中国羊踯躅花化学成分研究

从国产杜鹃花科植物羊踯躅(Rhododendron molle G.Don)的花中分离得到两种有药理活性的成分。经光谱(IR,MS,~1HNMR,^(13)CNMR,~1H-~1H COSY,~1H-~1H NOESY,^(13)C-~1H COSY)等分析证明其中一种为新的四环二萜类化合物。命名为羊踯躅素Ⅲ(rhodomollein Ⅲ)(1)。

羊踯躅根乙酸乙酯提取物的药理作用

目的 :探讨羊踯躅根乙酸乙酯提取物的药理作用及急性毒性。方法 :采用小鼠热板法和扭体法试验研究其镇痛作用 ;对二甲苯所致小鼠耳部炎症的影响研究其抗炎作用。结果 :乙酸乙酯提取物灌胃给药的LD50 为 12 5 8.5mg·kg 1 ;对小鼠耳廓发炎肿胀无显著抗炎作用。对浅表性物理刺激 (如热板刺激 )抑制较强 ,而对腹腔注射醋酸引起的大面积且较持久的疼痛抑制作用不佳。结论 :乙酸乙酯提取物具有镇痛作用 ,但抗炎效果不强。

羊踯躅联合石菖蒲治疗急性踝关节扭伤的临床观察

目的观察羊踯躅联合石菖蒲治疗踝关节扭伤的临床疗效。方法将232例急性踝关节扭伤的患者随机分为2组各116例,治疗组运用羊踯躅联合石菖蒲外敷治疗,对照组采用扶他林乳胶剂外敷治疗,治疗10天后比较2组的临床疗效。结果治疗组总有效率为93.1%,对照组为78.4%,治疗组疗效明显优于对照组(P<0.05)。结论羊踯躅联合石菖蒲外敷治疗急性踝关节扭伤为安全有效的方法。

羊踯躅嫩茎离体培养和植株再生

本研究以羊踯躅嫩茎为外植体,应用均匀设计法筛选其最适合的嫩茎基部直接再生芽苗和生根培养基。结果表明,最适合羊踯躅嫩茎基部直接再生芽苗的诱导培养基为:1/4DR+2ip3.75 mg/L+IAA 0.03 mg/L+KT 1.30 mg/L,诱导率为99.8%;生根培养基为:1/4DR+ZT 0.06 mg/L+NAA 0.02 mg/L,生根率达99.0%以上。以再生植株茎节为材料进行快繁的结果表明,在28 d的培养周期内,每段增殖倍数平均达5以上。成功建立了羊踯躅的离体培养和植株再生体系,所建立的植株再生体系可以满足羊踯躅工厂化育苗的需要。

不同分离方法对黄杜鹃叶提取物灭蚜活性的影响

黄杜鹃(Rhododendron molle)叶提取物对桔二叉蚜(Toxoptera aurantii)有较强的毒杀作用。用水提醇沉法和醇提水沉法获得的提取物对蚜虫的致死中浓度(LC50)分别为4 030 mg／L和5 791 mg／L。水提醇沉提取物的乙酸乙酯萃取物对桔二叉蚜的毒力较其他萃取物强,其LC50为1 949 mg／L,表明黄杜鹃叶含有的杀虫活性物质主要存在于乙酸乙酯萃取物中。对水提醇沉提取物进行硅藻土柱层析分离,得到的第3组分得率和灭蚜效果均优于氧化铝柱层析分离到的第3组分。

羊踯躅嫩茎腋芽丛生芽诱导和高效植株再生

为了筛选最适于羊踯躅腋芽丛生芽诱导和生根的培养基,以其新生嫩茎段为外植体,采用均匀设计法进行了快繁实验。结果表明:最适于羊踯躅嫩茎段腋芽丛生芽的诱导培养基为1/2 DR+2ip4.40 mg.L-1+NAA 0.01 mg.L-1+GA32.50 mg.L-1,其诱导率为99.8%;生根培养基为1/4 DR+ZT 0.06 mg.L-1+NAA0.02mg.L-1,其生根率达99.0%。快繁实验结果还表明,每段茎节增殖数平均达5倍以上,培养周期为28 d。在此基础上,文中建立了羊踯躅腋芽丛生和高效植株再生体系,该体系可应用于羊踯躅的工厂化育苗之中。

黄杜鹃花提取物对稻瘿蚊的产卵忌避作用

黄杜鹃花甲醇浸提物及其乙酸乙酯萃取物对稻瘿蚊的选择性产卵忌避率均在 90 %以上 ,非选择性忌避率为 83%～ 84 % ,忌避率明显高于二氯甲烷萃取物和甲醇 -水萃取物 非选择性试验各处理试虫遗腹卵数与对照组无显著差别 试验结果表明 ,可望将黄杜鹃开发成害虫行为调节剂应用于综合防治 (IPM) .

濒危羊踯躅自然居群的遗传多样性和遗传结构分析

利用12对微卫星(SSR)分子标记对涉及6省8个羊踯躅自然居群193个体的遗传多样性和遗传结构进行分析,探讨羊踯躅遗传多样性水平与分化程度的可能原因,为羊踯躅的保护提供科学依据。结果显示:(1)12对SSR引物共扩出260个等位基因,每个位点的平均等位基因数为21.667,平均有效等位基因数(Ne)为5.425,平均多态信息含量(PIC)为0.900;物种水平的Shannon多样性指数(I)为1.768,基因多样性指数(H)为0.777。(2)江西金溪(JX)的羊踯躅居群的遗传变异最丰富,福建政和(ZH)的遗传多样性水平最低。(3)基于无限等位基因模型(IAM)的遗传分化系数(F_(st))为0.142,基因流(N_m)为1.522;AMOVA分析显示羊踯躅居群内变异(87.71%)大于居群间变异(12.29%)。(4)遗传距离法聚类NJ分析和Structure分析均表明,8个自然群体被分为三大类群;Mantel检测发现,羊踯躅遗传距离与地理距离无显著相关性。研究表明,羊踯躅最好以就地保护为主,应优先保护江西金溪(JX)居群,同时增加对福建政和(ZH)和湖北京山(JS)居群的保护权重。讨论了羊踯躅较高遗传多样性和中等程度分化的可能原因。

HPLC-ELSD法测定闹羊花中Rhodojaponin-III和Rhodojaponin-VI含量

为了建立中药闹羊花中Rhodojaponin-III(Rj-III)和Rhodojaponin-VI(Rj-VI)的含量测定方法,本文采用高效液相色谱-蒸发光散射检测方法(HPLC-ELSD)直接测定闹羊花75%丙酮水提取物中Rj-III和Rj-VI的含量。采用Agilent ZORBAX SB-C_18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-水(40∶60)为流动相,流速1 mL/min,柱温30℃,ELSD(Varian 380-L)检测器,雾化器温度55℃,漂移管温度80℃,气体压力为25 psi,载气速度为1.6 L/s,增益为500。结果表明,闹羊花中Rj-III和Rj-VI的含量分别为1.21 mg/g和1.03 mg/g;Rj-III和RjVI回归方程分别为Y=2026.8X-789.2,R^2=0.9979;Y=3777.6X-1849.5,R^2=0.9980;分别在0.4~2.83μg/μL和0.6~4.2μg/μL范围内,进样量与峰面积呈良好的线性关系,该方法简单可行,快速,精密度、重现性和稳定性均较好,可应用于中药闹羊花中Rj-III和Rj-VI的含量测定。

濒危植物羊踯躅全基因组SSR标记开发与鉴定研究（英文）

该研究利用基于全基因组限制性酶切位点简化基因组测序技术(RAD-seq技术),开发濒危植物羊踯躅(Rhododendron molle G.Don)全基因组SSR标记,并对3个群体共63份羊踯躅材料进行验证鉴定,为进一步研究羊踯躅的遗传多样性和群体遗传结构以及保护利用提供技术支持。结果显示:(1)羊踯躅基因组测序获得原始数据7.653Gbp,过滤后为7.513Gbp;经组装发现,羊踯躅171.534Mbp的基因组分布在498 252contigs中。(2)通过SSR检测,在11 961SSR位点中获得了11 687对SSR分子标记,并且二核苷酸为基序的重复类型最丰富,达51.76%。(3)随机选取128对SSR标记在6个羊踯躅株系中进行PCR扩增,获得20对高多态性的SSR标记。(4)用所选的20对多态性SSR标记对3个群体共63份羊踯躅材料进行验证分析发现,这些多态性SSR标记位点的等位基因数为4~16个,期望杂合度(He)为0.489~0.908。研究表明,羊踯躅的SSR丰度适中,且二核苷酸为羊踯躅中最丰富的重复序列,该实验进一步证明RAD-seq技术是一种经济有效的基因测序方法,实验中开发的SSR引物将有助于进一步研究羊踯躅和其他近缘种的群体结构和多样性。

羊踯躅的化学成分研究

目的研究羊踯躅Rhododendron molle果实中的化学成分。方法利用硅胶柱色谱、ODS柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、半制备高效液相、重结晶等多种方法进行分离和纯化,根据理化性质和波谱技术进行结构鉴定。结果从羊踯躅果实中分离得到15个化合物,鉴定其结构分别为杨梅素(1)、双氢杨梅素(2)、没食子儿茶素(3)、槲皮素-3′-O-葡萄糖苷(4)、儿茶素(5)、表儿茶素(6)、二氢槲皮素3′-O-葡萄糖苷(7)、原花青素A-2(8)、去氢双儿茶素A(9)、槲皮素-3-O-α-阿拉伯糖苷(10)、根皮苷(11)、南烛木树脂酚3-O-吡喃鼠李糖苷(12)、2,6-二甲氧-4-羟基苯酚-1-O-葡萄糖苷(13)、2,4,6-三羟基苯乙酮-2-O-吡喃葡萄糖苷(14)、5′-β-吡喃葡萄糖-O-茉莉酸(15)。结论化合物1~4、7~9、13~15首次从羊踯躅植物中分离得到,其中化合物1~11为黄酮类化合物。

大别山黄杜鹃根茎叶花内参基因的表达稳定性评价

黄杜鹃(Rhododendron molle G. Don)是中国野生杜鹃花资源中极具观赏价值和药用价值的特有物种,其野生资源在大别山区零散分布,因此对其稳定内参基因的评估和筛选对黄杜鹃分子生物学和遗传学的研究至关重要。本研究以黄杜鹃根、茎、叶、花为试验材料,采用实时荧光定量PCR技术,分析RmRPL3-1、RmNAC-1、RmCOX1-4、RmPDS-1、RmUBQ-6、RmL10-4等候选内参基因在不同器官组织中的表达稳定性情况,并基于GeNorm、Normfinder和Best-Keeper软件分析荧光定量PCR的结果,筛选最优的内参基因。结果表明黄杜鹃不同组织中最稳定表达的内参基因为RmCOX1-4和RmUBQ-6的组合。本研究筛选的最稳定的内参基因将为黄杜鹃后续的基因表达研究提供校准依据。