甘孜州燕子沟4种高山杜鹃根系真菌群落组成与多样性分析

为促进四川甘孜州燕子沟高山杜鹃的引种驯化与移栽,并探索不同生境条件下根系微生物多样性,采集了羊踯躅、棕背杜鹃、光亮杜鹃、腺房杜鹃4种高山杜鹃的根系,通过高通量测序和生物信息学分析,评估该地区高山杜鹃类型根系真菌的组成和多样性。结果显示:4种高山杜鹃根系样品中共获得有效序列746,973条,进而聚合得到1,101个操作分类单元(OTUs);这些真菌分属于6门、27纲、30目、30科、30属,其中子囊菌门和担子菌门为主要类群,它们在群落丰度上表现出较大的差异;在属级水平上,主要优势菌属差异显著,特别是光亮杜鹃根系真菌群落不仅拥有最多的特异性OTUs,且群落丰度最高;棕背杜鹃的根系真菌群落拥有最少的特异性OTUs,而羊踯躅的根系真菌群落丰度最低。整体而言,该试验区域内4种高山杜鹃的根系真菌多样性,与同一地区低海拔地带相比,显著偏低,这符合高海拔地区真菌多样性减少的普遍趋势。

高山杜鹃“红粉佳人”和“红珍珠”的抹芽花期调控管理技术

选用有特色花且市场潜力大的“红粉佳人”和“红珍珠”两种高山杜鹃为研究对象,探索了抹芽处理对其花期的影响。结果表明:抹芽处理与对照组花期有明显差异,可提前56 d左右,有效延长盛花期5 d左右,延长花期总历时30 d,提高成花率至71%~93%。有效地提前了花期、延长了花期和提高成花率,提升高山杜鹃“红粉佳人”和“红珍珠”的开花质量,增加观赏价值。为“红粉佳人”和“红珍珠”两种高山杜鹃提供了一种契合春节开花的花期管理技术。

壳聚糖浸种对高山杜鹃种子萌发及生长的影响研究

以秦岭高山杜鹃为研究对象,以不同浓度CTS(0.05%、0.10%、0.15%、0.20%、0.25%、0.30%)作为引发剂对高山杜鹃浸种处理后种子萌发指标、幼苗生化指标的影响进行了分析,为CTS应用到杜鹃种子的萌发、克服高山杜鹃种子萌发率低、种间差异大以及引种驯化等问题提供了解决途径,并为其扩大培育提供理论参考。结果表明:在0.15%CTS浸种条件下,高山杜鹃的发芽势、发芽率、发芽指数均达到峰值,处理效果最佳,与CK相比分别提高了25个百分点、30个百分点和46%;高山杜鹃幼苗的保护酶SOD、POD、CAT活性与CK相比分别提高了89%、164%、64%;叶绿素含量提高了64%;可溶性蛋白含量提高了92%,且经单因素方差分析显示,以上各生化指标受外源CTS处理的影响显著。综上所述,0.15%CTS溶液作为引发剂能够显著提高种子的代谢水平,加速细胞内物质的转化,提高种子的萌发率;高山杜鹃幼苗喷洒0.15%CTS溶液后,其抗氧化物酶活性、叶绿素含量均呈现明显的上升趋势,植物的抗逆性也得到提高,缓解了因膜脂过氧化程度过高对植物机体造成的氧化损伤,促进了光合产物的积累。

Ca^(2+)处理对秦岭高山杜鹃耐热性的影响

分别以清水、5、10、20 mmol·L^(-1)的CaCl_2溶液喷洒高山杜鹃幼苗叶片10 d后,将其幼苗置于人工气候箱进行96 h 40℃昼/夜32℃的温度处理,每隔24 h进行一次热害指数的测定,前48h内每隔24 h测定幼叶相关的生理指标。结果表明:Ca^(2+)处理20 mmol·L^(-1)能有效抑制高温胁迫引起的秦岭高山杜鹃幼苗叶片内丙二醛含量的快速积累,促进叶片内游离脯氨酸含量的积累,延缓叶绿素含量的降低,并使热害指数降低约75%,Ca^(2+)处理能一定程度提高高山杜鹃的耐热性。

高山杜鹃茎段组织培养和优化体系的建立

以高山杜鹃茎段为外植体,研究不同品种、不同激素组合对5个高山杜鹃品种无菌芽发生的影响,并以品种Jeande Marle Montague为试验材料,研究不同激素组合对试管苗生根和增殖的影响。结果表明:茎段外植体均能诱导萌发,最佳诱导培养基为WPM+TDZ(0.5 mg.L-1),诱导率为90.4%;试管苗继代增殖培养基为WPM+TDZ(0.5 mg.L-1)+NAA(1.0 mg.L-1),增殖系数达7.96;试管苗生根培养基为1/2 WPM+NAA(0.25 mg.L-1)+IBA(0.25 mg.L-1),生根率为98.6%。试管苗移栽到泥炭、珍珠岩(体积比为4¨1)基质中,成活率达98%以上。

3种高山杜鹃不同季节茎段内源激素的变化

为弄清适合高山杜鹃扦插生根的最佳季节,建立高效扦插繁殖体系,采用酶联免疫吸附测定法,研究3种高山杜鹃不同季节扦插前茎段内源激素的含量变化。结果表明:在3种高山杜鹃扦插前的茎段中,大白杜鹃的IAA和GA含量在1月和11月最高,分别达107.51ng/g FW和5.31ng/g FW;ABA含量11月最低,为107.92ng/g FW。长蕊杜鹃的IAA和GA含量均在9月最高,分别达65.4ng/g FW和4.52ng/g FW;ABA含量5月最低,为86.86ng/g FW。糙叶杜鹃的IAA和GA含量同样均是3月最高,分别达121.64ng/g FW和7.76ng/g FW;ABA含量3月最低,为77.33ng/g FW。大白杜鹃适宜扦插时期为11月,长蕊杜鹃为9月,而糙叶杜鹃为3月。

18个高山杜鹃品种在滇中地区的生长适应性

【目的】为筛选出适合于滇中地区种植的高山杜鹃品种。【方法】对引进种植5年的18个高山杜鹃品种植株高度、冠幅、分枝数、当年生枝叶簇宽度、当年生枝长度和粗度、当年生枝叶片数量及开花情况进行观测。【结果】18个引进品种的株高、冠幅和分枝长势均较好,长势最好的品种是English Roseum,株高达110 cm,冠幅达123.3 cm,分枝达86个,并且其增长量显著高于其他品种;植株当年枝长度和粗度、当年生枝叶片数、当年生枝叶簇宽度的生长表现大多数都较好,只有Blue Peter、Jun Ifeuer、Brigitte和Blue Peter等少数品种增长较为缓慢;在开花的11个品种中, Halfdanlem、Blue Peter、English Roseum等品种的开花性状表现较好。【结论】高山杜鹃适合在滇中地区栽植,其中栽植效果较好的品种是English Roseum、Halfdanlem和Jun Ifeuer。

高山杜鹃组培快繁技术研究

[目的]为高山杜鹃的快速繁殖提供技术指导。[方法]以高山杜鹃的侧芽为外植体,先将其在1/2MS培养基中预培养30 d,再对其进行芽增殖、芽伸长和生根培养,研究不同激素组合对其芽增殖、芽伸长和生根率的影响。[结果]当分裂素为6-BA时,每芽增殖数较少(最多为2.1个),当分裂素为KT时,芽增殖数随KT浓度的增加而增加,当KT为0.5 mg/L时,每芽增殖数最多(4.8个),且芽质量较好;培养基中KT/IAA为1/4时,芽最长(平均为5.1 cm),且芽较健壮;当培养基中加入IAA时,每株平均生根数较少(最多为1.2条),当加入NAA时,生根率随NAA浓度的增加而增加,当NAA为2.0 mg/L时,每株平均生根数最多(6.2条)。[结论]高山杜鹃组培苗增殖、芽伸长和生根的最佳培养基分别为MS+KT 0.5 mg/L+IAA 0.5 mg/L、MS+KT 0.25 mg/L+IAA 1.0 mg/L和1/2 MS+NAA2.0 mg/L。

油菜素内酯对秦岭高山杜鹃耐热性的影响

以野生高山杜鹃幼苗为试材,研究不同质量浓度[0(对照)、0.05、0.10、0.50、1.00、1.50 mg/L]油菜素内酯(BR)对高山杜鹃热害指数及生理生化指标的影响。结果表明:在高温胁迫下,随着BR质量浓度的增加,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性及脯氨酸、可溶性蛋白含量均呈现先升后降的趋势,且BR质量浓度在0.5 mg/L时脯氨酸含量、可溶性蛋白含量最高分别为32.8μg/g、2.5 mg/g,SOD、POD、CAT活性最高分别为89.6、84.5、25.5 U/g;MDA含量呈现先降后升的趋势,且BR质量浓度在0.5 mg/L时效果最为明显,MDA含量在高温胁迫72 h比对照组降低40.49%;不同质量浓度BR均能降低热害指数,缓解高温对高山杜鹃幼苗的伤害。BR质量浓度为0.50 mg/L时对高温胁迫下高山杜鹃各项生理生化特征有较好的缓解作用,可减轻高温对杜鹃的热伤害,提高其耐热性。

茉莉酸甲酯对秦岭高山杜鹃耐热性的影响

为提高高山杜鹃的耐热性,给高山杜鹃的引种栽培提供依据,通过对秦岭高山杜鹃外施植物生长调节剂,测定高温胁迫下不同浓度外源茉莉酸甲酯处理杜鹃幼苗叶片的热害指数,并测定叶片中的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性、丙二醛(MDA)、脯氨酸含量及质膜透性。结果表明:在高温胁迫下,随着茉莉酸甲酯浓度的增加,SOD、POD及CAT活性及脯氨酸含量呈现先升后降的趋势,且茉莉酸甲酯浓度在100μmol/L时SOD、POD及CAT活性达到最大,分别为107U/g、92U/g和12.74U/g;MDA含量、质膜透性呈先降后升的趋势,茉莉酸甲酯浓度在50μmol/L时质膜透性和MDA含量最小,分别为20%和8.92μg/g。不同浓度的茉莉酸甲酯均能缓解高温对高山杜鹃幼苗的伤害。茉莉酸甲酯浓度为50μmol/L和100μmol/L时对高温胁迫下高山杜鹃各项生理生化特征有较好的缓解作用,可减轻高温对高山杜鹃的热伤害,提高其耐热性。

高山杜鹃花期和蕾期生理指标变化的研究

本实验选取高山杜鹃的花期和蕾期叶片为研究材料。通过对超氧化物岐化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、可溶性糖、总糖、丙二醛含量等各项指标的测定,分析不同高山杜鹃不同时期叶片各指标的变化规律,为杜鹃属植物的进一步研究提供理论基础。

高山杜鹃成都平原越夏生长研究

为加强对高山杜鹃的引种栽培,筛选出适合成都平原栽植的高山杜鹃品种,对引进的11个品种高山杜鹃的整株生长指标(冠幅、株高、地径、分蘖能力)、枝条生长指标(分枝数、最长分枝长度、单枝粗度、最长枝叶片数)、叶片生长指标(叶长、叶宽、叶片厚度)、夏稍长度以及热害指数进行评估。结果表明,引进的11个品种高山杜鹃均能在一定程度上适应成都平原越夏生长,其中‘王妃’的综合表现最好,尤其是其冠幅、株高、地径、最长分枝长度、单枝粗度、叶长、叶宽,在引种2个月后的增幅分别达到了131.43%、155.07%、53.79%、103.65%、26.66%、21.51%、27.34%;‘喜悦’的热害指数最低,几乎不受害。此外‘,粉蜜’‘、红溢’也表现不俗。因此,引进高山杜鹃品种‘王妃’‘、粉蜜’‘、红溢’‘、喜悦’适应成都平原的越夏生长,可进一步推广栽植。

水杨酸对秦岭高山杜鹃耐热性诱导研究

以商洛镇安木王地区的高山杜鹃为试验材料,研究了高温胁迫下外源水杨酸(SA)对秦岭高山杜鹃保护酶(SOD、POD)活性、叶绿素含量、相对电导率、MDA含量等抗热性指标的影响。结果表明:在高温胁迫下,随着SA浓度的增加,叶绿素含量、可溶性糖、SOD活性、POD活性呈现先升后降的趋势,SA浓度为1.0 mmol/L时达到最大值,MDA含量、膜透性呈现先降后升的趋势,在浓度为1.0 mmol/L时达到最小值。由此得知,不同浓度的水杨酸均能有效缓解高温对高山杜鹃幼苗的伤害,并以1.0 mmol/L浓度处理的效果最好。

不同基因型高山杜鹃茎段离体培养及工厂化繁育体系优化

为了优化高山杜鹃茎段离体组织培养体系及其工厂化繁育体系,对10份不同基因型高山杜鹃离体培养与植株再生差异进行了研究。结果表明,供试高山杜鹃茎段外植体在WPM培养基上均能诱导出芽、增殖和生根。在诱导萌发阶段,添加0.5～1.0 mg/L的ZT萌发效果较好,其中有7份材料在0.5 mg/L ZT时获得最佳萌发诱导。在增殖阶段,最佳增殖激素配比为ZT 0.5～0.7 mg/L+NAA 1.0 mg/L,其中6份材料在ZT 0.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L激素配比下增殖达6～9倍。生根阶段,培养基最佳激素配比则为NAA 0.25mg/L+IBA 0.25 mg/L。并且试管外生根效果好于试管内生根,平均成活率为80.95%,而试管内平均成活率仅为57.94%。在最佳激素配比下供试所有高山杜鹃采用试管外生根成活率均在98%以上,并且试管外生根成本低,操作简便快速,适用于工厂化生产。

环境因子和植物生长调节剂对高山杜鹃开花的影响

研究了不同温度、光照、植物生长调节剂浓度对高山杜鹃生长和开花的影响,结果表明:高山杜鹃花蕾萌动到开花的过程中,适宜光照强度2000-3000lux,最佳温度范围是23-25℃;对供试品种而言,最佳赤霉素浓度范围是1.0-1.5mg/L。

油菜素内脂和赤霉素对高山杜鹃种子萌发的影响研究

为探究外源物质油菜素内酯和赤霉素对高山杜鹃种子萌发的影响,以秦岭高山杜鹃种子为试验材料,运用水培法,设置不同浓度的油菜素内酯对高山杜鹃种子进行浸种处理,通过测定种子萌发指标和相关生理指标,与不同浓度赤霉素进行的处理作比较,来探讨两种不同的激素对高山杜鹃种子萌发及幼苗生长的影响。结果显示,与清水对照组(CK)相比,0.05mg/L浓度的油菜素内酯种子萌发率和根系活力、叶绿素含量及可溶性蛋白含量达到最高,增幅分别为28.42%、23.80%、41.14%、52.46%,与对照组相比差异显著(P<0.05);在200-500 mg/L的赤霉素处理中,萌发率和根系活力也出现先增后降的现象,在300 mg/L处理的种子萌发率和根系活力、叶绿素含量及可溶性蛋白含量达到最大,增幅分别为44.21%、28.78%、23.24%、39.09%。通过对比油菜素内酯和赤霉素对种子萌发影响,发现相较于油菜素内酯,赤霉素对有效提高高山杜鹃种子萌发作用更为显著,在200-400 mg/L范围内促进种子萌发,油菜素内脂在0.05~0.1 mg/L范围内起促进作用,两种激素超过适当浓度范围会抑制种子萌发。

高山杜鹃组织培养中褐化控制的研究

为降低高山杜鹃组织培养中外植体的褐化程度,实验对高山杜鹃组织培养中不同的外植体(顶芽、叶片、带腋芽的茎段)、不同的基本培养基和不同的抗褐化剂等进行了研究。结果表明,高山杜鹃不同的外植体褐化率不同,其中带腋芽的茎段的褐化率最低;活性炭对外植体褐变起到了很好的抑制作用,其中以添加1.0g/L的活性炭时外植体褐化率最低。

高山杜鹃ISSR-PCR反应体系建立

[目的]建立高山杜鹃的ISSR-PCR反应体系。[方法]运用正交试验分析模板DNA、TaqDNA聚合酶、Primer、Mg2+和dNTPs 5个因子对杜鹃ISSR-PCR反应影响,建立高山杜鹃ISSR-PCR反应体系。[结果]杜鹃ISSR-PCR 25μl反应体系中5个因子较适水平为:DNA模板浓度为1.6 ng/μl,TaqDNA聚合酶浓度为0.040 U/μl,Primer浓度为0.64 mmol/L,dNTPs浓度为0.68 mmol/L,Mg2+浓度为2.08mmol/L。[结论]研究结果为利用ISSR分子标记技术研究杜鹃提供了理论支持。

高山杜鹃的组织培养快速繁殖技术研究

以德国产高山杜鹃的茎段和茎尖进行外植体诱导试验 ,结果显示 ,茎外植体诱导无菌芽效果较好 ,诱导率达 5 0 .0 %。分别比较了不同培养基对外植体诱导、丛生芽增殖及试管苗生根的效果 ,结果表明 ,外植体诱导的适宜培养基是 1/ 4MS +MS铁盐 +维生素B50 .2mg/L +KT1.0mg/L +水解乳蛋白 (CH) 30 0mg/L +蔗糖30 g/L ;丛生芽增殖的适宜培养基是 1 2MS +KT0 .5mg L +水解乳蛋白 (CH) 30 0mg/L +蔗糖 30 g/L ;生根培养基则以 1 2MS +NAA5mg/L +蔗糖 2 0 g/L +活性炭 0 .5 %为宜。试管苗经假植炼苗培育成穴盘苗再移栽定植 ,可确保种苗质量 ,经穴盘培育的高山杜鹃试管苗 ,上盆移栽存活率达 10 0 %。

外施蔗糖对高山杜鹃“粉金蝶”花色的影响

以高山杜鹃"粉金蝶"为试验材料,研究不同蔗糖处理对开花过程中花色生理特性的影响,以期提高花卉品质。结果表明:各处理对提高花瓣的花青素苷含量、苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性和查耳酮异构酶(CHI)活性均有明显效果,花瓣色泽得到改善。综合各项指标,认为0.5 mol/L蔗糖处理效果最明显。