HPLC图谱研究大黄“炒炭存性”

目的建立大黄HPLC指纹图谱,并根据主要成分峰面积的变化,分析不同炮制时间对大黄炭饮片质量的影响。方法采用Eclipse Plus C18色谱柱(4.6 mm×200 mm,5μm)色谱柱;以甲醇-0.1%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱;流速为1.0 mL·min^(-1);检测波长为280 nm,柱温为35℃,建立HPLC指纹图谱;采用“中药色谱指纹相似度评价系统(2012版)”对不同产地的大黄样品图谱进行处理,并对不同炮制时间的大黄炭样品进行HPLC图谱的分析与对比。结果建立的大黄HPLC指纹图谱确定了18个共有峰,通过与对照品比对,指认了8个成分,分别为没食子酸、儿茶素、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚和5-羟甲基糠醛;同时,通过HPLC色谱图的比对,发现了大黄炭生成了5个新成分,发现了大黄炭不同炮制时间,各成分的变化趋势。结论建立的大黄HPLC指纹图谱方法重现性好,稳定可行;大黄的“炒炭存性”HPLC色谱图研究,可为大黄炭饮片质量控制和评价提供参考。

大黄炭炮制过程中“增效”和“减毒”潜在质量标志物的变化规律研究

目的:通过筛选大黄炭的潜在质量标志物,分析大黄炭炮制过程中潜在质量标志物的变化规律,为大黄炭炮制机理研究与炮制终点判断提供参考。方法:本研究基于经典文献与网络药理学分析,初步筛选大黄炭的潜在质量标志物。以LPS诱导的HUVEC细胞作为大黄炭“凉血化瘀”功效的体外评价模型,进一步验证大黄炭的潜在质量标志物。使用色差仪对大黄炭的颜色特征进行量化,分析大黄炭炮制过程中潜在质量标志物与颜色变化的关联性。结果:大黄炭的潜在质量标志物可分为两类:结合蒽醌与番泻苷为一类,随炮制程度增加而递减,可能与大黄制炭后泻下作用减弱有关;游离蒽醌、没食子酸、5-HMF为另一类,随炮制程度增加而先增后减,可能与大黄制炭后凉血化瘀作用增加有关。结论:大黄炭中结合蒽醌可作为潜在的“减毒”质量标志物,游离蒽醌可作为潜在的“增效”质量标志物。

微米大黄炭白芨胶对结直肠癌ESD术后感染的防治效果观察

目的:观察微米大黄炭白芨胶辅助结直肠癌内镜下黏膜剥离术(ESD)对术后感染的防治效果。方法:选取90例行ESD治疗的结直肠癌患者,按照随机数字表法分为观察组和对照组,每组45例。对照组予以常规质子泵抑制剂(PPI)辅助ESD治疗,观察组采用微米大黄炭白芨胶辅助ESD治疗。比较两组治疗前后的凝血功能指标,胃液中生长因子表达水平,术后溃疡指数、溃疡愈合率及术后感染发生情况。结果:治疗后,观察组的凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)均短于对照组,凝血酶原时间国际标准化比值(PT-INR)小于对照组,血管内皮生长因子(VEGF)、表皮生长因子(EGF)、转化生长因子-β(TGF-β)的水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组术后1周、术后4周的溃疡指数均低于对照组,溃疡愈合率均高于对照组(P<0.05)。观察组的术后感染发生率低于对照组(P<0.05)。结论:微米大黄炭白芨胶辅助ESD能有效改善结直肠癌患者的凝血功能及创面愈合情况,可降低术后感染发生的风险。

微米大黄炭治疗胃溃疡出血作用机制的实验研究

【目的】探讨微米大黄炭治疗胃溃疡出血的止血作用机制。【方法】选用昆明种小鼠和SD大鼠为研究对象,随机分为空白对照组、云南白药组(剂量为9.gkg-1.d-1)和微米大黄炭高、中、低剂量组(剂量分别为8、4、2.gkg-1.d-1),灌胃给药6 d后检测小鼠出、凝血时间及血小板计数;测定大鼠血小板功能及纤溶活性等指标。【结果】与空白对照组比较,微米大黄炭各剂量组均能缩短小鼠出、凝血时间(P<0.01),增加血小板计数(P<0.05或P<0.01),提高大鼠血小板聚集性,上调血栓烷素B2(TXB2)而下调6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)水平(P<0.05或P<0.01),升高血小板颗粒膜蛋白-140(GMP-140)含量(P<0.05或P<0.01);缩短大鼠凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)(P<0.01),而对组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)和组织型纤溶酶原抑制剂(PAI-1)活性无显著影响(P>0.05)。【结论】通过激活内源性和外源性途径的多种凝血因子而促进凝血过程中的凝血酶原和凝血活酶的生成,增加血小板计数和聚集性可能是微米大黄炭止血的重要作用机制。

微米大黄炭胃镜下喷洒治疗消化性溃疡出血的临床观察

目的:观察胃镜下喷洒微米大黄炭治疗消化性溃疡出血的临床疗效。方法:90例消化性溃疡并出血的患者随机分为微米大黄炭组(治疗组)和去甲肾上腺素组(对照组),各45例,胃镜下观察两组患者的平均止血时间和止血成功率以及术后患者黑便、呕血的次数、血红蛋白量。结果:治疗组平均止血时间较对照组明显减少(P<0.01),止血成功率明显升高(P<0.01),达到96%;治疗组治疗后平均黑便、呕血的次数较对照组明显减少(P<0.05);两组患者平均血红蛋白量比较无统计学差异(P>0.05);治疗组止血疗效高于对照组(P<0.01)。结论:胃镜下喷洒微米大黄炭是治疗消化性溃疡出血的一种安全有效的治疗方法。

微米大黄炭白芨胶对胃黏膜损伤的保护作用及机制

目的研究微米大黄炭白芨胶调控局部黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)、Vinculin、kindlin-2对胃黏膜损伤的保护作用.方法选用80只SD大鼠,随机分为4组处理:对照组、模型组、微米大黄炭组、微米大黄炭白芨胶组.造模后第14天,检测各组大鼠黏膜损伤面积;放射免疫法检测各组大鼠血清中前列腺素E_2(prostaglandin E_2,PGE_2)、胃泌素(gastrin,GAS)含量及胃黏膜组织白介素-8(interleukin-8,IL-8)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factorα,TNF-α)含量;提取胃组织总RNA和总蛋白,RT-PCR及Western blot检测FAK、Vinculin、kindlin-2的mRNA及蛋白表达.结果与对照组相比,模型组大鼠的胃黏膜损伤面积显著增大(P<0.01),血清中PGE_2含量显著降低(P<0.01),GAS含量显著升高(P<0.01),胃黏膜组织中TNF-α、IL-8的含量显著升高(P<0.01),FAK、Vinculin、kindlin-2的mRNA及蛋白表达均显著下降(P<0.01);与模型组相比,微米大黄炭组与微米大黄炭白芨胶组大鼠胃黏膜损伤面积显著减少(P<0.01),血清中PGE_2含量显著升高(P<0.01),GAS含量显著降低(P<0.01),胃黏膜组织中TNF-α、IL-8的含量显著降低(P<0.01),FAK、Vinculin、kindlin-2的mRNA及蛋白表达均显著升高(P<0.01),微米大黄炭白芨胶组各检测指标变化均优于微米大黄炭组.结论微米大黄炭白芨胶能显著改善模型大鼠胃黏膜损伤状况,对损伤胃黏膜的保护作用可能与FAK、Vinculin、kindlin-2的表达增强有关.

HPLC法测定微米大黄炭中没食子酸的含量

目的:建立HPLC法测定微米大黄炭中没食子酸含量。方法:采用Fortis universil C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为甲醇:0.1%磷酸溶液(12:88);检测波长:273 nm;流速:0.9 ml·min^(-1)。结果:没食子酸回归方程为Y=31.93X+2.61(r=0.999 9),其浓度线性范围6.6~66.0μg·ml^(-1)。平均回收率为101.35%,RSD=1.16%(n=6)。结论:测定方法简便、准确、重复性好,可用于微米大黄炭中没食子酸的含量测定。

微米大黄炭对大鼠血小板功能和纤溶活性的影响

目的:研究微米大黄炭对大鼠血小板功能和纤溶活性的影响.方法:以SD大鼠为研究对象,将其分为微米大黄炭大[0.8g/(100g·d)]、中[0.4g/(100g·d)]、小剂量组[0.2g/(100g·d)],阳性对照组云南白药[0.9g/(100g·d)]和空白对照组5组,给药6d,测定大鼠血小板聚集性,血栓素B_2(TXB_2)和6-酮前列腺素F_(1α)(6-keto-PGF_(1α))的含量,并测定大鼠组织型纤溶酶原激活物(t-PA)及其抑制剂(PAI-1)活性.结果:微米大黄炭能够明显提高血小板聚集性和TXB_2水平,而下调6-keto-PGF_(1α)水平,较空白对照组有统计学意义,而微米大黄炭大剂量组作用优于云南白药(64.19%±8.79% vs 56.82%±4.78%,273.35±24.86ng/L vs 238.35±47.30ng/L,15.21±2.71μg/L vs 13.12±3.09μg/L,P<0.05);微米大黄炭各剂量组对t-PA和PAI-1活性无明显影响.结论:微米大黄炭可能通过影响TXB_2和6-keto-PGF_(1α)的含量来实现对血小板活化作用的调节.

胃镜下喷洒微米大黄炭联合口服 治疗消化性溃疡出血的疗效观察

目的观察胃镜下喷洒微米大黄炭联合口服治疗消化性溃疡出血的临床疗效。方法240例消化性溃疡出血患者随机分为去甲肾上腺素对照组(以下简称对照组)、微米大黄炭喷洒治疗组(以下简称治疗组)和喷洒联合口服微米大黄炭治疗组(以下简称喷洒口服治疗组)3组,每组80例。观察患者胃镜下治疗时的平均止血时间和止血成功率及术后患者黑便、呕血的次数、血红蛋白量及止血总有效率,观察患者的不良反应发生率以评价其安全性。结果喷洒口服治疗组和治疗组的止血成功率较对照组明显提高,而喷洒口服治疗组与治疗组比较无明显差异(P>0.05);治疗后患者黑便、呕血的次数及总有效率的比较中发现,喷洒口服治疗组及治疗组较对照组明显减少(P<0.05),其中以喷洒口服治疗组效果最显著(P<0.01);3组患者平均血红蛋白量比较无统计学差异(P>0.05);3组患者治疗后不良反应发生率的比较显示对照组不良反应发生率达11.1%,而喷洒口服治疗组和治疗组均未出现不良反应。结论胃镜下喷洒微米大黄炭联合口服治疗消化性溃疡出血简便、易行,止血效果好,副作用较小,值得推广。

微米大黄炭白芨胶对上消化道内镜黏膜下剥离术后创面愈合的作用机制研究

目的探究微米大黄炭白芨胶在上消化道内镜黏膜下剥离术后创面愈合中的应用效果及可能机制。方法回顾性分析武汉市第一医院2019年10月—2021年10月收治的102例行上消化道内镜黏膜下剥离术患者的病历资料。根据治疗方案将其分为对照组和研究组,每组51例。对照组在上消化道内镜黏膜下剥离术后给予去甲肾上腺素联合埃索美拉唑治疗,研究组给予微米大黄炭白芨联合埃索美拉唑治疗。比较两组术前、术后凝血酶原时间(PT)、部分活化凝血酶原时间(APTT)、胃液及溃疡边缘黏膜中表皮生长因子(EGF)和血管内皮生长因子(VEGF)表达、溃疡愈合效果及安全性。结果两组术后出血发生率比较,差异无统计学意义(P<0.05)。研究组术前、术后1周PT、APTT差值均低于对照组(P<0.05)。研究组术后4周与术后即刻溃疡指数差值高于对照组(P<0.05)。研究组术前、术后4周胃液中EGF、VEGF差值高于对照组(P<0.05)。两组术后4周溃疡边缘黏膜中EGF、VEGF阳性表达率均高于术前(P<0.05),研究组高于对照组(P<0.05)。两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论微米大黄炭白芨胶应用于上消化道内镜黏膜下剥离术后有助于促进创面愈合,可能与提高EGF、VEGF表达促进胃黏膜屏障重建有关。

活性炭联合大黄类制剂协助控制慢性肾脏病高磷血症

目的评价活性炭联合大黄类制剂对常规治疗控制不良的透析患者高磷血症的治疗作用。方法试验设计为多中心前瞻性自身交叉对照试验。选择稳定的血液透析或腹膜透析患者,并存在常规治疗方法不能控制的高磷血症。所有患者维持原有的饮食习惯和基础治疗不变,将患者随机分为治疗组和对照组,治疗组给予爱西特1.5g与三餐同服,肾衰宁胶囊4粒每日3次,根据腹泻和便秘情况调整肾衰宁剂量。治疗1月后交叉,再观察1月。评价治疗是否可降低血清磷水平,以及治疗对白蛋白和血红蛋白的影响。将治疗期前后的生化指标的变化量与对照期前后的生化指标变化量进行自身对照配对t检验。结果共入选50例患者,其中男性24例,腹膜透析患者15例,平均年龄(56±13)岁,平均透析龄(4.9±3.1)年。1例失访、1例入选后用药前出现腹泻、1例饮食极不稳定,没有纳入最终数据分析。治疗可降低血清磷(0.35±0.67)mmol/L(P=0.0010),其中36.2%患者的血清磷水平降低到小于1.78mmol/L,没有发现药物治疗对钙和全段甲状旁腺激素等生化指标的影响。治疗过程中出现3例腹泻和3例便秘,经调整肾衰宁胶囊剂量全部缓解。结论活性炭联合大黄类制剂可协助治疗透析患者高磷血症,为高磷血症的控制提供了一条新途径。由于本研究观察时间短且样本量小,还需要进一步研究证实该治疗方案的长期益处和风险。

大黄与药用炭保留灌肠治疗慢性肾衰竭的临床疗效

目的观察大黄与药用炭保留灌肠治疗慢性肾衰竭(CRF)患者的临床疗效。方法CRF患者40例,分为治疗组和对照组各20例。治疗组用药用炭粉剂15 g及大黄碳酸氢钠片15片加入0.9%氯化钠溶液400 mL中高位灌肠,qd;对照组用含大黄的中药保留灌肠,qd,疗程均为30 d。治疗前后测定血红蛋白(Hb)、血清总蛋白(Tp)、血清清蛋白(Alb)、血清尿素氮(BUN)、血清肌酐(Scr)和血尿酸(UA)等指标,并计算eGFR。结果治疗组患者BUN、Scr和UA较治疗前水平均明显下降(P<0.01),Hb,TP,Alb较治疗前水平升高(P>0.05)。二氧化碳结合力较治疗前上升(P<0.01)。对照组治疗后BUN、Scr、UA较治疗前水平均明显下降(均P<0.01),Hb,Tp和Alb较治疗前下降(P>0.05)。治疗组治疗后Scr及UA较对照组治疗后降低更明显(P<0.01),估计肾小球滤过率(eGFR)较对照组治疗后升高更明显(P<0.05)。结论用大黄与药用炭粉灌肠治疗CRF患者有明显效果,是CRF非透析治疗的有效方法之一。

HPLC法同时测定大黄炭中没食子酸和5-羟甲基糠醛的含量

目的:建立一种同时测定大黄炭中没食子酸和5-羟甲基糠醛含量的方法。方法:采用HPLC法,色谱柱:Agilent Zorbax ODS C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:甲醇-0.1%磷酸溶液(8∶92),流速:0.8 ml·min^-1,柱温:25℃,检测波长273 nm。结果:没食子酸、5-羟甲基糠醛分别在5.48~54.84μg·ml^-1(r=0.999 8)、6.96~69.58μg·ml^-1(r=0.999 8)浓度范围内线性关系良好,平均回收率分别为101.54%(RSD=0.48%)、102.79%(RSD=1.07%)(n=6)。5-羟甲基糠醛含量在大黄饮片炮制20 min达到峰值,和中药专家传统"炒炭存性"经验判断的时间节点一致。结论:该方法简便、灵敏度高、重复性好,能同时测定大黄炭中2种关键成分的含量,是用于大黄炭饮片质量控制的一种可靠方法。

微米大黄炭止血机制的实验研究

目的:观察微米大黄炭对止血作用的影响。方法:以昆明种小鼠和SD大鼠为研究对象,将动物分为空白对照组、云南白药组和微米大黄炭大、中、小剂量组共5组,分别给药6 d后,测定小鼠出、凝血时间,测定大鼠凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)及组织型纤溶酶原激活性(t-PA)及其抑制剂(PAI-1)活性。结果:微米大黄炭能够显著缩短小鼠出、凝血时间、PT和APTT,而对t-PA及PAI-1活性无明显影响。结论:微米大黄炭止血作用是通过激活内源性和外源性途径的多种凝血因子而促进凝血过程中的凝血酶原和凝血活酶的生成,与纤维蛋白溶解活性无关。

微米大黄炭对乙酸溃疡大鼠血浆PGE_2含量的影响

目的:观察微米大黄炭对乙酸溃疡大鼠血浆PGE2含量的影响。方法:用冰醋酸制备大鼠慢性胃溃疡模型,随机分为4组(空白对照组、模型组、微米大黄炭组和雷尼替丁组),分别灌服生理盐水、促愈颗粒和雷尼替丁。心脏穿刺取血后用放射免疫法检测血浆PGE2含量。结果:与模型组相比,微米大黄炭组和雷尼替丁组血浆PGE2含量均明显提高(P<0.05,P<0.01);微米大黄炭组与雷尼替丁比无显著差异(P>0.05)。结论:微米大黄炭可显著促进胃溃疡大鼠上皮细胞合成和分泌PGE2,从而增强胃黏膜防御功能。

微米大黄炭对家兔胃组织局部止血作用的实验研究

目的观察微米大黄炭对家兔胃组织局部止血作用。方法以家兔为研究对象,按4组4×4拉丁方设计,记录家兔胃组织局部出血后喷洒微米大黄炭、云南白药、去甲肾上腺素(NA)及生理盐水后的止血时间。结果微米大黄炭能显著缩短胃壁组织平均出血时间和局部出血时间,与云南白药组比较,微米大黄炭组和NA盐水组平均出血时间显著缩短(P<0.01,P<0.05);局部出血时间微米大黄炭组缩短有统计学差异(P<0.05),而NA盐水组无统计学差异(P>0.05)。结论微米大黄炭对家兔胃组织局部出血作用明显,止血效果优于云南白药和去甲肾上腺素。

红外指纹图谱对不同炮制时间大黄炭的质量控制研究

目的:探讨红外指纹图谱对不同炮制时间大黄炭的质量控制研究。方法:根据《中华人民共和国药典》,采用炒炭法将大黄分别武火炒制0、12、15、18、20、22、24、30和35 min,得到样品1—9,经中药老专家经验判断其炮制质量后,采用红外指纹图谱对其进行质量检测及聚类分析。结果:样品1—6的相似度很高,均>0.99;而样品7—9的红外指纹图谱较样品1—6发生较大变化,且其与样品1—6的相似度均在0.93左右。结论:红外指纹图谱可以作为大黄炭质量控制的辅助方法。

三种快速检测大黄炭炮制程度的光谱技术的比较

目的 比较可见、近红外、中红外三种光谱技术用于大黄炭炮制程度评价的可行性,为大黄炭及其他炭药的快速质量检测提供参考。方法 改变加热温度(180~320℃)和加热时间(10~60 min)制备不同炮制程度的大黄炭,结合颜色特征与成分含量将大黄炭按照炮制程度分组,分别使用可见、近红外、中红外三种光谱技术对不同组大黄炭进行鉴别分析。结果 可见光谱显示大黄炭炮制程度增加时对可见光的反射能力降低。基于近红外光谱的SIMCA分类模型对不同炮制程度的大黄炭鉴别准确度最高。中红外光谱能够解释大黄炭炮制程度增加时常量成分变化规律。结论 近红外光谱可以直接检测大黄切片,反映炭化程度增加时物理与化学性质的变化,可用于大黄炭炮制程度快速评价与炮制过程在线监测。中红外光谱可以直接检测大黄粉末,识别不同炮制程度大黄炭的常量成分特征,可作为大黄炭炮制终点鉴别标准的指标之一。

平补脾肾方治疗肾脾气(阳)虚型慢性肾功能衰竭随机平行对照研究

[目的]观察平补脾肾方治疗肾脾气（阳）虚型慢性肾功能衰竭疗效。[方法]使用随机平行对照方法，将38例门诊患者按抽签法分为两组。对照组19例包醛氧淀粉，10g／次，3次／d，口服。大黄胶囊，0．5g／次，3次／d，口服。药用炭，1．2～1．6g／次，3次／d，口服。治疗组19例平补脾肾方（黄芪、白术、红参、山药、杜仲、三七、刺五加、仙茅、车前子、菟丝子各20g，熟大黄、淫羊藿、巴戟天各15g），1剂／d，常规水1000mL煎至400mL，早晚口服。病情较重配合结肠透析。连续治疗90d为1疗程。观测临床症状、症候积分、不良反应。治疗1疗程。判定疗效。[结果]治疗组显效13例，有效5例，无效l例，总有效率94．74％。对照组显效7例．有效6例，无效6例，总有效率68．42％。治疗组疗效优于对照组（P〈0．01）。症候积分两组均有改善（P〈O．01）．治疗组改善优于对照组（P〈0．01）。[结论]平补脾肾方治疗肾脾气（阳）虚型慢性肾功能衰竭效果显著．值得推广。

微米大黄炭对乙醇性急性胃黏膜损伤大鼠脂氧素A4合成途径的影响

目的:研究微米大黄炭对乙醇诱导急性胃黏膜损伤模型大鼠黏膜的保护作用及脂氧素A4合成途径的影响。方法:将32只SD大鼠随机分为空白组、模型组、铝镁加混悬液组和微米大黄炭组,每组8只,各组分别予以相应浓度药物灌胃1 h后,采用无水乙醇法制备急性胃黏膜损伤大鼠模型,观察各组大鼠胃黏膜组织PGE_(2)、LXA_(4)、LTA_(4)、LTB_(4)水平,检测各组大鼠胃黏膜组织5-LOX、12-LOX、15-LOX及LXA4受体FPR2的蛋白表达水平。结果:各给药组大鼠黏膜损伤指数显著低于模型组。与模型组相比,铝镁加组PGE2、LXA_(4)、15-LOX表达水平显著上升,LTA_(4)、LTB_(4)表达水平均显著下降,5-LOX、12-LOX、FPR2表达水平差异无统计学意义;微米大黄炭组PGE_(2)、LXA_(4)、5-LOX、15-LOX、FPR2表达水平显著上升,LTA_(4)、LTB_(4)表达水平显著下降,12-LOX表达水平差异无统计学意义;组间比较,微米大黄炭组较铝镁加组PGE_(2)、LXA_(4)、5-LOX、15-LOX、FPR2表达水平升高更为显著,LTA_(4)、LTB_(4)表达水平差异无统计学意义。结论:微米大黄炭对乙醇诱导急性胃黏膜损伤大鼠的保护作用机制可能通过上调PGE2、FPR2表达水平,激活15/5-LOX催化LXA4合成途径,发挥促进黏膜修复作用。