昆嵛山盐肤木Rhus chinensis Mill.群落特征及其物种多样性

根据野外典型样方调查结果,以群落植物种类组成、群落外貌特征、群落垂直结构特征、群落多样性几项指标,分析山东半岛昆嵛山国家级自然保护区盐肤木Rhus chinensis群落特征。结果表明:盐肤木群落共出现种子植物66种,隶属于32科57属。在盐肤木群落属的区系组成中,群落植物主要由温带区系和热带区系成分组成,其中温带植物属占显著优势,其次为热带分布属,说明该群落具有明显的温带性质,并具有过渡特征。群落层次分明,有乔木层、灌木层、草本层3个层次,各层次的优势种依次为盐肤木和赤松Pinus densiflora、麻栎Quercus acutissima、披针叶苔草Carex lanceolata。盐肤木群落的物种多样性由高到低依次为灌木层、乔木层、草本层,低均匀度导致物种丰富度最高的草本层具有最低的物种多样性。调查显示盐肤木幼苗幼树多,自我更新良好,群落处于稳定增长状态。通过对群落特征和物种多样性的研究,揭示了昆嵛山盐肤木群落的自然生态规律,为保护和开发利用盐肤木提供了科学依据。

Allelopathic potential of Rhus chinensis on seedling growth of radish,semen cassiae and black soyabean

The allelopathic potential of Rhus chinensis Mill on seedling growth of radish（Raphanus sativus L.）,semen cassiae（seed of Cassia obtusifolia L.） and black soyabean [Glycine max（L.） Merr.] was investigated under laboratory conditions.The water extracts of seed,leaf and bark of R.chinensis inhibited the germination and the growth of roots and shoots of radish,semen cassiae,and black soyabean.Significant increasing reductions in the germination and growth of roots and shoots were observed as the concentration of water extract increased in all bioassays.The order of allelopathic potentials of the three parts from R.chinensis plant on seed germination of these receptors was leaf [ seed [ bark.However,the inhibition of water extracts from R.chinensis seed on root activity of semen cassiae was more severe than from the other two parts.The allelopathic potential on the germination of radish was higher than that of black soyabean and semen cassiae.The integrated effect index for allelopathic potential of water extracts of leaf of R.chinensis on radish,semen cassiae and black soyabean seedling growth were-0.88,-0.93 and-0.98 respectively.The results suggested that it is important to minimize the negative allelopathic potential of R.chinensis in agroforestry systems,and to exploit this traditional Chinese medicinal tree for the production of natural bio-pesticides.

盐肤木AGAMOUS同源基因的克隆及其功能分析

【目的】AGAMOUS(AG)基因在控制雌蕊、雄蕊的发育中起着重要作用。对盐肤木中AG同源基因的克隆与功能分析,有利于明确AG基因在盐肤木花器官发育中的功能,并为进一步探索盐肤木花性别分化机制提供参考。【方法】基于实验室已有的转录组数据并结合RACE技术,从盐肤木花中克隆获得盐肤木AG同源基因,并对其编码的蛋白进行结构和系统进化分析;通过实时定量PCR技术分析盐肤木AG同源基因在雌、雄及两性花的不同花期中的表达特征;构建盐肤木AG同源基因的过表达载体,采用花序浸染法进行拟南芥遗传转化,获得T2代转基因植株,观察转基因植株表型。【结果】在盐肤木克隆获得了AG同源基因的2个可变剪接转录本,分别为RcAG和第6个外显子缺失的Rcag。RcAG包含729 bp的开放阅读框,编码242个氨基酸;Rcag包含687 bp的开放阅读框,编码228个氨基酸。系统进化树分析结果表明,RcAG与其同科植物杧果和阿月浑子的AG同源蛋白亲缘关系较近。qRT-PCR分析表明,在盐肤木不同发育阶段的雌、雄及两性花中,RcAG和Rcag呈现丰度持续升高的趋势,且在盐肤木雄花中,RcAG和Rcag的丰度要极显著高于雌花及两性花。过表达拟南芥表型观察发现,过表达RcAG导致拟南芥花瓣和雄蕊缺失,萼片尖端柱头化,萼片基部边缘出现胚珠结构,而过表达Rcag的拟南芥出现花瓣数量增多和雄蕊数量减少。【结论】Rcag可能由于K区42 bp碱基的缺失丧失AG基因的正常功能,与RcAG相互竞争,共同调控盐肤木雌、雄蕊的发育。这一结果为进一步探索RcAG和Rcag在盐肤木性别分化中的作用奠定基础。

盐肤木叶中化学成分及抗氧化活性研究

研究盐肤木Rhus chinensis Mill.叶的化学成分。利用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱和半制备高效液相色谱等技术,从盐肤木叶95%乙醇提取物中分离纯化得到了15个化合物。根据化合物的理化性质和波谱数据确定了它们的结构,分别为3-hydroxy-5-methylphenol 1-O-β-D-(6′-benzoyl)glucopyranoside(1)、对羟基苯乙醇(2)、松脂素(3)、(3 S,5 R,6 S,7 E)-3,5,6-trihydroxy-7-megastigmen-9-one(4)、丁香脂素(5)、2,4,6-三羟基苯乙酮(6)、野漆树双黄酮(7)、去氢吐叶醇(8)、槲皮素(9)、没食子酸乙酯(10)、7 S,8 R-二氢去氢双松柏醇(11)、贝壳杉黄酮(12)、4,6-二羟基-2-O-(β-D-吡喃葡萄糖苷)苯乙酮(13)、3-hydroxy-5-methylphenol 1-O-β-D-(6′-galloyl)glucopyranoside(14)、debiloside A(15)。其中化合物1为新化合物,化合物2、4、6、7、8、13、15为首次从盐肤木属中分离得到。DPPH、ABTS自由基清除实验结果显示,化合物9、10、11、14对DPPH、ABTS自由基均表现出良好的清除活性,其中化合物9和10活性最为显著,强于阳性对照V C。

酶辅助提取盐肤木总三萜工艺研究

目的:确定酶辅助提取盐肤木三萜类成分的工艺参数。方法:采用紫外分光光度法测定盐肤木总三萜含量。以总三萜含量为评价指标,通过单因素试验筛选酶辅助提取的主要影响因素及水平,进行响应面优化。结果:酶辅助提取的最优条件为:添加2000 U(40 mg)纤维素酶,调节pH5.4,45°C下酶解75 min。在最佳酶辅助提取条件下进行验证试验,盐肤木中三萜化合物的提取得率为1.186%,与预测值接近。结论:该工艺合理可行,可为盐肤木三萜类成分提取研究提供参考。

UPLC-MS法对盐肤木果实及其油脂中漆酚成分的分析

盐肤木果实中特别是其果油中是否含有致敏性成分——漆酚,一直是盐肤木果油作为食用油脂的安全隐患之一。以饱和漆酚为标准对照,采用UPLC-MS分析法,对3种盐肤木果油等4个样品中的饱和漆酚,进行了定性、定量分析。MS定性分析表明,饱和漆酚标准品中的漆酚为其分子中R为C15的饱和烃链,其分子式为C21H36O2,再以二级质谱中质荷比为122.037的分子碎片离子流强度作为定量分析指标,以标准曲线法对4个样品中饱和漆酚进行了定量分析;再通过一级质谱的分析,对可能的7种不同结构的不饱和漆酚在4个样品中的含量进行了初步分析。结论:4个样品中均含有饱和漆酚,其含量在27.5—57.5μg/L之间,盐肤木果油中总漆酚含量应为165—345μg/L左右。

中国对虾(PENAEUS CHINENSIS)肝小管管壁细胞结构的研究

用透射电镜观察中国对虾肝小管。指出肝小管管壁由六种细胞（胚细胞、纤维细胞、疱状细胞、吸收细胞、侏儒细胞、肌上皮细胞）组成。描述六种细胞的超微结构，并根据各种细胞的结构特点，探讨其功能。

GC-TOFMS方法对彭水盐肤木蜂蜜指纹图谱的初步分析

采用气相色谱-飞行时间质谱(GC-TOFMS)的代谢组学方法,对彭水盐肤木蜂蜜的有机成分进行测定分析,共检测出83种有机物,主要为酸类、氨基酸类和芳香族类物质。所检测的两个样品H1和H2,H1所测得的有机成分有81种,H2有62种,H1、H2共同拥有的有机物60种。不同的有机物有N-乙酰色氨酸、L-色氨酸、焦谷氨酸、鸟氨酸、L-蛋氨酸、L-α-氨基丁酸、庚二酸、乙基甲基乙酸、延胡索酸、戊二酸、烟酸、衣康酸、甲基琥珀酸、丙二酸、2-甲基丁酸、月桂酸、柠康酸、吲哚-3-乙酰胺、羟基苯基乳酸、3-羟基苯乙酸、3-吲哚乙腈、邻羟基苯乙酸和嘌呤。

盐肤木果油中没食子酸的UPLC-MS及HPLC分析

盐肤木果实中没食子酸等多酚类物质是重要的生物活性成分,具有抗氧化、抗病毒、消肿瘤等多种生物学活性。采用超高效液相色谱-质谱联用技术(UPLC-MS),分别对压榨法、乙醚浸提法和超临界CO 2萃取法3种提取方法所得盐肤木果油中没食子酸等多酚成分进行了定性分析,再以没食子酸标准品为对照,采用高效液相色谱法(HPLC)对各样品中没食子酸含量进行了定量分析。结果表明:3种样品中均检测到没食子酸的存在,其含量在69.5~434.4 mg/L之间,但不同样品中没食子酸含量差异显著,即提取盐肤木果油的方式不同,其油脂中含没食子酸的多少不同,其中以乙醚浸提油中样品中没食子酸最多,达(426.7±7.7)mg/L。该研究可为进一步开发利用盐肤木果油资源提供方法借鉴。

基于小肠M细胞模型研究黄连多糖对小檗碱经小肠吸收的影响及相关机制

目的基于肠道M细胞模型,研究黄连多糖对小檗碱经小肠吸收的影响及相关机制,为研究中药多糖类成分影响活性成分吸收机制奠定基础。方法以Caco-2细胞与淋巴细胞分别构建小肠Caco-2细胞单层膜模型与小肠M细胞模型;考察不同浓度黄连多糖溶液(浓度分别为20、40和80μg·mL^-1)分别对小檗碱经两种小肠细胞模型转运的影响;以荧光素经小肠细胞模型吸收的Papp值反映黄连多糖对小肠细胞通透性的影响;以Western blot法检测紧密连接蛋白ZO-1的表达水平,分析黄连多糖对小肠细胞模型完整性的影响。结果成功构建小肠Caco-2细胞单层膜模型与小肠M细胞模型;在小肠M细胞模型中,黄连多糖溶液浓度与小檗碱转运率和细胞膜通透性成正相关、与紧密连接蛋白ZO-1表达水平成负相关。当黄连多糖溶液总糖浓度为80μg·mL^-1时,小檗碱转运率、细胞膜通透性以及紧密连接蛋白ZO-1表达水平与空白对照组间差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.001);在小肠Caco-2细胞单层膜模型中,黄连多糖对小檗碱的转运率、细胞膜通透性以及紧密连接蛋白ZO-1的表达均没有显著影响(P>0.05)。结论黄连多糖可通过增加细胞膜通透性和降低紧密连接蛋白ZO-1的表达来促进小檗碱经小肠M细胞模型的转运,推测这可能与黄连多糖经M细胞摄取后对小肠相关免疫的调节作用有关。

基于叶绿素荧光参数F_(v)/F_(m)的月季耐热性评价

利用叶绿素荧光参数F_(v)/F_(m)对月季品种的耐热性进行鉴定评价,结果表明:133个供试月季品种的耐热性荧光参数F v/F m值在0.540~0.808,耐热性基本服从正态分布,表现为多基因控制的数量性状。采用聚类分析法筛选出耐热性强的品种59个,并从中进一步筛选出“甜美人玫迪兰”“光谱”“黄爱玫”和“绿野”等19个耐热性优秀的月季品种。月季不同类型间的耐热性存在差异,其中微型和灌木类型月季耐热性较强。该研究结果对于利用抗性亲本选育耐热月季新品种及研究月季耐热机理具有参考意义。

海拔对盐肤木花朵及叶片黄酮类物质含量的影响

【目的】探明不同海拔地区药用植物盐肤木(五倍子树)花朵和叶片黄酮类物质的含量差异,为盐肤木的综合开发利用提供理论依据。【方法】采用紫外分光光度法测定不同海拔地区(海拔600~800 m、1000~1200 m、1200~1400 m)盐肤木花朵和叶片中单宁酸、杨梅素、芦丁、没食子酸、木犀草素和槲皮素等6种黄酮类物质的成分含量,分析海拔与各成分含量的相关性。【结果】花朵黄酮类总含量在海拔600~800 m区间最高,平均为7.48μg/mL;叶片黄酮类总含量在海拔1200~1400 m最高,平均为5.9μg/mL。不同海拔区,盐肤木花朵中芦丁、杨梅素、单宁酸含量差异不显著,没食子酸、木犀草素和槲皮素含量差异显著(P<0.05);盐肤木叶片中芦丁、没食子酸、杨梅素和单宁酸含量差异不显著,木犀草素和槲皮素含量差异显著(P<0.05)。花朵中杨梅素和槲皮素含量与海拔呈正相关,其余4种黄酮成分的含量都与海拔呈负相关,其中,木犀草素含量与海拔呈极显著负相关;叶片中芦丁、没食子酸和木犀草素含量与海拔呈正相关,其余3种黄酮成分的含量与海拔呈负相关,其中,芦丁含量同海拔呈显著正相关。【结论】海拔对盐肤木花朵及叶片黄酮类物质含量有一定影响,在不同海拔区间叶片中各黄酮类物质含量存在一定差异,海拔1200~1400 m的芦丁、没食子酸、单宁酸、木犀草素平均含量最高,分别为0.66μg/mL、0.48μg/mL、0.28μg/mL、2.12μg/mL;海拔1000~1200 m的杨梅素、槲皮素平均含量最高,分别为0.69μg/mL、2.17μg/mL。

不同AMF对两种生态修复植物生长生理的影响

以枸树和盐肤木为材料,通过盆栽试验分别接种摩西菌根(A)、根内球囊霉(B)、幼套球囊霉(C)、混合菌剂(AB、AC、BC、ABC)对枸树和盐肤木的生长生理特性的影响。结果表明,单菌剂A对构树的侵染率最高,其平均侵染率为79.11%。单菌剂C对盐肤木的侵染率最高,其平均侵染率为81.67%。7种菌剂均能增加盐肤木的地上部干质量,促进效应呈现A 】B 】ABC 】C 】AC 】BC 】AB趋势。混合剂菌剂ABC处理组中的构树的Pn、Gs、Tr和Ci是7种AMF处理组中最大的。本研究初步证实了混合菌剂ABC适合应用于构树种植,同时筛选出单菌剂A和C是适合盐肤木的优良菌种。AMF-植物共生体技术在筛选边坡植物生态修复方面具有良好的应用前景。

贵州不同地区盐麸木表型性状遗传多样性分析

盐麸木是重要的经济树种。采用野外调查的方法,对贵州省13个地区盐麸木的10个表型性状指标进行多样性和变异分析。结果表明,10个表型性状的Shannon-Weaver指数范围为1.16~2.02,平均数为1.88,其中叶缘锯齿数、地径、花序数多样性指数相对较高;遗传变异系数范围为10.72%~39.44%,平均数为25.80%,其中地径、冠幅、株高性状变异系数相对较大。相关性分析表明,株高、冠幅、地径和分枝数性状间两两均存在极显著正相关,花序数与叶缘锯齿数存在显著正相关。主成分分析将10个表型性状简化为4个主成分,累计贡献率为84.37%。贡献率较大的核心指标为地径、株高、小叶宽、叶形指数、小叶数和花序数。以10个性状为基础的聚类分析将13个地区的盐麸木群体分为4类,即:毕节和施秉地区盐麸木种质资源聚为1类,息烽盐麸木种质资源为单独1类,凯里和贵定盐麸木种质资源聚为1类,其余8个地区聚为1类。贵州省13个地区盐麸木种质资源遗传变异程度较高,其植株形态、叶片性状及花序遗传多样性丰富。

中草药的抑菌活性及其对圣女果的保鲜效果

【目的】研究五倍子、油橄榄叶、虎杖和蒲公英4种中草药的抑菌活性及其对圣女果的保鲜效果,为开发绿色安全的圣女果保鲜剂,以及食品天然防腐保鲜剂的研究提供参考依据。【方法】采用醇提法制备五倍子、油橄榄叶、虎杖和蒲公英4种中草药提取液,以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、啤酒酵母和黑曲霉为指示菌,利用牛津杯法考察提取液抑菌活性,以二倍稀释法考察最低抑菌浓度(MIC);将不同浓度(50.00和100.00 mg/mL)五倍子和油橄榄叶提取液喷洒于圣女果表面,以蒸馏水为空白对照(CK),通过感官评价、腐烂率、失重率、硬度、可滴定酸、可溶性固形物和维生素C(Vc)指标,考察对圣女果的保鲜效果。【结果】4种中草药提取液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、啤酒酵母和黑曲霉均有不同程度的抑菌效果,五倍子和油橄榄叶抑菌效果最佳,抑菌圈直径分别为18.47和20.00 mm、17.77和22.00 mm、15.90和17.00 mm、14.83和13.00 mm、15.93和14.07 mm;MIC分别为62.50和15.63 mg/mL、31.25和7.81 mg/mL、31.25和15.63 mg/mL、62.50和31.25 mg/mL、62.50和62.50 mg/mL。从圣女果的保鲜测试指标结果可知,相较于CK,50.00和100.00 mg/mL五倍子和油橄榄叶提取液均可在不同程度上改善圣女果保鲜效果。贮藏至第10 d时,相较于其他处理组,100.00 mg/mL油橄榄叶提取液处理组的感官评分(46.15分)、腐烂率(16.67%)、失重率(4.50%)、硬度(1.20 kg/cm2)、可溶性固形物含量(6.18%)和Vc含量(31.50 mg/100 g)等保鲜指标最优,与CK存在显著(P<0.05)或极显著(P<0.01,下同)差异;而100.00 mg/mL五倍子提取液处理组的可滴定酸含量(0.48%)最高,与CK间差异极显著。【结论】100.00 mg/mL油橄榄叶提取液对圣女果的保鲜效果最佳,作为天然防腐保鲜剂具有良好的应用前景。

棘胸蛙腐皮病病原菌分离鉴定及五倍子水提液的治疗效果探究

近年来随着棘胸蛙的人工养殖规模逐渐扩大,各种细菌性疾病发生频率也连年增高,其中腐皮病是棘胸蛙常见细菌性疾病之一。患腐皮病的棘胸蛙症状起初是表皮脱落出现白斑,而后白斑逐渐扩大甚至深达肌底,后期因细菌感染引发的炎症而死亡。目前棘胸蛙腐皮病只有报道使用抗生素进行治疗,为探究中草药能否替代抗生素对棘胸蛙腐皮病进行治疗,采用常规的细菌分离纯化及16S rRNA序列扩增确定患腐皮病棘胸蛙的主要病原菌,使用五倍子水提液和其他抗生素开展药敏对比试验,并根据前期养殖场的调研,选用五倍子水提液对棘胸蛙腐皮病进行治疗效果探究。结果表明:患腐皮病棘胸蛙病患处的主要病菌为嗜水气单胞菌Aeromonas hydrophila和维氏气单胞菌Aeromonas veronii;药敏对比试验表明,2种病原菌均对甲砜霉素、氟苯尼考、恩诺沙星、维生素C磷酸酯镁盐酸环丙沙星、硫酸新霉素、强力霉素高度敏感,对五倍子水提液中度敏感。通过治疗试验发现,五倍子水提液治疗组患腐皮病棘胸蛙存活率达100%,且在治疗20 d内患处得到明显缓解。研究发现五倍子水提液虽然对于腐皮病的致病菌只有中度抑菌效果,但是在实际治疗中可以有效控制和治疗棘胸蛙腐皮病,可能五倍子水提液除了抑菌作用之外,还发挥了其他的保健功效。

盐肤木体细胞胚胎发生及植株再生

以盐肤木(Rhus chinensis Mill.)幼胚为外植体,研究不同植物生长调节剂组合对其愈伤组织诱导及体细胞胚胎发生的影响,以建立盐肤木体细胞胚胎发生及植株再生体系。结果表明,最适愈伤组织诱导培养基为MS+6-BA 0.2 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L,诱导率为84.57%,诱导出的初代愈伤组织白色或淡黄色,质地疏松,表面光滑,为非胚性愈伤。初代愈伤组织转移到1/2 MS+6-BA 2 mg/L+NAA 0.5 mg/L培养基上培养1个月后,长出淡黄色质地紧密的胚性愈伤组织,诱导率高达100%,在此培养基上胚性愈伤组织增殖倍数为854.73%。所获得的胚性愈伤组织转接到1/2 MS+6-BA 2 mg/L+NAA 0.5 mg/L+蔗糖4%的培养基上培养1个月后可诱导体细胞胚胎发生,诱导率可达32.67%。诱导得到的体细胞胚胎经历球形胚、心形胚、鱼雷胚、子叶胚进一步分化发育成苗。无菌苗炼苗后栽种到泥炭土∶蛭石∶珍珠岩为2∶1∶1的生长基质上,能100%稳定成活。经过细胞学观察分析,体细胞胚的发育与合子胚相似。

不同基质·遮阴强度对盐肤木种子萌发的影响

采用对盐肤木种子3种遮阴强度和4种土壤基质多种处理进行穴盘播种育苗试验,研究不同处理对盐肤木种子发芽率和发芽势的影响。结果表明:MLI(一层4针黑色遮阳网,遮阴50%~60%)和混合土环境(砂土∶腐殖质=3∶1)对盐肤木种子的萌发促进效果最优,发芽率和发芽势分别达到80.83%和40.83%。

北盘江流域优势灌木养分及生态化学计量特征

为揭示北盘江流域植物叶片、根系和土壤的有机C、全N和全P含量及生态化学计量特征,选择合欢(Albizia julibrissin)和盐肤木(Rhus chinensis)两种优势灌木,测定合欢和盐肤木叶片、根系及土壤有机C、全N和全P含量,分析研究区植物养分含量、化学计量特征和生存策略。结果表明,两种植物叶片有机C、全N和全P含量均高于根系。合欢叶片有机C、全N和全P含量均高于盐肤木,根系相反。盐肤木叶片C/N、C/P均大于合欢,N/P相反。合欢根系C/N高于盐肤木,C/P、N/P相反。两种植物叶片和根系均受N限制。两种植物各土层有机C、全N和全P含量均随土层深度增加而降低,盐肤木土壤有机C、全N和全P含量均高于合欢,盐肤木土壤C/N、C/P均大于合欢。该区植物土壤养分含量受N限制,应着重提高土壤中的N含量,有针对性地对当地植被进行恢复,改善北盘江流域的生态环境。

基于网络药理学和分子对接技术探讨盐肤木治疗冠心病的作用机制

目的:基于网络药理学与分子对接技术,探讨盐肤木治疗冠心病的潜在作用机制及药效物质基础。方法:通过检索文献获取盐肤木的活性成分,并采用Swiss Target Prediction收集其靶点,通过GeneCards、OMIM、PharmGKB、DrugBank、NCBI数据库获取冠心病相关靶点。将药物与疾病靶点取交集输入STRING数据库建立蛋白质相互作用(PPI)网络,并通过拓扑分析筛选核心靶点。利用Cytoscape构建“成分—靶点”网络,筛选关键成分。通过R4.1.3进行GO功能富集和KEGG通路富集分析,基于AutoDock软件将核心成分和核心靶点进行分子对接,并运用PyMol软件实现结果可视化。结果:盐肤木的16个活性成分中共有397个潜在靶点,与冠心病相关靶点276个,通过拓扑分析筛选出AKT1、SRC、STAT3为本研究的核心靶点,咖啡酸、紫铆素、根皮素、鞣花酸、槲皮素等是盐肤木治疗冠心病的关键成分。GO富集分析显示其功能涉及氧化应激、跨膜受体蛋白酪氨酸激酶活化等,KEGG富集主要与PI3K/Akt信号通路、脂质和动脉粥样硬化通路等有关。分子对接结果显示,5个关键成分与3个核心靶点均具有较好的亲和力。结论:盐肤木的关键活性成分包括咖啡酸、紫铆素、根皮素、鞣花酸、槲皮素等,可作用于AKT1、SRC、STAT3等核心靶点,并通过调节PI3K/Akt等多条信号通路发挥治疗冠心病的作用。