野漆树苷的生物活性研究进展

野漆树苷(rhoifolin)又名芹菜素-7-O-β新橙皮糖苷,是以芹菜素(apigenin)为母核的黄酮苷类化合物,它存在于多种来自芸香科柑橘属的植物或中药材中,还存在于多种药用植物,以及大麦、小麦、大豆等一些可食用植物中。目前已有研究报道野漆树苷具有抗氧化、保肝、抗炎、降血压、壮骨、神经保护、降糖、抗癌和抗病毒等多种生物活性。但相比于其苷元芹菜素,以及其他黄酮类化物,如柚皮苷(naringin)、橙皮苷(hesperidin)等,野漆树苷的相关研究文献要少得多。使用电子数据库(如PubMed、学术期刊和Springer Link)进行文献检索,对野漆树苷的生物学活性进行了综述。

化橘红中柚皮苷和野漆树苷含量同时测定方法的建立

目的建立同时测定化橘红中柚皮苷和野漆树苷的含量的方法。方法采用RP-HPLC法,GraceSmartRP C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为甲醇-水-冰乙酸,梯度洗脱;流速1.0 mL.min-1;检测波长330 nm;柱温室温。结果柚皮苷和野漆树苷浓度分别在0.96～28.80μg(r=0.999 9)和0.07～2.10μg(r=0.999 9)范围内与峰面积积分值呈良好线性关系。平均加样回收率(n=5)分别为98.81%和98.73%。结论该方法简便、快速、准确,重复性好,可用于化橘红中柚皮苷及野漆树苷含量的同时测定。

化州柚花不同花期黄酮类成分含量的动态变化研究

目的掌握化州柚不同花期黄酮类成分含量的动态变化规律。方法采用UV法测定花的总黄酮含量;HPLC法测定花中柚皮苷、野漆树苷含量。结果谢花期、幼果期、盛花期、现蕾期花中总黄酮含量分别为306.90mg.g-1、277.93mg.g-1、215.55mg.g-1、162.74mg.g-1,柚皮苷含量分别为246.31mg.g-1、213.93mg.g-1、175.94mg.g-1、130.90mg.g-1;野漆树苷含量在4个花期中基本一致。结论化州柚花期总黄酮和柚皮苷含量以谢花期为最高。

野漆树苷对LPS诱导的RAW264.7细胞的抗炎作用及机制探究

目的:探究野漆树苷(Rhoifolin,RHO)对细菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7细胞炎症模型释放炎性因子的影响,并探讨其作用机制.方法:用脂多糖(0.5μg·mL^(-1))刺激体外生长良好的RAW264.7细胞24h建立体外细胞炎症模型,以MTT法测定不同浓度RHO对RAW264.7细胞的毒性作用,用Griess试剂法检测一氧化氮(Nitric Oxide NO)的含量,RT-PCR法检测细胞中肿瘤坏死因子α(Tumor Necrosis Factor,TNF-α),白介素1β(Interleukin-1β,IL^(-1)β),白介素6(Interleukin,IL-6)的含量,采用Western Blot法检测MAPK信号通路中相关蛋白的含量.结果:与空白对照组相比,在LPS诱导下,RAW264.7细胞分泌致炎因子NO,TNF-α,IL^(-1)β,IL-6(P<0.01);与模型组相比,25~100μmol·L^(-1)的RHO可明显下调LPS诱导的RAW264.7细胞释放炎症因子NO,TNF-α,IL^(-1)β和IL-6(P<0.05,P<0.01),并呈现良好的剂量依赖关系;野漆树苷还不同程度的抑制了Erk和JNK激酶的磷酸化.结论:RHO可以抑制LPS所致的RAW264.7细胞炎症反应,减少炎症因子NO分泌,抑制TNF-α,IL^(-1)β和IL-6mRNA的合成,抑制JNK/SAPK及Erk信号通路可能是其抗炎作用机制之一.

酸橙枳实HPLC指纹图谱方法研究及6种黄酮类药效组分的含量测定

目的：建立酸橙枳实药材高效液相（HPLC）指纹图谱方法及同时测定中芸香柚皮苷、柚皮苷、野漆树苷、橙皮苷、新橙皮苷和川陈皮素6种黄酮类药效组分含量,为完善枳实质量控制体系提供参考。方法：采用色谱柱Agilent Extend-C18（4.6 mm×250 mm,5μm）,乙腈和0.2%冰乙酸水溶液的梯度洗脱系统,柱温30℃;流速1.0 m L·min^-1,检测波长330 nm。结果：建立了酸橙枳实药材HPLC指纹图谱,标识了12个共有色谱峰,指认了6个黄酮类药效组分,分析的10批酸橙枳实药材的相似度均在0.97以上。6个黄酮类药效组分芸香柚皮苷、柚皮苷、野漆树苷、橙皮苷、新橙皮苷和川陈皮素分别在0.117 4-1.174μg,0.082 56-0.825 6μg,0.020 72-0.207 2μg,0.103 2-1.032μg,0.105 8-1.058μg,0.040 96-0.409 6μg范围内线性关系良好（r≥0.999 9）;平均加样回收率分别为97.86%,97.37%,97.46%,95.58%,96.43%,96.01%,RSD均小于3.0%（n=5）。结论：该方法简便、快速、重现性好,可作为酸橙枳实药材的质量控制方法之一。

化橘红原植物化州柚生长过程中黄酮类成分的变化规律研究

【目的】观测化橘红来源植物化州柚在生长过程中黄酮类等成分含量的动态变化规律,为确立采收化橘红时机提供依据。【方法】分别采用分光光度法、高效液相色谱法测定化州柚果皮和叶中总黄酮及柚皮苷含量,并制备指纹图谱。【结果】随着果龄的增加,化州柚果皮和叶中柚皮苷及总黄酮含量均呈显著性下降趋势;但指纹图谱显示,成果初期果皮中野漆树苷含量随果龄的增加而显著升高,62 d后才显著下降,叶中野漆树苷含量则无显著性变化。【结论】从经济价值和有效成分含量两方面综合考虑,果龄34 d时采收化州柚幼果,果龄55 d时采收化州柚未成熟果较为合适。

化橘红中柚皮苷与野漆树苷的化学成分鉴别

【目的】建立化橘红中柚皮苷和野漆树苷的化学成分鉴别方法。【方法】采用二次展开薄层色谱法。【结果】化橘红中柚皮苷与野漆树苷在紫外光254nm下显示分开的暗斑点;经显色后柚皮苷斑点显紫红至橘红色,野漆树苷斑点显灰绿至灰红色;两者的Rf值在0.30～0.45之间。其分离度大于1.6。【结论】本法简便、快速、分离度高,可考虑用于化橘红中野漆树苷与柚皮苷的含量测定。

HPLC法同时测定不同产地凤尾草中的3种活性成分

目的 建立高效液相色谱法同时测定不同产地凤尾草中的蕨素C-3-O-葡萄糖苷、忍冬苷和野漆树苷3种活性成分的含有量。方法 凤尾草甲醇提取液分析采用Diamonsil C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）;流动相为乙腈-0.15%甲酸水溶液,梯度洗脱;体积流量1.0 m L/min;检测波长258 nm和350 nm;柱温30℃。结果 蕨素C-3-O-葡萄糖苷、忍冬苷和野漆树苷3种活性成分分别在0.025 0~1.60、0.054 0~3.45和0.238~15.2μg的测定范围内表现出良好的线性关系（r〉0.999）,加样回收率分别为101.0%（RSD 1.4%）、101.0%（RSD 1.8%）和101.6%（RSD1.2%）。10个不同来源凤尾草中的蕨素C-3-O-葡萄糖苷最高与最低含有量相差约15倍,忍冬苷含有量相差约8倍,而野漆树苷含有量相差达25倍。结论 该方法能同时测定凤尾草中3种活性成分的含有量,而且其药材质量与产地关系较大。

不同储存期毛橘红黄酮类物质含量变化的研究

目的研究储存期对毛橘红黄酮类物质含量的影响,为毛橘红有效储存期的确立提供依据。方法取毛橘红样品3批,在室温条件下贮藏放置,分别于第0、1、2、3、6、9、12个月时取样,用紫外分光光度法测定其总黄酮的含量,高效液相色谱法测定其柚皮苷和野漆树苷的含量。将各时期相关数据进行比较分析,得出毛橘红黄酮类物质在12个月内的含量变化规律。结果毛橘红总黄酮、柚皮苷和野漆树苷含量在12个月内基本稳定。结论毛橘红的储存期暂定为1年。

光谱法研究野漆树苷与人血清蛋白的结合作用

目的研究野漆树苷与人血清蛋白(HSA)的结合作用及机制。方法通过光谱法研究野漆树苷与HSA的作用机制。以能量传递原理及Lineweaver-Burk双倒数方程计算野漆树苷与HSA反应的结合常数和结合距离;以热力学参数判断其与HSA间的作用力类型;以同步荧光光谱考察野漆树苷对HSA构象的影响。结果野漆树苷与HSA反应的结合常数随温度的升高而降低;野漆树苷与HSA之间的结合距离为4.16 nm;野漆树苷与HSA的互相作用以氢键和范德华力结合为主;酪氨酸残基和色氨酸残基的特征荧光光谱峰随野漆树苷浓度的增加而产生猝灭。结论野漆树苷能与HSA结合,其荧光猝灭以静态猝灭为主。

反相高效液相色谱法测定化橘红中野漆树苷的含量

目的 对化橘红中野漆树苷进行含量测定研究。方法 采用反相高效液相色谱法,色谱柱为MACHEREY-NAGEL 100-5 C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为甲醇和水-乙酸(61:4),进行梯度洗脱,流速为1.0mL/min,检测波长345 nm。结果 在0.816～13.056μg范围内,野漆树苷与色谱峰面积呈良好的线性关系,r=0.9995,平均回收率为101.064％,RSD=3.10％(n=5)。结论 建立了测定化橘红中野漆树苷含量的HPLC法,该方法简便准确,重现性好;毛橘红和光橘红中野漆树苷含量有显著差异。

广东英德引种毛橘红与化州原产毛橘红的质量比较

【目的】评价广东英德引种毛橘红的质量。【方法】选取英德及化州产毛橘红样品,采用高效液相色谱(HPLC)法测定其柚皮苷和野漆树苷含量,色谱柱为Luna C18柱,流动相为甲醇—水—冰醋酸,流速为1.0 mL/min,检测波长分别为283、345 nm。【结果】英德产毛橘红柚皮苷和野漆树苷含量均高于化州产毛橘红。【结论】广东英德引种毛橘红柚皮苷含量符合2010年版《中国药典》规定,研究结果初步显示在广东英德引种毛橘红是可行的。

从化州柚中提取的柚皮苷的杂质研究(英文)

目的:研究从化州柚中提取的柚皮苷中的杂质。方法:采用HPLC-PDA/ESI-MS/MS法,通过波谱分析鉴定化合物结构。采用加校正因子的主成分自身对照法对主要杂质进行含量测定。结果:柚皮苷样品中主要杂质为野漆树苷和新北美圣草苷,二者与柚皮苷的校正因子分别为1.82和1.02。对6批样品进行测定,野漆树苷的含量为0.742%～0.926%,新北美圣草苷的含量为0.335%～0.464%,总杂质含量小于1.5%。结论:该检测方法快速、准确,柚皮苷中杂质种类和含量稳定,为柚皮苷应用的安全性提供理论基础。

UPLC-Triple TOF-MS方法鉴定野漆树苷在大鼠体内的代谢物

目的：分析野漆树苷在大鼠体内的代谢产物结构。方法：大鼠灌胃给予野漆树苷96 mg/kg后,收集0~24h尿液及粪便样品,应用超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱（UPLC-Triple TOF-MS）技术分析野漆树苷在大鼠体内的代谢产物。结果：共检测到了除原型药的4个代谢产物。经过对野漆树苷可能代谢产物的母离子和碎片离子的准确分子量及裂解规律的解析,并结合黄酮类化合物的可能代谢途径,推断出了这些代谢产物的结构。结论：上述实验结果将为血浆代谢产物的寻找提供靶标,为野漆树苷体内物质基础的确立以及体内代谢途径和代谢机制的研究提供重要的参考。

神经网络技术在化橘红两品种识别中的应用

【目的】建立有效区别毛橘红与光橘红2种药材的识别模型。【方法】收集不同产地的23批化橘红药材样品的指纹图谱,采用主成分分析法提取主成分,利用BP神经网络进行模式识别。【结果】建立了有效识别毛橘红和光橘红的神经网络模型,有效识别率超过91.3%,其中毛橘红均能被正确识别。【结论】神经网络技术可有效识别出道地药材毛橘红。

山香圆叶提取液纯化工艺的优化

目的优化山香圆Turpinia arguta(Lindl.)Seem.叶提取液纯化工艺。方法以总黄酮、女贞苷、野漆树苷的吸附率和解吸率为评价指标,上样液和洗脱剂(乙醇)的质量浓度(或体积分数)、体积流量、用量为影响因素,静态吸附试验筛选大孔吸附树脂,并结合动态吸附优化工艺。结果最佳条件为HPD300大孔吸附树脂,上样液质量浓度0.2 g/mL,体积流量1 mL/min,上样量30 mL,2 BV去离子水洗涤,6 BV 50%乙醇以1 mL/min体积流量洗脱,总黄酮、女贞苷、野漆树苷含有量分别为53.95%、13.74%、4.07%。结论该方法简单准确,稳定可靠,可用于纯化山香圆叶提取液。

砧木种类对化橘红黄酮类成分含量的影响

目的对采用不同种类的砧木培育出的化橘红药材进行黄酮类成分含量测定,初步探究砧木种类对其黄酮类成分含量的影响。方法以柚皮苷为对照品,利用紫外分光光度法测定各样品中总黄酮含量,以HPLC法同时测定各样品中柚皮苷及野漆树苷含量。结果所建立的可见分光光度法的加样回收率为95.81%,RSD为1.06%。HPLC法同时测定柚皮苷与野漆树苷含量在进样量为1.54-30.80μg和0.07-1.40μg范围内与色谱峰面积积分值呈现良好的线性关系,相关系数分别为0.998,0.997。柚皮苷与野漆树苷的加样回收率分别为98.11%（RSD=3.42%）、98.63%（RSD=2.37%）。不同砧木培育的化橘红黄酮类成分含量差异显著。与凤尾化橘红相比,本地柚砧木凤尾野漆树苷含量与其相近,其他品种均明显低于凤尾化橘红。结论不同种类的砧木对化橘红中黄酮类成分的含量影响较大。非本地柚为砧木芽接后化橘红药材野漆树苷含量显著下降,以本地柚为砧木嫁接凤尾芽苗培育出的化橘红品质较优。

不同基原和规格化橘红的质量差异分析

目的 研究不同基原、规格化橘红的质量差异,为化橘红产业的有序发展提供参考。方法 以不同基原[化州柚Citrus grandis‘Tomentosa’或柚Citrus grandis(L.)Osbeck]、不同规格(橘红胎、柚果、“爪”等)的93批化橘红药材(饮片)为样品,采用高效液相色谱法测定样品中柚皮苷、野漆树苷的含量,并通过R语言的pheatmap参数按药材基原和规格[胎(幼)果和“爪”]绘制2种成分的含量热图。结果 93批样品中柚皮苷、野漆树苷的含量范围分别为16.52~214.64、1.03~10.96 mg/g;在不同商品规格中,以橘红胎中柚皮苷和野漆树苷含量均值最高(2种成分的含量均值分别为108.96、6.30 mg/g)。含量热图分析结果显示,基原为化州柚的样品(毛橘红)中柚皮苷、野漆树苷的含量整体高于基原为柚的样品(光橘红);且在2种基原化橘红药材的不同商品规格中,均以胎(幼)果类样品中柚皮苷、野漆树苷的含量相对较高。结论 以化州柚为基原、商品规格为橘红胎的化橘红质量相对较好。

离体大鼠肠道菌群对野漆树苷的代谢研究

目的:研究大鼠肠道菌群对野漆树苷的体外代谢转化作用。方法:将野漆树苷与离体大鼠肠道菌群的孵育液在37℃厌氧条件下孵育,不同时间点取样经乙酸乙酯萃取后,采用HPLC-MS/MS对代谢产物进行定性和定量分析。结果:孵育4 h后野漆树苷已被肠道菌代谢完全,在代谢组的孵育液中发现了芹菜素和柚皮素两种代谢产物,以芹菜素为主,并且在4 h达到较高浓度,随后缓慢降解,24 h后消失。结论:在离体条件下,大鼠肠道菌群对野漆树苷具有显著的代谢转化作用,提示代谢产物为其生物活性成分。

蜜炙化橘红饮片的质量标准研究

目的:建立蜜炙化橘红饮片的质量标准。方法:按2015年版《中国药典》(四部)相关方法对10批蜜炙化橘红饮片进行性状、显微、薄层鉴别和水分、灰分、浸出物测定,采用高效液相色谱法(HPLC),测定蜜炙化橘红饮片中的柚皮苷和野漆树苷含量。结果:各项鉴别方法专属性强,薄层色谱斑点清晰,分离度良好;拟定蜜炙化橘红水分不得超过8.8%,总灰分不得超过3.2%,水溶性浸出物不得少于53.2%,柚皮苷含量不得少于7.4%,野漆树苷含量不得少于0.9%。结论:该方法稳定性强、专属性高、重现性好,能够用于蜜炙化橘红饮片的质量控制。