满山红配方颗粒提取工艺优化及质量标准研究

对满山红配方颗粒的提取工艺进行优化,并建立了相应的质量标准,为其临床应用奠定基础。采用单因素试验结合Box-Behnken响应面法进行研究,以出膏率和杜鹃素含量为评价指标,对提取次数、提取时间和加水倍数进行考察,利用高效液相色谱法(HPLC)对杜鹃素含量进行定量测定,得出各因素对出膏率和杜鹃素含量的影响程度,并依据《中华人民共和国药典》2020年版,采用薄层鉴别法对满山红进行定性分析。通过Box-Behnken中心组和设计模型分析回归模型方差以及响应面图,确认满山红的最佳提取条件为:提取4次,提取时间2 h,加水18倍。薄层鉴别法显示,满山红斑点清晰,重现性佳,高效液相色谱法也显示出高度的准确性和重复性。优化后的满山红配方颗粒提取工艺操作简便、稳定可行,为满山红的深度开发和利用提供了科学依据。

幼龄大鼠给予芩暴红止咳口服液的非临床安全评价

目的:从多指标观察幼龄大鼠连续灌胃给予芩暴红止咳口服液13周可能引起的毒性反应和毒性靶器官,为临床应用提供参考。方法:120只雌、雄大鼠1:1同笼交配,记录仔鼠出生日期,至仔鼠出生20 d,取同日出生的仔鼠,按体质量随机分为对照组和芩暴红止咳口服液12.3、24.6、49.2 g·kg-1(以生药量计)组,每组40只,雌雄各半。仔鼠出生21 d开始,给予相应剂量的芩暴红止咳口服液,对照组给予超纯水,给药体积为10 mL·kg-1,每天给药2次,连续给药13周。观察动物的一般症状,进行体质量、摄食量、身体发育指标和生殖器官发育检查。分别于给药4周、13周和恢复期处死大鼠,检测相关指标,包括神经行为学、骨密度、免疫、眼科、尿常规、血液学指标、血液生化学指标、脏器系数和组织病理学。结果:与对照组比较,芩暴红止咳口服液低、中、高剂量组大鼠感觉功能、运动协调能力、学习记忆能力、骨密度、免疫功能、生殖器官发育及功能、眼科、尿常规、血液学指标、血液生化学指标、脏器系数和组织病理学均未见明显异常。结论:以多时间点、多指标体系可对中药复方制剂芩暴红止咳口服液进行较为全面的非临床安全评价,高剂量暴露量可达幼儿临床剂量的31.5倍;重复给药13周,未见明显毒性反应。

超临界二氧化碳萃取满山红中黄酮类物质的工艺研究

目的确定超临界CO2萃取满山红中黄酮类物质的最佳工艺条件。方法通过正交实验考察最佳萃取工艺条件,并测定萃取物中总黄酮含量。结果最佳工艺条件是:原料粒度65目,萃取压力28 MPa,萃取温度为45℃,夹带剂用量1.5 m l/g。结论采用超临界二氧化碳萃取满山红中黄酮类物质是可行的。

满山红滴丸平喘抗炎作用的研究

目的研究满山红滴丸的平喘及抗炎作用。方法通过对豚鼠的平喘作用实验、豚鼠离体气管平滑肌试验考察满山红滴丸的平喘作用;采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀、大鼠棉球肉芽肿试验考察抗炎作用。结果满山红滴丸分别以28、56、112mg/kg豚鼠灌胃,能够缩短豚鼠喘息潜伏期;0.12、0.24、0.48mg/ml的浓度均能显著对抗1.67×10-5g/ml磷酸组胺引起的豚鼠气管平滑肌收缩;分别以70、140、280mg/kg小鼠灌胃,能较明显地抑制二甲苯所致的小鼠耳肿胀;35、70、140mg/kg大鼠灌胃,中剂量和高剂量能够显著抑制大鼠棉球肉芽肿。结论满山红滴丸有较明显的平喘和抗炎作用。

大孔吸附树脂纯化满山红总黄酮工艺研究

目的:从11种树脂中优选纯化满山红总黄酮的最佳型号,确定工艺条件及参数。方法:以饱和吸附量为指标,考察11种不同型号树脂的吸附能力;采用正交试验设计,以固形物中总黄酮含量为考察指标,对影响总黄酮提取工艺的因素进行研究。结果:11种树脂中,WLD型树脂对满山红总黄酮具有较好的吸附能力;树脂柱的径高比及样品溶液流速对纯化效果有显著影响。结论:经大孔吸附树脂纯化后,满山红中总黄酮含量达35%,表明本法可用于纯化满山红总黄酮。

超临界CO_2萃取的满山红挥发油成分分析

目的:对超临界CO2萃取法和水蒸气蒸馏法提取的满山红挥发油化学成分进行比较研究。方法:采用GC-MS法对两种方法提取的满山红挥发油进行成分分析。结果:超临界CO2萃取法提取的挥发油鉴定出52个成分,水蒸气蒸馏法提取的挥发油鉴定出48个成分,两者共有成分45个。结论:两种方法提取的挥发油成分接近。

HPLC法测定满山红中牻牛儿酮的含量

目的建立满山红中牻牛儿酮含量测定方法,并测定不同来源的满山红样品。方法采用高效液相色谱法,ZORBAXRX-C18柱(150mm×4.6mm,5mm)色谱柱,流动相为65%乙腈水溶液,流速1.0mL/min,检测波长210mm。结果牻牛儿酮的线性范围为0.03024～3.024μG(R=1.000),回收率为98.6%～101.5%,RSD为1.3%～0.6%,不同采集地的满山红中牻牛儿酮的含量在0.0107～7.2862mg/g之间,不同月份的牻牛儿酮含量最多相差1.5倍。结论所建立的方法准确、重复性好,可用于满山红中牻牛儿酮的含量测定。不同采集地的满山红中牻牛儿酮含量差异极大。不同月份的牻牛儿酮的含量差异相对校小。

HPLC法测定满山红滴丸中金丝桃苷的含量

目的建立HPLC测定满山红滴丸中金丝桃苷含量的方法。方法 HPLC测定满山红滴丸中金丝桃苷含量。选择乙腈-磷酸-水系统,采用梯度洗脱的办法;检测波长为355 nm;色谱柱:Diamonsil(钻石)C18(150 mm×46 mm,5μm);柱温为25℃;流速为1.0 ml/min。结果制剂中其他成分不干扰测定,杂质峰和主峰达到有效分离。金丝桃苷在9.60-192μg/ml范围内与其峰面积呈良好的线性关系,Y=2 266 319.24X-19 602.96(r=0.999 9),各项指标达到方法学要求。结论HPLC适用于测定满山红滴丸中金丝桃苷的含量,结果准确。

芩暴红止咳口服液的质量标准研究

目的：完善和提高芩暴红止咳口服液的质量标准。方法：分别采用薄层色谱法和液相色谱法对满山红与暴马子皮进行定性研究；采用高效液相色谱法测定杜鹃素含量。结果：鉴别专属性强，含量测定杜鹃素在0．0123～0．3075μg范围内，线性关系良好，平均回收率98．13％（RSD1．04％）。结论：本方法快速简便、重现性好，可用于芩暴红止咳口服液的质量控制。

超临界CO_2萃取满山红挥发油

目的:确定超临界CO2萃取满山红挥发油的最佳实验条件。方法:采用正交实验确定超临界CO2萃取满山红挥发油的最佳实验条件。结果:超临界CO2萃取满山红挥发油的最佳实验条件为:萃取压力25M Pa,萃取温度45℃,萃取时间2.5h,萃取率3.82%,水蒸汽蒸馏提取得率0.24%。结论:超临界CO2萃取法优于传统的水蒸气蒸馏法。

满山红及其制剂中满山红油的含量测定

目的:测定满山红及其制剂中有效成分满山红油的含量,以探索满山红及其制剂的质量标准。方法:用HPLC法测定不同产地的满山红及消咳喘胶囊中满山红油的含量。结果:不同产地的满山红中挥发油含量差别较大,满山红油是消咳喘胶囊中的主要活性成分之一。结论:此方法稳定可靠,重现性好,适用于满山红及其制剂中挥发油的测定提取,为满山红及其制剂的质量评价提供了一定的科学依据。

满山红油自乳化释药微乳的制备研究

目的:筛选满山红油自乳化释药微乳的处方并进行制备方法研究。方法:通过原料药溶解度实验、正交试验设计和组方各成分伪三元相图绘制,以外观色泽和自乳化时间为指标,对满山红油处方中的油相、乳化剂、助乳化剂用量的配比进行筛选,确定最佳处方及制备工艺。结果:满山红油自乳化微乳的处方中油相为油酸,表面活性剂为吐温-80,助表面活性剂为正丁醇,最佳比例为:吐温-80(70%)、正丁醇(20%)、油酸(10%)。结论:按比例配制的满山红油释药微乳,在室温下放置数天,无沉淀,均一、稳定,该处方可用于满山红油自乳化微乳的制备。

黑龙江省不同产地满山红遗传多样性的RAPD分析

目的:分析不同产地满山红遗传背景与遗传关系,建立中药满山红的RAPD分析方法。方法:CTAB法提取不同产地满山红的基因组DNA;琼脂糖凝胶电泳法检测PCR扩增产物,SPSS17.0软件进行聚类分析,NTSYS2.10e软件进行遗传距离计算。结论:从100条随机引物中筛选出10个随机引物,其扩增产物谱带多,特征好,共扩增出806条条带,多态性条带数710条,多态性比例为88.1%。结论:不同产地间的满山红存在丰富的遗传多样性,RAPD分析技术可用于鉴定满山红。

超临界CO_2萃取的满山红浸膏成分分析及脱蜡方法研究

目的:确定超临界CO2萃取的满山红浸膏的化学成分,研究合适的浸膏后处理溶剂及脱蜡方法。方法:采用试管法对超临界CO2萃取的满山红浸膏进行成分分析与脱蜡研究。结果:满山红浸膏中除挥发油外,还含有香豆素,酚性物质,树脂,油脂等成分。无水乙醇和丙酮是理想的浸膏后处理和脱蜡溶剂。结论:该浸膏含较多的脂溶性成分,采用无水乙醇和丙酮作为浸膏的脱蜡溶剂是可行的。

正交试验超声提取满山红中黄酮类物质的工艺研究

[目的]优选满山红中黄酮提取的最佳工艺。[方法]采用正交试验法对满山红中黄酮的提取工艺进行优选,以原料粒度、料液比、提取功率、提取温度等为考察因素,采用液相方法测定4个黄酮类活性成分(金丝桃苷、槲皮素、山奈酚和杜鹃素)的总含量。[结果]最佳工艺为粒度为65目的原料在50℃的80%乙醇(料液比1∶25)中浸渍2 h,超声功率80 W提取30 min。[结论]该工艺合理,有效成分提取效率高。

满山红中挥发油散失动力学研究

根据化学动力学原理,采用恒温加速试验方法,对满山红在贮藏过程中挥发油散失动力学进行了实验研究,实验数据经统计学处理。结果表明,其散失规律符合一级反应,预测得到,在室温(25℃)下,满山红中挥发油半衰期为76天。

杜鹃素对映体的分离及其在中药材中的含量测定

目的 建立杜鹃素对映体分离的HPLC方法,并应用于满山红和照山白药材中的对映体含量测定。方法 用HPLC对杜鹃素对映体进行拆分,优化手性柱种类、流动相比例、流速和柱温的色谱条件。对手性热力学拆分进行探讨,计算杜鹃素对映体在色谱柱分离的焓变、熵变、焓变差值和熵变差值等热力学参数。并在最佳分离条件测定了满山红和照山白2种药材中2个对映体的含量。结果 确定了杜鹃素的2个对映体的最佳分离条件:色谱柱为Chiralcel OJ-RH(4.6 mm×150 mm,5μm),乙腈-水(40∶60)为流动相等度洗脱,流速为0.5 mL·min^(–1),柱温为25℃,检测波长为295 nm。在最佳分离条件下,杜鹃素对映体的分离度达到1.5,表明杜鹃素的2个对映体能够完全分离。当柱温为20~35℃时,分离因子随着温度的升高呈降低趋势,2个对映体的lnα与1/T呈良好的线性关系,手性拆分过程受焓的控制。将所建立的杜鹃素对映体分离方法应用于中药材满山红、照山白中的杜鹃素对映体含量测定,杜鹃素的2个对映体线性范围分别为0.718~57.44μg·mL^(–1)和1.28~102.24μg·mL^(–1),在3个批次的满山红中杜鹃素的2个对映体的平均含量分别为0.228 2和0.466 2 mg·g^(–1);3个批次的照山白中杜鹃素的2个对映体的平均含量分别为0.416 8和0.707 3 mg·g^(–1)。结论 该方法简便高效,适用于中药中杜鹃素对映体的含量测定。

中药满山红中4个黄酮类化合物结构及其抗氧化活性的理论研究

运用密度泛函理论DFT方法在B3LYP/6-311++G(d,p)水平下研究了中药满山红中4个活性天然产物成分杜鹃素、槲皮素、山柰酚、杨梅素的电子结构、键离解能(BDE)以及分子最高能量占有轨道与最低能量空轨道,通过数据分析,初步判断出这4个活性化合物的抗氧化活性的大小顺序为杜鹃素<山柰酚<槲皮素<杨梅素。

满山红总黄酮固体分散体的制备工艺考察

目的:优选满山红总黄酮固体分散体的制备工艺。方法:分别以聚乙二醇6000(PEG6000),聚乙烯吡咯烷酮K30(PVPK30),泊洛沙姆188(Pluronic F68)为载体,采用适合载体的熔融-溶剂法和溶剂法制备满山红总黄酮-载体不同比例(1∶1,1∶2,1∶4,1∶6)的固体分散体。以满山红总黄酮为检测指标,通过UV测定体外溶出度,计算各固体分散体的T d值。结果:最佳制备工艺为以4倍量PVPK30为载体,加20倍量无水乙醇溶解,于50℃旋蒸除去无水乙醇,满山红总黄酮的体外溶出率达100%。PEG6000为载体时,不同比例的固体分散体T d分别为6.329,5.225,0.096,4.755 min;Pluronic F68为载体时,各固体分散体T d分别为4.045,3.561,0.018,0.026 min;PVPK30为载体时,各固体分散体T d分别为5.000,5.000,0.005,0.056 min。结论:溶剂法可用于制备满山红总黄酮固体分散体,具有很好的增溶效果,但不适合工业生产。

满山红滴丸制备工艺研究

目的：研究影响满山红滴丸制备的各种因素，确定最佳工艺。方法：通过对滴丸的丸质量差异、外观、硬度及崩解时限综合评分，采用正交试验考察基质间比例、基质与药的比例、化药温度和滴头高度等条件。结果：满山红滴丸制备的最佳条件是PEG4000：PEG6000：药物（2：1：1）在90℃化药，在距冷凝剂液面5cm处以每分钟30滴速度滴制，滴头口径4～5mm，冷凝剂温度10℃。结论：在最佳条件下制备的滴丸，成型好、均匀，硬度和崩解符合要求，工艺稳定。