注射用核糖核酸Ⅲ细菌内毒素检查方法的研究

目的建立注射用核糖核酸Ⅲ细菌内毒素检查方法。方法按《中国药典》2010年版(二部)附录ⅪE细菌内毒素检查法进行实验和结果判断。结果用两个生产厂家的鲎试剂进行研究,注射用核糖核酸Ⅲ的最大不干扰浓度为1.25 mg·mL-1,并对三批样品进行检查,均无干扰作用,其细菌内毒素均小于15 EU·mg-1。结论本品采用细菌内毒素检查法(凝胶法)控制细菌内毒素的含量合理可靠。

脱氧核糖核酸和核糖核酸与铽离子的荧光反应及其在分析中的应用

本文提出了一种简单灵敏的测定DNA和RNA的方法。实验结果表明RNA可直接与铽离子发生荧光反应,但DNA只有在发生变性之后才能发生同样的反应。酸变性的最佳pH范围在2.2～2.8之间,通过实验确定了荧光反应的最佳条件。在最佳条件下测定DNA和RNA的线性范围在0.5～20.0μg/ml,标准偏差在5％以內。小牛胸腺DNA和鱼精子DNA在酸变性时其对铽离子荧光增强效应提高数十倍,而RNA变性前后对铽离子荧光增强效应变化不大,这本身反映了DNA与RNA二级结构的不同。利用DNA和RNA在酸变性时对Tb(Ⅱ)荧光增强变化的不同可在一定量的DNA存在下测定RNA或在一定量的RNA存在下利用差减法测DNA。

核糖核酸Ⅱ对老年晚期非小细胞肺癌患者生存期及免疫功能的影响

目的观察注射用核糖核酸Ⅱ(简称核Ⅱ)对美国东部肿瘤协作组(ECOG)评分>2分的老年晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者的生存期及免疫功能的影响。方法将99例ECOG评分超过2分的老年晚期NSCLC患者随机分为核Ⅱ组(50例)和对照组(49例),核Ⅱ组患者静脉滴注核Ⅱ200 mg、每日1次,对照组患者采用最佳支持治疗。结果治疗后核Ⅱ组患者CD3+,CD4+,CD56+,CD4+/CD8+表达的提升明显高于对照组(P<0.05);核Ⅱ组患者咳嗽、发热、乏力及恶液质的发生率低于对照组(P>0.05);核Ⅱ组KPS评分升高比例明显高于对照组(P<0.05),体重明显增加(P<0.05);核Ⅱ组患者的无进展生存期(PFS)延长(P<0.05),总生存期(OS)延长无统计学意义(P>0.05)。结论核Ⅱ可提高ECOG评分>2分的晚期NSCLC老年患者的免疫力,减轻其相关症状,改善生活质量,增加体重,延长患者的无进展生存期,但对延长总生存期无临床意义。

老年患者使用核糖核酸Ⅱ的疗效观察

目的探讨老年患者使用注射用核糖核酸Ⅱ的疗效。方法分析50例老年患者静脉使用注射用核糖核酸Ⅱ前后免疫指标的变化、患者的主观感觉及呼吸道感染的几率。结果治疗期间,50例患者中有2例患者出现轻度头晕而终止治疗,48例患者主观感觉良好,呼吸道感染的几率明显减少。治疗后免疫指标IgG、IgA、IgM、CD3、CD4、CD8都有所提高,达到或接近正常水平,与治疗前比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论老年患者使用注射用核糖核酸Ⅱ疗效好,不良反应少。

维生素C片剂和注射剂的流动注射测定

根据维生素Ｃ与１，１０－二氮杂菲－铁（Ⅲ）形成有色络合物在５１０ｎｍ处有最大吸收，利用流动注射分析测定其含量，片剂和注射剂测定结果分别与１９９０年版中国药典法相比较，ｔ检验均无显著差异．该法简便，快速．

BP素在肿瘤治疗中的临床应用价值

机体免疫与肿瘤的发生发展密切相关,免疫功能低下是恶性肿瘤发生的重要因素,注射用核糖核酸Ⅱ(BP素)作为一种免疫增强剂在肿瘤治疗中得到广泛的应用。BP素是牛胰腺中提取的核糖核酸,是高纯度的具有生理活性的物质,它能激活T淋巴细胞产生大量淋巴因子和杀伤细胞,以增强人体免疫功能。还能激活B淋巴细胞,以增强人体体液免疫水平,可直接进入细胞核内,抑制癌细胞DNA,导致癌细胞死亡。

注射用核糖核酸Ⅱ安全性医院集中监测研究

目的开展注射用核糖核酸Ⅱ上市后安全性再评价研究。方法采用医院集中监测方法,选取我院2016年7月至2017年3月使用注射用核糖核酸Ⅱ的住院患者1 800例,从患者的一般信息、临床诊断、用药信息、不良反应/不良事件(ADR/ADE)信息进行统计分析。结果纳入的1 800例患者中,发生4例ADR,不良反应发生率为0.22%,属于偶见不良反应。临床表现为头晕、心悸、皮疹、恶心等。结论注射用核糖核酸Ⅱ不良反应发生率较低,安全性良好。

我院注射用核糖核酸Ⅱ使用情况分析

目的:了解我院辅助用药核糖核酸Ⅱ注射液的用药情况,促进我院辅助用药的合理化。方法:分析我院去年全年核糖核酸Ⅱ注射液使用的基本情况,按科室5%抽查病历数,并分析用药合理性。结果:抽查的163份病历中有82份用药不合理,不合理使用率为50%,主要存在的问题为无指征用药。结论:我院核糖核酸Ⅱ注射液临床应用存在很多问题。

注射用核糖核酸Ⅱ细菌内毒素检查法研究

目的:建立注射用核糖核酸Ⅱ的细菌内毒素检查方法。方法:按《中国药典》2015年版四部通则进行实验和结果判断。结果:注射用核糖核酸Ⅱ稀释至1. 0mg·mL^(-1)时对细菌内毒素检查无干扰,细菌内毒素限值为0. 5 EU·mg^(-1)。对3批注射用核糖核酸Ⅱ进行常规检查,结果均符合规定。结论:所建立的细菌内毒素检查法可用于注射用核糖核酸Ⅱ的细菌内毒素检查。

注射用核糖核酸II联合紫杉醇＋顺铂方案治疗晚期NSCLC的临床疗效观察

目的观察注射用核糖核酸II（简称核II）联合紫杉醇＋顺铂治疗晚期非小细胞肺癌的疗效及安全性.方法：80 例晚期非小细胞肺癌患者随机分为对照组和核II 组,对照组采用TP 方案（紫杉醇＋顺铂）化疗,核II 组应用TP 方案化疗同时联合核糖核酸II200 mg/d 静点,连续治疗2 周期（21 天为一个周期）结束后20 天评价其疗效、T 淋巴细胞亚群的变化及化疗相关毒副反应的发生率.结果：①治疗后核II 组患者的有效率高于对照组（P〈0.05）.②治疗后核II 组CD3、CD4、CD56 及CD4/CD8 的表达明显高于对照组（P〈0.05）.③治疗后核II 组发生粒细胞II度以上减低及II度以上消化道反应的发生率明显低于对照组 （P〈0.05）.④化疗后核II组KPS评分改善率及总提高率均高于对照组（P〈0.05）.结论：化疗联合核II 治疗晚期非小细胞肺癌,可提高NSCLC 患者的抗肿瘤疗效,增强机体免疫功能,减少化疗过程中粒细胞减低及胃肠道毒副反应的发生率,改善患者的生活质量.

注射用核糖核酸治疗慢性乙型肝炎40例观察

目的评价注射用核糖核酸治疗慢性乙型肝炎的作用。方法 80例患者随机分为对照组和治疗组,治疗组使用注射用核糖核酸,30mg/d,其他治疗药物和对照组相同,疗程1个月,治疗前后检测血清转氨酶、白蛋白、总胆红素、乙型肝炎标志物。结果治疗组的血清转氨酶及白蛋白较对照组恢复快,2组之间有显著性差异。而对总胆红素和乙型肝炎标志物无影响。结论使用注射用核糖核酸可加速慢性乙型肝炎肝功能的恢复。

反相离子对色谱法测定注射用核糖核酸酶解产物中的5′-核苷酸

目的建立反相离子对色谱法同时测定注射用核糖核酸酶解产物中4种5'-核苷酸的方法,根据核苷酸的含量计算样品中核糖核酸的含量。方法用蛇毒磷酸二酯酶将样品中的核糖核酸水解为5'-核苷酸,采用岛津VP-ODS(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相A为甲醇-水(5:95)[含20 mmol L-1KH2PO4和1%(v/v)四丁基氢氧化铵(TBAOH)溶液,pH=6.5],流动相B为甲醇-水(80:20)[含1%(v/v)TBAOH溶液,pH=6.5],梯度洗脱,检测波长为254 nm。结果建立的色谱法能将4种核苷酸良好分离,4种核苷酸在0.50～15μg mL-1线性关系良好,相关系数分别为0.999 8、0.999 9、0.999 9、0.999 9;平均回收率(n=6)均在95.1%～106.3%,RSD均<3.5%。结论该方法专属性好,具有一定的准确性,可用于检测注射用核糖核酸的含量,测定结果可为注射用核糖核酸的质量研究和评价提供依据。

晚期乳腺癌化疗后应用核糖核酸Ⅱ注射液的疗效及对外周血T细胞亚群的影响分析

目的:探讨晚期乳腺癌新辅助化疗后应用核糖核酸Ⅱ注射液的疗效及对外周血T细胞亚群水平的影响。方法:回顾性分析2015年10月~2018年10月我院收治的80例晚期乳腺癌化疗患者的临床资料,将38例单纯采用常规化疗的作为对照组,将42例在化疗基础上联合核糖核酸Ⅱ注射液治疗的作为观察组。对比两组临床疗效、化疗前后免疫功能水平及外周血T细胞亚群水平。结果:观察组临床缓解率并不优于对照组,差异没有统计学意义(P>0.05);观察组化疗6个周期后IgA、IgG、IgM水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组化疗6个周期后CD4^+、CD8^+、CD69水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:乳腺癌化疗后应用核糖核酸Ⅱ注射液并不能提高临床疗效,但是可以增强机体免疫能力,提高外周血T细胞亚群水平,从而达到降低副反应发生的目的,值得推广。

分子排阻色谱-多角度激光散射法测定注射用核糖核酸分子量及其分布

目的测定注射用核糖核酸中核糖核酸的分子量及其分布。方法采用分子排阻色谱-多角度激光散射联用技术,以含0.02%叠氮钠的0.1 mol·L-1氯化钠溶液为流动相,流速0.5 m L·min-1,采用TSKgel G2000SWXL色谱柱,柱温为30℃。结果获得了样品的dn/dc值、分子量与分子量分布等分子特征参数。测得样品dn/dc值为0.1547,分子量（Mw）在4.6-234.2 k Da,分子量分布系数（Mw/Mn）在1.3-2.9。结论本文尝试以新的思路建立测定生物大分子核糖核酸分子量的方法,该方法快速、简便,可用于核酸类药物分子量及其分布的测定。实际样品检测结果表明,市售的注射用核糖核酸的分子量及分布差异均较大,原料及生产工艺有待进一步规范,加强质量控制。

我院注射用核糖核酸Ⅱ临床使用的综合干预效果分析

目的:探讨综合干预模式对注射用核糖核酸Ⅱ临床使用的干预效果,为肿瘤治疗辅助药管理提供参考。方法:通过建立评价标准、病历点评、成立肿瘤治疗辅助药管理工作组、药物与处方权分级、超说明书用药审批、加强考核和培训、临床药师参与等方式,干预注射用核糖核酸Ⅱ的临床使用;并对我院2015年4-6月(干预前)、2015年7-9月(第1次干预后)、2015年10-12月(第2次干预后)、2016年1-3月(第3次干预后)注射用核糖核酸Ⅱ的使用情况进行统计分析。结果:干预前我院注射用核糖核酸Ⅱ的合理使用率仅为77.34%,第1次、第2次、第3次干预后分别上升至83.25%、83.64%和95.12%,与干预前比较差异均有统计学意义(P<0.05)。不合理使用类型包括适应证不适宜、疗程不适宜、用法用量不适宜和联合用药不适宜等,分别由干预前的2.96%、4.93%、13.79%和0.99%下降至第3次干预后的1.63%、0、3.25%和0。注射用核糖核酸Ⅱ的使用率由干预前的8.81%下降至第3次干预后的3.93%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:多种干预方法相结合的综合干预模式,可促进注射用核糖核酸Ⅱ的合理使用,建议进一步研究和评价该模式对其他肿瘤治疗辅助药的干预效果。

茵栀黄注射液联合西药治疗自身免疫性肝炎随机平行对照研究

[目的]观察茵栀黄注射液联合西药治疗自身免疫性肝炎疗效。[方法]使用随机平行对照方法,将30例门诊患者按抛硬币法简单随机分为两组。对照组15例强的松,20mg/次,2次/d。硫唑嘌呤,50mg/次,2次/d。治疗组15例茵栀黄注射液10m L+10%葡萄糖250m L,2次/d,静滴;西药治疗同对照组。连续治疗90d为1疗程。观测临床症状、层黏蛋白、IV胶原、透明质酸、Ⅲ型前胶原蛋白肽、不良反应。治疗1疗程,判定疗效。[结果]治疗组显效8例,有效5例,无效2例,总有效率88.67%。对照组显效4例,有效4例,无效7例,总有效率53.33%。治疗组疗效优于对照组(P<0.05)。肝纤维指标两组均有改善(P<0.01),治疗组改善优于对照组(P<0.01)。[结论]茵栀黄注射液联合西药治疗自身免疫性肝炎疗效满意,无严重不良反应,值得推广。

二维液相色谱法检测注射用核糖核酸Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ中苯酚残留量

目的:采用二维液相色谱法检测注射用核糖核酸Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ中苯酚的残留量,并对方法进行验证。方法:一维色谱采用ACQUITY UPLC BEH200SEC(150 mm×4.6 mm,1.7μm;填料:亚乙基桥杂化二醇包膜颗粒)色谱柱,流动相为0.1 mol·L^(-1)磷酸二氢钠溶液(p H 7.0),流速0.2mL·min^(-1),检测波长267 nm,柱温30℃;二维色谱采用Inertsil ODS SP(4.6 mm×250 mm,5μm;填料:高纯硅胶)色谱柱,以ZORBAX SB-Aq保护柱(4.6 mm×20 mm,5μm;填料:经二异丙基修饰的硅氧烷键合硅胶)作为富集柱,流动相为25%甲醇,流速1.0mL·min^(-1),检测波长267 nm,柱温30℃。检测核糖核酸(RNA)样品分别为来自健康猪肝脏的核糖核酸Ⅰ,来源于牛胰脏的核糖核酸Ⅱ,以及来源于猪脾脏的核糖核酸Ⅲ。结果:苯酚质量浓度在0.246 6~2.219 4μg·mL^(-1)范围内与峰面积呈良好线性(r=0.999 7),回收率在99.7%~100.3%;企业A的注射用核糖核酸Ⅰ和企业D的注射用核糖核酸Ⅲ样品中均未检出苯酚,企业B的注射用核糖核酸Ⅰ样品中苯酚残留量为0.002%,企业C的注射用核糖核酸Ⅱ样品中苯酚残留量为0.008%。结论:本实验建立的二维液相色谱方法能用于注射用核糖核酸Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ中苯酚残留量的检测。

流动注射-鲁米诺-Ag(Ⅲ)化学发光法测定金银花中绿原酸

碱性介质中绿原酸对鲁米诺-Ag(Ⅲ)化学发光体系有显著增敏作用,在一定范围内,绿原酸的浓度与化学发光强度成正比。据此,结合流动注射技术,建立了绿原酸化学发光测定的新方法,并研究了影响化学发光强度的因素。在最优条件下测得方法的检出限为0.50μg/L,线性范围1.0—200.0μg/L。对25.0μg/L的绿原酸进行平行测定11次,其RSD为2.1%,该法已用于金银花中绿原酸含量的测定。

蠕虫来源的LNFPⅢ对周围性神经病理性疼痛的病理发生和脊髓胶质细胞活化的影响

目的 探讨蠕虫来源的免疫调控性糖分子乳-N-岩藻五糖Ⅲ（lacto-N-fucopentaoseⅢ,LNFPⅢ）对成年大鼠胫神经永久性横断伤（即改良型备用性神经损伤,modified spared nerve injury,mSNI）后神经病理性疼痛的病理发生的影响,以及它对此时脊髓胶质细胞活化的影响。方法 成年雄性SD大鼠随机分为4组,即假手术组（n=6）、mSNI手术组（n=6）、mSNI手术＋牛血清白蛋白（BSA）组（n=12）和mSNI手术＋LNFPⅢ组（n=12）。各组动物行右侧mSNI手术或者相应的假手术,根据实验分组腹腔注射BSA或LNFPⅢ与BSA的结合物。每组取6只大鼠进行足底试验、von Frey纤维试验、针刺试验和丙酮试验,测试手术前、后手术同侧和对侧大鼠后爪足底面腓肠神经和隐神经皮肤区域特异性的疼痛反应。制备mSNI手术＋BSA组和mSNI手术＋LNFPⅢ组手术后7d和14d（各组每个时间点3只动物）的第3~第4腰椎（L3~4）脊髓节段冰冻切片,进行小胶质/巨噬细胞标志物分化抗原簇分子11b（cluster of differentiation molecule 11b,CD11b）和星形胶质细胞标志物胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）的免疫荧光染色。结果 成年大鼠mSNI后,早期系统性给予LNFPⅢ可显著缓解手术后急性诱导期（4/5d）和慢性转化期（7/8d和14/15d）中手术侧后爪足底面腓肠神经和隐神经皮肤区域特异性的机械和温度刺激诱发的病理性疼痛。同时,早期系统性给予LNFPⅢ抑制mSNI大鼠手术侧脊髓背角中术后7d小胶质/巨噬细胞以及术后7d和14d星形胶质细胞的活化。结论 早期系统性给予LNFPⅢ能抑制成年大鼠mSNI后神经病理性疼痛的病理发生（包括急性诱发和慢性转化）以及该过程中脊髓胶质细胞的活化。

注射用核糖核酸的含量测定方法比较

建立了HPLC法和磷测定法测定注射用核糖核酸的含量,并与现行标准中紫外吸收系数法的含量测定结果比较,以评价现行标准中含量测定方法的准确性。HPLC法采用Zorbax SB-Aq色谱柱,以磷酸盐缓冲液∶甲醇为流动相,梯度洗脱,检测波长260 nm,4种核苷酸和4种核苷线性关系良好。磷测定法是将有机磷水解成无机磷后测定,重复测定的RSD为0.6%。3种方法的比较结果提示,现行标准中缺少对核糖核酸片段长短、杂蛋白和苯酚残留的控制要求,不能保证紫外吸收系数法测定结果的准确性。