Regeneration and gene transformation systems of Robima pseudoacacia 'Idaho' mediated by Agrobacterium tumefaciens

Robinia pseudoacacia ‘Idaho＇ is one of several multi-purpose trees used in ornamental, soil and water conservation, fodder and nectar sources. Plant abiotic stress tolerance transformed by genes could meet the requirements for reclamation of arid or alkalid lands and vegetation restoration. For this paper, we studied the effects of auxin and cytokine on Idaho locust in vitro regeneration and the establishment of gene transformation systems for plants mediated by Agrobacterium tumefaciens. Results showed that the ratios of cytokinin and auxin were the major factors affecting adventitious bud differentiation on a MS medium; the concentration of 0.5 mg·L^-16-BA benefitted callus proliferation and 0.25 mg·L^-1 IBA promoted shoot rooting; however, a higher IBA concentration will inhibit rooting. The most effective antitoxin for screening transgenic Idaho locust shoots was G418 and the most sensitive concentration of it was 8 mg·L^-1.

香花槐愈伤组织的诱导与细胞悬浮培养技术

香花槐是集绿化、固土、饲料等于一体的多用途林木,其细胞培养则是充分利用该树种优良特性的生物工程技术基础.该文以香花槐叶片为外植体,研究愈伤组织诱导和细胞悬浮培养的技术体系.结果表明,愈伤组织诱导最适培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+蔗糖30 g/L.愈伤组织生长符合S型曲线,在固体培养基上,培养7 d进入指数生长期,到28 d,愈伤组织鲜重从1.329 3 g增长到10.763 7 g.悬浮培养的细胞,最大生长量为鲜重8.496 g或干重0.474 g.S型生长曲线分析表明,细胞生长迟滞期为3.6 d,最大生长量为14.6 g.

香花槐组培苗快繁体系的建立及工厂化育苗的主要影响因素

建立了香花槐组培苗快繁无性系.在改良MS培养基中添加ρ(6.BA)/mg L-1=0.35-0.5、ρ(NAA)/mg L-1=0.05-0.08,ρ(GA3)/mg L-1=0.07-0.1作为生长培养基.在丛生芽诱导培养基中,ρ(6-BA)/mg L-1=0.8-1.4,其余成分同生长培养基.两种培养方法同时使用,保证了组培苗繁殖系数为5左右.生根培养基中大量元素为MS基本培养基的1/4,ρ(IBA)/mg L-1=0.1-0.5、ρ(IAA)/mg L-1=1.7-2.5,香花槐组培苗的生根率为90％.炼苗后组培苗的移栽成活率为85％,且植株表型未见变异.将MS基本培养基中硝酸钾的含量由1.9g/L提高至2.199-2.931g/L,可满足每代香花槐试管苗生长25-35 d期间对钾的需求.将培养基中6-BA的含量降至0.4 mg/L,并采用合适的组培容器,在连续培养2、3代后,可将超度含水态苗的发生频率控制在10％以下.在6 mo内生产100万株香花槐组培移栽苗.

香花槐花器官的组织培养及植株再生研究

采用香花槐的花器官做外植体,进行组织培养和植株再生系统的研究。结果表明:2,4-D对于香花槐愈伤诱导的启动是必需的,而多种激素配比会使诱导率提高;选择浓度为0.3～0.5mg/L的BA和浓度为0.1mg/L的NAA配合使用,能使花药愈伤达到较高分化率;1/2MS+IBA0.05mg/L和1/2MS+IBA1.0mg/L的诱导组培苗生根效果较好。

红花槐花药培养最适取材时期及选蕾标准

【目的】确定红花槐花药离体培养的最适宜取样时期及其相应的花器官形态特征判断标准。【方法】采用小孢子染色压片观察、花器官形态特征观测和花药离体培养试验,研究红花槐花药小孢子发育阶段,探讨小孢子发育阶段与花器官形态特征及花药愈伤组织诱导率的关系。【结果】1)小孢子发育过程可分为四分体、单核及二细胞花粉3个时期,这3个时期之间具有明显的细胞学特征差异,其中单核时期又分为单核早中期和单核靠边期。2)小孢子单核时期(单核早中期及单核靠边期)花药适宜离体培养,其中单核靠边期愈伤组织诱导率高达(77.05±1.56)%,为红花槐花药离体培养的最佳时期。3)在单核靠边期,花蕾纵径介于10.01～12.20 mm、花冠与花萼的长度比>1/4～≤2/5。同时,小花花萼上部为红色,白色花冠从花萼中露出且顶部开始变为粉红色,花序大而松散,小花间距离较大。【结论】红花槐花药离体培养最适取材时期为小孢子单核靠边期,并可通过小孢子与花器官形态特征的对应关系进行取材。

香花槐的组织培养研究

对香花槐进行组织培养试验,结果显示:外植体诱导培养基采用MS+BA1.0 mg/L+NAA0.05 mg/L,可获得70%的萌发率;继代培养基采用MS+BA0.5 mg/L+NAA0.04mg/L,增殖系数和生长系数都较高;生根培养基为大量元素减半的MS+NAA0.5mg/L,其中蔗糖15g/L,生根率达100%。

香花槐引种栽培技术试验初报

安徽省林业科学研究院2001年从中国林业科学院香花槐研究中心引进1 a生香花槐苗,经过几年的引种栽培试验,证明其适合安徽省各地区栽培,发展前景可观。

香花槐的组织培养与快速繁殖

试验分别对香花槐的腋芽诱导,继代增值培养及无菌苗生根培养和愈伤组织分化做了初步研究,研究结果表明:最佳诱导培养基为MS+BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L;最佳增值培养基为MS+BA0.8mg/L+NAA0.3mg/L;当最佳生根培养基为MS+IBA0.05mg/L;在愈伤组织分化的过程中,培养基MS+BA0.5mg/L+NAA0.05mg/L分化效果相对较好。

多效唑对香花槐试管苗生长及移栽的影响

以MS为基本培养基,添加不同浓度的多效唑进行香花槐试管苗的继代培养,研究了多效唑对香花槐试管苗生长及移栽的影响。结果表明,多效唑可抑制香花槐试管苗的生长,随浓度的增加香花槐试管苗的嫩梢长度和繁殖系数逐渐降低。在继代培养时,培养基中加入0.1-1.5 mg/L多效唑对壮苗有利,当多效唑浓度超过2.0 mg/L时,在常温下能达到种质保存的目的。生根香花槐试管苗用多效唑处理后能明显提高根系活力和移栽成活率,以浓度为4.0 mg/L的处理移栽成活率最高,达90%以上。

均匀设计在香花槐组织培养中的应用

采用均匀设计,考察不同基本培养基,蔗糖的浓度,以及不同激素种类、浓度和组合对香花槐茎段腋芽诱导的影响。试验结果表明:诱导茎段腋芽的最适培养基为“MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.01mg/L+蔗糖60g/L”。

香花槐组织培养研究现状

香花槐是一种耐旱树种,在生产中存在受季节限制、繁殖效率低的问题,采用组织培养可克服这些缺点。为优化培养体系,综述各阶段研究方法和实验现状,重点分析组织培养过程中无菌体系的建立、继代培养、生根成苗、试管苗移栽主要问题和影响因素。