平均回收率为98.8%,15批回心草水煎液中的多糖含量范围在15.75%~65.96%。结论该提取方法简便易行,结果可靠,精确度高,可用于回心草中多糖的含量测定。

回心草对脐静脉内皮细胞的保护作用及对分泌一氧化氮和一氧化氮合酶的影响

目的:研究回心草水提取液及其含药血清对人脐静脉内皮活细胞数、内皮细胞一氧化氮(NO)及一氧化氮合酶(NO合酶)的影响,探讨回心草抗动脉硬化的药理作用机制。方法:采用H2O2建立体外培养的人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)损伤模型。采用MTT法测定回心草提液对H2O2损伤的内皮细胞的吸光度(OD);采用经典Griess Reagent检测各剂量组细胞上清液中NO浓度,采用一氧化氮荧光检测探针DAF-FMDA(3-amino,4-aminomethyl-2′,7′-difluorescein,diacetate)检测细胞内NOS的活性。结果:H2O212.5 mmol.L-1为最合适的细胞刺激浓度;回心草药液与H2O2损伤的血管内皮细胞共同孵育24 h后,2.50 mg.mL-1、3.33 mg.mL-1浓度组与模型组比较有显著差异(P<0.05,P<0.01);回心草水提液作用于内皮细胞,进行NO,NOS含量的测定,其中回心草2.50 mg.mL-1剂量组有显著作用(P<0.05)。结论:12.5 mmol.L-1的H2O2作用24 h,可成功建立内皮细胞氧化应激损伤模型;回心草水提液直接作用于H2O2损伤的内皮细胞,2.50,3.33 mg.mL-1两个浓度组可以减轻内皮细胞的损伤;回心草2.50 mg.mL-1可增加NOS活性,促进NO的分泌。

回心草对心肌细胞缺氧损伤的保护作用

目的:研究回心草水提液对心肌细胞缺氧损伤的保护作用,并从氧化应激角度探讨其作用机制。方法:原代培养乳鼠心肌细胞,以3×105～5×105/mL密度接种于96孔板后第4天用无血清DMEM/F12培养48 h,然后置于缺氧环境(37℃,94%N2,1%O2,5%CO2)中继续孵育24 h,建立体外心肌细胞缺氧损伤模型,并采用噻唑蓝(MTT)法测定1,2,3,4,5 g.L-1回心草水提液干预24 h后细胞的活力;利用全自动生化分析仪测定细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量。结果:回心草水提液可提高缺氧损伤心肌细胞的活力,其中3,4 g.L-1组的吸光度(A)分别为(0.529±0.031),(0.534±0.024),与缺氧损伤组A值(0.498±0.012)比较差异显著(P<0.05,P<0.01);能降低LDH,CK活性和MDA含量,提高SOD活性,其中以回心草水提液3 g.L-1组效果最佳。结论:回心草水提液能够保护缺氧损伤的心肌细胞,可能与其改善氧化应激有关。

HPLC测定回心草中对羟基桂皮酸的含量

目的:采用HPLC测定5个不同批号回心草药材中对羟基桂皮酸的含量。方法:采用DIKMA Platisil ODS C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相乙腈-1%乙酸水(20∶80),流速1.0 mL.min-1,检测波长310 nm,柱温30℃。结果:对羟基桂皮酸在0.08～0.4μg线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率为95.7%～104.0%;5个不同批号回心草中对羟基桂皮酸的平均含量为0.111 5 mg.g-1。结论:该方法简便快速,分离效果好,灵敏度高,重复性好,可用于回心草药材的质量控制。

回心草无糖颗粒对糖尿病合并冠心病心绞痛的疗效观察

目的:观察回心草无糖颗粒治疗糖尿病合并冠心病心绞痛的临床疗效。方法:采用随机双盲对照方法,将105例糖尿病合并冠心病心绞痛病人分为两组:回心草无糖颗粒组(治疗组,15 g/包,2次/d,每次1包,冲服,66例)和麝香保心丸组(对照组,3次/d,每次2丸,口服,36例)。观察两组心绞痛发作频次、心电图、硝酸甘油停减率的变化。结果:心绞痛缓解总有效率:治疗组92.4%、对照组89.7%;心电图好转总有效率:治疗组57.6%、对照组43.6%(P<0.05);硝酸甘油停减率:治疗组83.3%、对照组79.5%。结论:回心草无糖颗粒对糖尿病合并冠心病心绞痛病人有效,疗效与麝香保心丸相当(心电图好转更明显)。

回心草提取工艺研究

目的:采用正交设计法,对回心草的提取工艺进行优化。方法:采用L9(34)正交试验,乙醇体积分数(A)、乙醇用量(B)、提取时间(C)作为3个因素,每个因素选择3个水平,以熊果酸转移率来确定最佳工艺条件。结果:B,A影响最大,C最小。结论:最佳提取条件是A1B3C2,即60%乙醇16倍量提取2次,每次2 h。

非线性振荡化学指纹图谱技术应用于回心草药材的定性定量分析研究

该文采用振荡化学指纹图谱技术建立一种暖地大叶藓回心草药材的定性定量分析新方法,完善云南习用药材回心草的质量控制标准。运用电化学工作站记录暖地大叶藓回心草在BrO-3-Ce(SO4)2-H2SO4-丙二酸/酒石酸振荡反应体系下,电位(E)随时间(t)的变化。对非线性振荡化学指纹图谱技术进行重复性考察,发现暖地大叶藓4个特征参数RSD≤4.1%,说明该方法重复性好,精密度高。通过考察不同粒度、转速及温度对振荡曲线特征参数的影响,在最优实验条件下以诱导时间、振荡周期为定量指标的特征参数,与中药加入剂量(0.1~1.1 g)线性关系较好,相关系数分别为0.978和0.975。最高电位与中药加入量呈现非线性关系,其相关系数高达0.999。此外,还将此方法用于暖地大叶藓回心草和大叶藓回心草的判别分析,二者外观相似,但指纹图谱差异较大,独立样本t检验结果表明,二者的特征参数诱导时间、振荡时间、最大振幅、振荡周期差异明显,为回心草药材基源鉴别提供了依据。