应用广谱引物PCR法检测立克次体的研究

本文选用普氏立克次体柠檬酸合成酶基因做为靶序列合成一对引物（ＲＰＣＳ８７７ｐ和ＲＰＣＳ１２５８ｎ）。用该对引物对不同种类立克次体（包括：加拿大；普氏；莫氏；Ｑ热；恙虫病Ｇｉｌｌｉａｍ株、Ｋａｔｏ株、Ｋａｒｐ株；澳大利亚；立氏；康氏；小蛛；西伯利亚２４６、西伯利亚２３２；精河；内０１；内Ｗ８８；黑８４；黑０５４）及大肠杆菌ＨＢ１０１，ＤＮＡ进行扩增。同时，选用三种不同方法处理模板进行扩增结果的比较。结果表明：该引物可扩增除恙虫病以外的所有立克次体，而大肠杆菌、λＤＮＡ不能被扩增。采用简单煮沸法处理模板，对含立克次体的材料进行扩增是可行的。