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Rhodococcus sp.T1菌株胞内精恶唑禾草灵酯酶酶学性质及分离纯化 被引量:1
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作者 董维亮 侯颖 +3 位作者 王飞 李周坤 黄彦 崔中利 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期78-84,共7页
[目的]Rhodococcus sp.T1是一株高效的精恶唑禾草灵(FE)降解菌株,T1菌株可以断裂FE的酯键将其转化为精恶唑禾草灵酸(FA)。对T1菌株胞内精恶唑禾草灵酯酶的酶学性质进行研究并对其进行分离纯化,以期为生物修复精恶唑禾草灵污染提供... [目的]Rhodococcus sp.T1是一株高效的精恶唑禾草灵(FE)降解菌株,T1菌株可以断裂FE的酯键将其转化为精恶唑禾草灵酸(FA)。对T1菌株胞内精恶唑禾草灵酯酶的酶学性质进行研究并对其进行分离纯化,以期为生物修复精恶唑禾草灵污染提供更多的理论依据。[方法]以酯酶的通用底物乙酸-1-萘酯作为定量测定胞内酯酶活力的底物,分析温度和p H值对酯酶活力和稳定性的影响,同时探讨金属离子对酯酶活力的影响;通过硫酸铵沉淀、疏水层析、DEAE离子交换层析和Superdex-200凝胶层析柱组合技术对精恶唑禾草灵酯酶进行分离纯化,计算了纯化过程中酯酶的比活力、纯化倍数和回收率。[结果]胞内酯酶最适反应p H值为8.0,在p H 4.0-10.0内处理24 h活性稳定;最适反应温度为42℃,在温度50℃以下处理30 min活性稳定;1.0 mmol·L^-1Ag^+对酯酶活力有强烈的抑制作用。纯化后的酯酶比活力从0.058 U·mg^-1提高到21.5 U·mg^-1,纯化倍数为369.5倍,回收率为3%。纯化后的粗酶经SDS-PAGE电泳后至少有4条明显的蛋白条带,通过酶谱确定精恶唑禾草灵酯酶条带的相对分子质量为42.3×10^3。[结论]精恶唑禾草灵酯酶具有较好的酸碱稳定性和热稳定性,在精恶唑禾草灵污染土壤修复中可能具有较好的应用潜力。 展开更多
关键词 rhodococcus sp.T1 精恶唑禾草灵 分离纯化 酶学性质 酯酶酶谱
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Rhodococcus sp.SHZ-1腈水合酶的高酶活发酵工艺 被引量:2
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作者 王超 张根林 +1 位作者 李春 吴丽 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期29-32,共4页
通过研究发酵过程中溶氧、生物量、腈水合酶活力以及残糖的变化规律和搅拌速度、通气量、接种量及诱导剂对产腈水合酶的影响,确立了5L发酵罐中Rhodococcus sp.SHZ-1腈水合酶的高酶活发酵工艺参数。结果表明,发酵过程中溶氧控制在30%以... 通过研究发酵过程中溶氧、生物量、腈水合酶活力以及残糖的变化规律和搅拌速度、通气量、接种量及诱导剂对产腈水合酶的影响,确立了5L发酵罐中Rhodococcus sp.SHZ-1腈水合酶的高酶活发酵工艺参数。结果表明,发酵过程中溶氧控制在30%以上有利于菌体快速生长和腈水合酶的合成。在pH7.2,温度30℃的发酵条件下,适宜的腈水合酶合成工艺条件为:接种量10%,通气量1.0vvm,搅拌速度采用由初始的200r/min调至500r/min的变速调控方式,同时于48h补加产酶诱导剂,发酵液腈水合酶的最高酶活力达到了9500U/mL,是摇瓶培养时最高酶活力8208U/mL的1.2倍,且比未进行工艺优化时最大产酶期缩短了20~24h,其最佳产酶期为52~60h。 展开更多
关键词 腈水合酶 诱导剂 发酵 rhodococcus sp.SHZ-1
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基于蛋白组学对苯胺降解菌Rhodococcus sp.AN-P1苯胺胁迫响应的研究 被引量:1
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作者 刘冰霜 王臣 +2 位作者 杨冲 刘庆华 谭周亮 《广东农业科学》 CAS 2020年第4期85-91,共7页
【目的】研究微生物在苯胺胁迫环境下的响应机制,揭示Rhodococcus sp.AN-P1适应、降解苯胺内在分子机理,弥补苯胺降解菌在苯胺胁迫下耐受机制的空白,为进一步调控提高微生物降解苯胺能力提供良好的靶点,为其生物修复研究奠定理论基础。... 【目的】研究微生物在苯胺胁迫环境下的响应机制,揭示Rhodococcus sp.AN-P1适应、降解苯胺内在分子机理,弥补苯胺降解菌在苯胺胁迫下耐受机制的空白,为进一步调控提高微生物降解苯胺能力提供良好的靶点,为其生物修复研究奠定理论基础。【方法】采用双向电泳技术分离纯化Rhodococcus sp.AN-P1在苯胺、柠檬酸条件下表达的蛋白质组,并利用基质辅助激光解析电离串联飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定显著差异表达蛋白,对比NCBInr蛋白数据库获得蛋白质点的详细信息。【结果】在以苯胺、柠檬酸为唯一碳源的条件下,Rhodococcus sp.AN-P1分别表达了681、579个蛋白质点;选取21个显著差异蛋白质点进行质谱分析,成功获得17个蛋白质点的相关信息,其分布于信号转导调节、氨基酸及能量代谢、细胞防御、苯胺降解酶多个代谢系统,并发现大部分蛋白质分子质量在31000~58000之间,等电点位于4~7之间。【结论】Rhodococcus sp.AN-P1在苯胺胁迫环境中会通过响应信号传导系统感知外界胁迫、调节氨基酸及能量代谢系统抵抗苯胺的毒害影响、利用细胞防御系统进一步提高其存活能力、表达苯胺降解酶系统降解苯胺获得碳源、氮源及能量来源,从而达到适应并降解高浓度苯胺的目的。 展开更多
关键词 蛋白组学 苯胺 胁迫响应 rhodococcus sp.AN-P1
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多氯联苯降解菌Rhodococcus sp.RHA1的功能基因 被引量:1
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作者 王维 沈波 《杭州师范大学学报(自然科学版)》 CAS 2008年第5期372-375,共4页
概述了多氯联苯(Polychlorinated biphenyls,PCBs)降解菌-Rhodococcussp.RHA1的功能基因研究,包括bphACB基因、etbAC基因、ebdA基因和bphDEF基因的结构和在降解途径中的作用和表达.
关键词 rhodococcus sp.RHA1 bphACB基因 etbAC基因 ebdA基因 bphDEF基因
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n-Hexadecane and pyrene biodegradation and metabolization by Rhodococcus sp. T1 isolated from oil contaminated soil 被引量:5
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作者 Xiaoqiang Jia Yun He +2 位作者 Lei Huang Dawei Jiang Wenyu Lu 《Chinese Journal of Chemical Engineering》 SCIE EI CAS CSCD 2019年第2期411-417,共7页
The high-molecular weight polycyclic aromatic hydrocarbons(PAHs) pyrene and typical long chain alkane nhexadecane are both difficult to degrade. In this study, n-hexadecane and pyrene degrading strain Rhodococcus sp. ... The high-molecular weight polycyclic aromatic hydrocarbons(PAHs) pyrene and typical long chain alkane nhexadecane are both difficult to degrade. In this study, n-hexadecane and pyrene degrading strain Rhodococcus sp. T1 was isolated from oil contaminated soil. Strain T1 could remove 90.81% n-hexadecane(2 vol%) and 42.79% pyrene(200 mg·L^(-1)) as a single carbon within 5 days, respectively. Comparatively, the degradation of pyrene increased to 60.63%, but the degradation of n-hexadecane decreased to 87.55% when these compounds were mixed. Additionally, identification and analysis of degradation metabolites of Rhodococcus sp. T1 in the above experiments showed that there were significant changes in alanine, methylamine, citric acid and heptadecanoic acid between sole and dual substrate degradation. The optimal conditions for degradation were then determined based on analysis of the pH, salinity, additional nutrient sources and liquid surface activity.Under the optimal conditions of pH 7.0, 35 °C, 0.5% NaCl, 5 mg·L^(-1) of yeast extract and 90 mg·L^(-1) of surfactant,the degradation increased in single or dual carbon sources. To our knowledge, this is the first study to discuss metabolite changes in Rhodococcus sp. T1 using sole substrate and dual substrate to enhance the long-chain alkanes and PAHs degradation potential. 展开更多
关键词 BIODEGRADATION METABOLITE N-HEXADECANE PYRENE rhodococcus sp. T1
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Inducing Expression and Reaction Characteristic of Nitrile Hydratase from Rhodococcus sp. SHZ-1 被引量:1
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作者 王超 张根林 +1 位作者 徐小琳 李春 《Chinese Journal of Chemical Engineering》 SCIE EI CAS CSCD 2007年第4期573-578,共6页
Inducing expression and the reaction characteristic of nitrile hydratase (NHase) from Rhodococcus sp. SHZ-1 were investigated. The results showed that the expression of NHase was greatly enhanced with the cooperatio... Inducing expression and the reaction characteristic of nitrile hydratase (NHase) from Rhodococcus sp. SHZ-1 were investigated. The results showed that the expression of NHase was greatly enhanced with the cooperation of acrylonitrile and ammonium chloride as inducer in the medium and the specific activity of NHase was increased of 44%. Then the temperature, pH, concentration of acrylonitrile and acrylamide were evaluated, which affected the activity and reaction characteristic of NHase. It was found that the temperature and concentration of acrylarnide were the most important factors for the catalyzation of NHase. The optimal catalysis temperature of NHase from Rhodococcus sp. SHZ-1 was 30℃, and the activation energy of the hydration of NHase was 90.2kJ·mol^-1 in the temperature range from 5℃ to 30℃. Kmof NHase was 0.095mol·L^-1 using acrylonitrile(AN) as substrate, and NHase activity was inhibited seriously when acrylonitrile concentration was up to 40g·L^-1, the substrate inhibition constant Ki is 0.283mol·L^-1. Moreover, the NHase from Rhodococcus sp. SHZ-1 had very strong tolerance to acrylamide, in which the final concentration of acrylamide reached to 642g·L^-1 and the residual activity of NHase still maintained 8.6% of the initial enzyme activity. 展开更多
关键词 nitrile hydratase BIOCATALYSIS ACRYLAMIDE CHARACTERISTIC rhodococcus sp. SHZ- 1
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好氧同时硝化-反硝化菌的分离鉴定及系统发育分析 被引量:16
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作者 张光亚 方柏山 +1 位作者 闵航 陈美慈 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期226-228,共3页
从土壤中分离到一株好氧同时硝化-反硝化菌,编号为SDN,该菌株革兰氏染色呈阳性,球状或杆状,菌落颜色橙红色.该菌株以硝酸钠为氮源时能进行好氧反硝化作用;以乙酸钠和硫酸铵分别为碳源和氮源能进行异养硝化作用,能以乙酰胺为唯一碳源和... 从土壤中分离到一株好氧同时硝化-反硝化菌,编号为SDN,该菌株革兰氏染色呈阳性,球状或杆状,菌落颜色橙红色.该菌株以硝酸钠为氮源时能进行好氧反硝化作用;以乙酸钠和硫酸铵分别为碳源和氮源能进行异养硝化作用,能以乙酰胺为唯一碳源和氮源进行生长.部分长度的16SrDNA序列分析表明,分离菌株SDN与Rhodococcusruber的16SrDNA序列具有99%相似性.并用PHYLIPS程序将该菌株与报道的相关微生物进行了系统发育分析. 展开更多
关键词 好氧同时硝化-反硝化 rhodococcus sp.SDN 1 6S RDNA序列 系统发育分析
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利用休止细胞法选择性脱除燃料油中有机硫 被引量:6
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作者 佟明友 马挺 +2 位作者 张全 梁凤来 刘如林 《环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第1期24-27,共4页
红球菌 (Rhodococcussp .)FS 1菌株能通过专一性断裂C—S键的途径脱除二苯并噻吩 (DBT)中的有机硫作为自身生长需要的硫源 ,从而降低油品中的硫含量 .本文利用该菌的休止细胞对DBT和柴油的脱硫活力进行了研究 .结果表明 ,该菌株对DBT及... 红球菌 (Rhodococcussp .)FS 1菌株能通过专一性断裂C—S键的途径脱除二苯并噻吩 (DBT)中的有机硫作为自身生长需要的硫源 ,从而降低油品中的硫含量 .本文利用该菌的休止细胞对DBT和柴油的脱硫活力进行了研究 .结果表明 ,该菌株对DBT及柴油中的有机硫均有良好的选择性脱除作用 .DBT浓度为 0 5~ 1 0mmol/L、油水比例为 1:5时 ,脱硫效果最佳 .采用二次脱硫法可使柴油脱硫率达 85 %以上 ,证明FS 1能有效脱除柴油中的有机硫 .烃质组分的气相色谱分析表明 ,FS 1作用前后的柴油烃类组分基本没有改变 ,说明该菌的脱硫作用是特异性针对硫原子的 ,不会破坏柴油的有效成分 . 展开更多
关键词 红球菌fs-1 休止细胞 生物脱硫 二苯并噻吩
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苄嘧磺隆和丁草胺降解菌原生质体融合条件优化 被引量:1
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作者 李春艳 吴志洋 +2 位作者 冯丽萍 熊明华 成小松 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期79-84,共6页
研究以苄嘧磺隆降解菌Rhodococcus sp.BX2与丁草胺降解菌Acinetobacter sp.LYC-1为亲本,优化用于构建可同时降解苄嘧磺隆与丁草胺的融合子的原生质体融合条件。通过单因素试验和正交试验,确定原生质体融合的最佳条件:PEG4000 40%、35℃... 研究以苄嘧磺隆降解菌Rhodococcus sp.BX2与丁草胺降解菌Acinetobacter sp.LYC-1为亲本,优化用于构建可同时降解苄嘧磺隆与丁草胺的融合子的原生质体融合条件。通过单因素试验和正交试验,确定原生质体融合的最佳条件:PEG4000 40%、35℃、10 min,500μL新生磷酸钙溶液,pH 7.5,此条件下融合频率达到2.67×10-7。以青霉素和磷霉素作为筛选的遗传标记,最终获得在含有上述两种除草剂的无机盐培养基中可稳定继代培养8代以上的融合子F1。该融合子在含有100 mg·mL-1苄嘧磺隆和100 mg·mL-1丁草胺的无机盐培养基中,F1的降解率分别为65.35%和62.41%。 展开更多
关键词 苄嘧磺隆 丁草胺 rhodococcus sp BX2 ACINETOBACTER sp LYC-1 原生质体融合 条件优化
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氟铃脲降解菌FLN-1的分离鉴定及降解特性 被引量:4
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作者 张隽 黄星 +2 位作者 邱吉国 李顺鹏 何健 《环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期1178-1183,共6页
从农药厂废水处理池的活性污泥中分离到1株能降解氟铃脲的菌株,命名为FLN-1.根据表型特征、生理生化特性及16S rDNA序列同源性分析,将FLN-1初步归类为红球菌属(Rhodococcus sp.).研究结果表明,该菌能在含氟铃脲(50mg.L-1)的基础盐液体... 从农药厂废水处理池的活性污泥中分离到1株能降解氟铃脲的菌株,命名为FLN-1.根据表型特征、生理生化特性及16S rDNA序列同源性分析,将FLN-1初步归类为红球菌属(Rhodococcus sp.).研究结果表明,该菌能在含氟铃脲(50mg.L-1)的基础盐液体培养基中降解氟铃脲,5d降解率达85%,降解最适pH为6.0~9.0,最适温度为25~40℃,降解速率随初始接种量的增加而增大;100mg.L-1的葡萄糖、酵母膏和蛋白胨对菌株降解氟铃脲具有促进作用.酶的定域试验表明,降解氟铃脲的酶为胞内酶. 展开更多
关键词 氟铃脲 生物降解 红球菌FLN-1 酶的定域
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一株高效不对称还原产生(R)-苯基乙二醇的菌株筛选、鉴定及全细胞催化体系 被引量:2
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作者 裴朝红 张红蕾 +2 位作者 张超 徐志栋 李玮 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期352-356,共5页
R)-苯基乙二醇是合成许多光学活性药物的重要手性中间体,其制备具有重要的现实意义. 以α-羟基苯乙酮为底物,从土壤中筛选得到一株能够立体选择性催化α-羟基苯乙酮产生(R)-苯基乙二醇的细菌菌株HBU-SI7. 经形态学观察和16S rDNA... R)-苯基乙二醇是合成许多光学活性药物的重要手性中间体,其制备具有重要的现实意义. 以α-羟基苯乙酮为底物,从土壤中筛选得到一株能够立体选择性催化α-羟基苯乙酮产生(R)-苯基乙二醇的细菌菌株HBU-SI7. 经形态学观察和16S rDNA序列分析,鉴定此转化菌株为红球菌属菌株Rhodococcus sp. 菌株全细胞催化体系研究表明在邻苯二甲酸二丁酯-磷酸盐缓冲液(V:V = 1:3)的两相催化体系下,菌体转化α-羟基苯乙酮的最优浓度为3.0 g/L,转化率高达96.2%,e.e值为99.3%. 本研究建立的红球菌全细胞催化还原体系对(R)-苯基乙二醇的高效制备具有潜在的研究和应用价值. (图6 表2 参20) 展开更多
关键词 红球菌 全细胞催化 不对称还原 α-羟基苯乙酮 (R)-苯基乙二醇
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