HPLC法测定照山白中黄酮类成份的含量

目的:建立测定照山白中黄酮类化合物含量的高效液相色谱(HPLC)方法。方法:85℃下用无水乙醇采用索氏提取装置制备粗黄酮,经过旋转蒸发仪浓缩成浸膏,用高效液相色谱法进行含量测定。采用WatersXTerraMS C_(19)色谱柱(1.5 mm×100 mm,3.5μm);流动相:甲醇-0.2%磷酸水溶液;检测波长:340～380nm;流速:0.2 mL·min^(-1);柱温:室温;自动进样。结果:照山白中黄酮类化合物芦丁,槲皮素,山奈酚在0.0203～162.5μg·mL^(-1)范围内进样量与峰面积呈良好线性关系,其线性回归方程分别为y=2318.3x-240898,r=0.9999;y=5038.1x+143452,r=0.9999;y=2953.1x+414874,r=0.9999。方法学考察表明,黄酮类的最低检测限为0.083μg·mL^(-1),加样回收率为96.60%,98.7%,97.5%,RSD为1.09%,1.20%,1.16%(n=3)。

泰山照山白提取物对过氧化损伤的PC12细胞的保护作用

目的研究泰山照山白提取物(RME)对氧化损伤的神经细胞株(PC12)炎症反应的影响及与凋亡的关系,探讨药物抗炎以及抗凋亡效应的可能机制。方法体外培养PC12,RME三个浓度预处理,加入H2O2诱导氧化损伤,MTT比色法检测细胞存活率,ELISA测定培养液中白介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量、免疫荧光显微镜检测细胞凋亡率及凋亡的细胞形态变化。结果与正常对照组相比,经H2O2损伤后,细胞存活率降低(P<0.05、P<0.01)、而IL-1β和TNF-α的释放量增加(P<0.05、P<0.01)、凋亡细胞数目增多并呈现典型的凋亡形态学改变。而RME各剂量组预处理能提高细胞存活率(P<0.05、P<0.01)、降低细胞上清液IL-1β和TNF-α含量(P<0.05、P<0.01)、降低细胞凋亡率、改善细胞的凋亡形态。结论 RME可抑制H2O2诱导的神经细胞株氧化应激性炎性损伤和凋亡,提高细胞存活率,其作用机制可能是通过抑制凋亡转导途径而实现的。