刺槐花的化学成分研究

分析测定了刺槐花的营养成分。结果表明,刺槐花含有较丰富的蛋白质和微量元素,可作为食品或饲料添加剂。从刺槐花中分离出黄酮类化合物(Ⅰ),经紫外光谱、红外光谱和质谱分析鉴定为刺槐苷。刺槐苷是一种重要的生物活性物质,具有一定的开发和利用价值。

不同采收期刺槐花中刺槐苷和鼠李糖刺槐苷的测定

目的建立测定刺槐花中刺槐苷和鼠李糖刺槐苷(山柰酚-7-O-α-L-吡喃鼠李糖苷)的方法,并测定12个产地的花蕾、初开花及开放花中刺槐苷和鼠李糖刺槐苷。方法采用高效液相法测定,Agilent TC-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以甲醇(A)-0.3%磷酸溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0～5 min、20%～32%A;5～25 min、32%～45%A;25～30 min、45%～68%A;30～40 min、68%～80%A);体积流量为1 mL/min;检测波长为349nm;柱温为35℃。结果采用SPSS Statistics 17.0统计软件进行统计分析,测得刺槐苷在花蕾的平均质量分数为2.298%±0.316 4%、初开花为1.924%±0.373 4%、开放花为1.259%±0.321 3%;鼠李糖刺槐苷在花蕾的平均质量分数为0.067 5%±0.031 42%、初开花为0.080 51%±0.041 08%、开放花为0.093 78%±0.025 20%。结论本方法操作简便易行,可用于控制刺槐花药材的质量;采收期应在花蕾或初开期,刺槐苷和鼠李糠刺槐苷含有量较高。

刺槐素调控NF-κB/NFATc1信号轴抑制破骨细胞分化的机制研究

目的探讨刺槐素对破骨细胞分化的影响及机制。方法通过细胞计数试剂盒-8法评估刺槐素对小鼠骨髓来源单核巨噬细胞(BMMs)增殖活性的影响,采用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色评估刺槐素对BMMs破骨分化诱导的影响,采用破骨细胞伪足小体免疫荧光染色研究刺槐素对破骨分化过程中伪足小体形成的影响,并采用qRT-PCR法验证刺槐素处理下BMMs破骨分化过程中核心转录因子活化T-细胞核因子1(NFATc1)和相关特征基因在转录水平的变化。最后通过Western blot法检测刺槐素对NF-κB受体活化因子配体(RANKL)刺激下NF-κB活性及破骨分化过程中NFATc1表达的影响。结果2μmol/L及以下浓度刺槐素对BMMs无明显毒性。刺槐素可浓度依赖性地抑制BMMs在RANKL刺激下破骨分化过程,在2μmol/L刺槐素干预下几乎无成熟破骨细胞生成。与此同时,刺槐素可显著抑制破骨细胞分化过程中伪足小体的形成。刺槐素可抑制破骨细胞分化过程中下游耐酒石酸酸性磷酸酶(ACP5)、破骨细胞相关受体(OSCAR)、组织蛋白酶K(CTSK)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)等特征基因的转录。在机制上,刺槐素可通过抑制RANKL刺激下BMMs内NF-κB信号通路p65磷酸化激活,进而下调NFATc1、MMP-9的表达,达到抑制破骨细胞分化的作用。结论刺槐素可通过下调NF-κB/NFATc1信号轴抑制BMMs破骨分化过程。

利用非靶向和靶向代谢组学鉴别荆条蜜、枣花蜜和洋槐蜜

蜂蜜品种的鉴别是确定蜂蜜独有特性、促进优质优价的有效手段,在前期已经建立特色蜂蜜鉴别和功能识别可靠模型的基础上,本文建立了同时鉴别荆条蜜、枣花蜜和洋槐蜜的方法。采用超高效液相色谱-飞行时间质谱(UHPLC/Q-Tof-MS)技术对荆条蜜、枣花蜜和洋槐蜜3种大宗蜂蜜进行了非靶向代谢组学分析,结合正交偏最小二乘判别分析(orthogonal partial least-squares discrimination analysis,OPLS-DA)对该3种蜂蜜进行差异比较,发现咖啡酸、4-羟基喹啉和刺槐苷对3种蜂蜜的鉴别起到关键作用。采用超高效液相色谱—三重四极杆质谱(UHPLC-QqQ-MS/MS)技术建立了同时测定蜂蜜中咖啡酸、4-羟基喹啉和刺槐苷的方法,该方法简便快速、准确可靠。分析北京及周边地区荆条蜜、枣花蜜和洋槐蜜样品中的咖啡酸、4-羟基喹啉和刺槐苷的含量,确定咖啡酸、4-羟基喹啉和刺槐苷可分别作为荆条蜜、枣花蜜和洋槐蜜的标志性成分,其阈值分别为1.6mg/kg、1.0mg/kg和0.4mg/kg。

香青兰中总黄酮和单体的含量测定

目的:考察香青兰中单体(刺槐素-7-o-β-D-葡萄糖苷)、总黄酮的含量。方法:采用紫外分光光度法(UV)测定总黄酮含量;采用高效液相色谱法(HPLC)测定单体含量,RP-C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水(26∶74),流速为1.1 mL·min-1,柱温室温,检测波长为326 nm。结果:单体(刺槐素-7-o-β-D-葡萄糖苷)含量为0.33%,回收率为98.62%;总黄酮含量为1.90%,回收率为97.59%。结论:所建方法准确、简便,为科学地评价香青兰药材的质量提供依据。

响应面法优选刺槐花中刺槐苷提取工艺

目的:优化刺槐花中刺槐苷的提取工艺。方法:根据Box-Benhnken中心组合设计原理,采用响应面分析法优化乙醇体积分数、液料比、浸提时间及提取次数4个自变量对刺槐苷得率的影响,利用SAS 9.2软件对试验数据进行回归分析。结果:最佳提取工艺为加23倍量76%乙醇浸提2次,每次60 min。刺槐苷平均得率达1.834%,转移率86.88%。结论:优选的工艺条件稳定可行,为刺槐花中刺槐苷的提取提供实验依据。

白花败酱草的化学成分研究

目的对白花败酱草Patrinia villosa的化学成分进行研究。方法通过大孔吸附树脂、Sephadex LH-20、反相HPLC等多种色谱方法分离纯化,根据理化性质和波谱数据鉴定化合物结构。结果从白花败酱草干燥全草的70%乙醇提取物中分离得到了14个化合物,分别鉴定为异地芰普内酯(1)、citroside A(2)、grasshopper ketone(3)、(E)-4-hydroxy-3,3,5-trimethy1-4-(3-oxobut-1-en-1-yl)-cyclohexan-1-one(4)、bluemenol A(5)、pubinernoid A(6)、刺槐素(7)、葛根素(8)、5-(1′-hydroxyethyl)-methyl nicotinate(9)、2-[4-(3-hydroxypropyl)-2-methoxyphenoxy]-propane-1,3-diol(10)、1-O-(β-Dglucosyl)-2-[2-methoxy-4-(3-hydroxypropyl)-phenoxy]-propan-3-ol(11)、二氢芥子醇(12)、3,5-dimethoxyl-4-hydroxylphenylpropanol-9-O-β-D-glucopyranoside(13)、2-phenylethyl-α-L-arabinopyranosyl-(1″→6′)-β-D-glucopyranoside(14)。结论所有化合物均为首次从败酱属植物中分离得到。

逍遥散与文拉法辛联用抗抑郁的网络药理学机制研究

目的运用网络药理学技术探讨逍遥散与文拉法辛联用抗抑郁的作用机制。方法通过TCMSP、PubChem、OMIM、GeneCards以及UniProt等数据库获得逍遥散和文拉法辛治疗抑郁症的作用靶点;利用STRING网站得到蛋白互作网络;并通过Metascape网站对潜在作用靶点进行富集分析;使用Cytoscape软件绘制"靶点-成分-通路"可视化网络图。结果逍遥散主要通过芍药苷、刺槐素、儿茶素、槲皮素等化学成分和文拉法辛联合作用发挥抗抑郁作用。逍遥散和文拉法辛治疗抑郁症的相关靶点共208个,主要为酪氨酸蛋白激酶(SRC)、信号转导和转录激活器3(STAT3)、转录因子AP-1(JUN)、丝裂原活化蛋白激酶3(MAPK3)等。这些主要靶点作用于糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路(AGE-RAGE signaling pathway in diabetic complications)、癌症通路(pathways in cancer)等43条通路,调节对受损的应答(response to wounding)、对无机物的应答(response to inorganic substance)以及细胞成分运动的正向调节(positive regulation of cellular component movement)、血液循环(blood circulation)和有机羟基化合物代谢过程(organic hydroxy compound metabolic process)等生物学过程发挥抗抑郁作用。结论逍遥散与文拉法辛联用通过多靶点、多通路发挥抗抑郁作用,利用网络药理学预测中西药联合治疗疾病的作用机制值得深入探讨。

基于网络药理学和分子对接研究黄芩治疗白癜风的作用机制

目的利用网络药理学方法研究黄芩治疗白癜风的作用靶点和机制。方法使用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)筛选得到黄芩中的活性成分及其作用靶点,通过SwissTargetPrediction数据库检索补充各个活性成分的作用靶点;通过OMIM、GeneCards数据库获取白癜风的相关靶点,与活性成分作用靶点取交集;将黄芩活性成分和白癜风的交集靶点导入String数据库构建靶点间的蛋白相互作用(PPI)网络;利用Cytoscape 3.9.1软件,构建"黄芩-活性成分-白癜风靶点"网络并筛选核心靶点;使用Metascape数据库对潜在作用靶点进行基因本体论(GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析;使用AutoDockTools 1.5.7软件进行分子对接验证并使用PyMol软件对结果进行可视化处理。结果共筛选得到黄芩素、汉黄芩素、刺槐素、木蝴蝶素a、表小檗碱、去甲汉黄芩素、5,7,4'-三羟基-8-甲氧基黄酮等36个活性成分,作用于3868个潜在靶点,白癜风相关靶点1349个,黄芩-白癜风的交集靶点113个;PPI网络分析得到肿瘤蛋白P53(TP53)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(AKT1)、信号转导和转录激活因子3(STAT3)、肿瘤坏死因子(TNF)、丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)、白细胞介素-6(IL-6)、胱天蛋白酶3(CASP3)、雌激素受体(ESR1)共8个核心作用靶点;GO和KEGG富集分析显示,黄芩治疗白癜风主要涉及胰腺癌、内分泌抵抗、神经营养素信号通路、细胞凋亡、乙型肝炎、细胞衰老等信号通路。分子对接结果显示黄芩素、汉黄芩素、刺槐素、木蝴蝶素a、表小檗碱、去甲汉黄芩素、5,7,4'-三羟基-8-甲氧基黄酮7个核心成分与核心靶点具有较好的结合能。结论黄芩可能通过调控内分泌、神经、细胞衰老和凋亡以及炎症等方面发挥治疗白癜风的作用,为后续研究黄芩治疗白癜风提供参考。

藏药榜嘎中黄酮类化学成分的研究

目的:研究毛茛科乌头属植物榜嘎地上部分的黄酮类成分。方法:采用大孔吸附树脂富集,正相硅胶柱层析色谱法初分,通过葡聚糖凝胶Sephadex LH-20和半制备高压液相色谱法对各特征峰进行精制分离,根据其理化性质和NMR、MS等波谱数据鉴定化合物结构。结果:从榜嘎70%甲醇提取物中分离得到6个黄酮苷类化合物,分别鉴定为Clovin(1)、刺槐苷(2)、榜嘎苷A(3)、榜嘎苷B(4)、榜嘎苷C(5)、榜嘎苷D(6)。结论:化合物1、2为首次从榜嘎中分离得到,化合物3~6为新黄酮类化合物。