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H9N2禽流感病毒PB2蛋白627位点突变对小鼠肺脏RIP3、Slit2和Robo4表达和分布的影响
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作者 许丹 邓志乐 +3 位作者 刘瑞东 胡岂铭 宁章勇 范小龙 《广东畜牧兽医科技》 2023年第5期53-58,共6页
PB2蛋白627位点被证实是决定甲型流感病毒宿主范围和致病性的关键因子,为深入探究H9N2禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)及其PB2蛋白627位点突变株对BALB/C小鼠肺脏RIP3、Slit2和Robo4基因表达和组织分布的影响,该研究使用H9N2 AIV... PB2蛋白627位点被证实是决定甲型流感病毒宿主范围和致病性的关键因子,为深入探究H9N2禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)及其PB2蛋白627位点突变株对BALB/C小鼠肺脏RIP3、Slit2和Robo4基因表达和组织分布的影响,该研究使用H9N2 AIV(V_(K627))和该毒株PB2蛋白627位点突变株(rV_(K627E))感染BALB/C小鼠,分别在攻毒后第1、3、5、6 d采集肺组织,通过qRT⁃PCR和免疫组织化学技术对RIP3、Slit2和Robo4基因在小鼠肺组织中的特异性表达和分布进行研究。结果显示,攻毒组小鼠肺脏RIP3的表达量与对照组相比显著上升,同时VK627组RIP3的表达量显著高于rV_(K627E)组;Slit2和Robo4的表达量在攻毒后第1 d明显低于对照组,之后rVK627E组的表达量与对照组和VK627E组相比显著上升。免疫组织化学检测结果显示,RIP3蛋白主要分布在小鼠肺泡壁上皮细胞以及肺动脉血管内皮细胞,呈弱阳性表达,而攻毒组RIP3蛋白在气管粘膜下层细胞也有中至强阳性表达;Slit2蛋白在对照组和rVK627E组小鼠的肺泡上皮细胞以及气管粘膜上皮细胞中呈现中强阳性表达,而在VK627组中呈现弱阳性表达。Robo4蛋白的分布和表达情况与Slit2蛋白相似。综上所述,H9N2 AIVs感染小鼠后,会显著影响RIP3和Slit2/Robo4的表达和分布,且其表达和分布与H9N2 AIVs对小鼠的致病性密切相关;PB2蛋白627位点的突变在H9N2 AIVs影响RIP3、Slit2和Robo4表达和分布中起着重要作用。该研究结果将为进一步探究H9N2 AIVs及其点突变毒株介导宿主病理发生的分子机制和抗炎策略的选择提供基础数据。 展开更多
关键词 H9N2禽流感病毒 RIP3 SLIT2 robo4 表达分布 组织学分布
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ROBO4/ARF6信号通路在糖尿病肾病患者肾小球组织的表达及意义 被引量:6
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作者 官涛 郑科 +3 位作者 刘军辉 祝旭飞 张均 黄云剑 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期267-272,共6页
目的探讨不同病理分期糖尿病肾病(DKD)患者肾小球中ROBO4/ARF6的表达情况及其与肾小球内皮细胞(MGECs)通透性的相关性。方法收集30例DKD患者肾穿刺活检标本,参考Tervaert病理分期将DKD肾组织分为早、中、晚期各10例,以10例正常肾组织标... 目的探讨不同病理分期糖尿病肾病(DKD)患者肾小球中ROBO4/ARF6的表达情况及其与肾小球内皮细胞(MGECs)通透性的相关性。方法收集30例DKD患者肾穿刺活检标本,参考Tervaert病理分期将DKD肾组织分为早、中、晚期各10例,以10例正常肾组织标本作为对照。采用免疫组化法检测ROBO4/ARF6在MGECs中的表达,分析其与蛋白尿、血清肌酐、肾小球滤过率(e GFR)、糖化血红蛋白的相关性。结果正常MGECs中有丰富的ROBO4表达,而ARF6表达较少。DKD组ROBO4主要在MGECs中表达,而ARF6在MGECs和肾小管上皮细胞中均有表达。与正常对照组相比,DKD组ROBO4染色阳性强度明显降低(P<0.05),且随病理分期的增加阳性强度逐渐减弱;而ARF6阳性强度随DKD病理分期的增加逐渐增高(P<0.05)。ROBO4在MGECs中的阳性强度与24h蛋白尿呈负相关(r=–0.840,P<0.01),与血清肌酐呈负相关(r=–0.689,P<0.01),与糖化血红蛋白呈负相关(r=–0.660,P<0.01),与e GFR呈正相关(r=0.589,P<0.01);ARF6在MGECs中的染色强度与血清肌酐、e GFR无相关性(P>0.05),与24h蛋白尿呈正相关(r=0.603,P<0.01),与糖化血红蛋白呈正相关(r=0.582,P<0.01)。结论 DKD患者MGECs中存在ROBO4低表达和ARF6高表达,提示ROBO4/ARF6信号通路可能参与了DKD肾小球内皮、血管的病理损伤和尿蛋白的进展。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 肾小球 内皮细胞 robo4 ARF6 免疫组织化学
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Robo4在脑缺血再灌注损伤大鼠小胶质细胞极化中的作用及其机制研究
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作者 曹天然 刘青芳 +1 位作者 潘美民 陈勇 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第18期36-42,共7页
目的探讨环形交叉轴突导向受体同源物4(Robo4)蛋白对脑缺血再灌注损伤(CIRI)后小胶质细胞M1/M2极化的影响。方法选取60只SD大鼠,随机分为假手术(Sham)组、大脑中动脉短暂性闭塞/再灌注(tMCAO/R)组、tMCAO/R联合过表达Robo4慢病毒阴性载... 目的探讨环形交叉轴突导向受体同源物4(Robo4)蛋白对脑缺血再灌注损伤(CIRI)后小胶质细胞M1/M2极化的影响。方法选取60只SD大鼠,随机分为假手术(Sham)组、大脑中动脉短暂性闭塞/再灌注(tMCAO/R)组、tMCAO/R联合过表达Robo4慢病毒阴性载体(tMCAO/R+Lv-scramble)组、tMCAO/R联合过表达Robo4慢病毒载体(tMCAO/R+Lv-Robo4)组,每组15只。tMCAO/R+Lv-scramble组及tMCAO/R+Lv-Robo4组在复制tMCAO前7 d于脑室内注射慢病毒载体。Longa评分评估神经功能缺损,TTC法检测脑梗死面积,实时荧光定量聚合酶链反应及Western blotting检测大脑组织中Robo4的表达,Western blotting检测M1小胶质细胞标志物(iNOS和CD86)、M2小胶质细胞标志物(Arg-1和CD206)和Notch通路蛋白(Notch-1、Hes1和Hes5)表达。酶联免疫吸附试验检测TNF-α、IL-1β、IL-10和TGF-β水平。结果tMCAO/R组Longa评分较Sham组高(P<0.05),tMCAO/R+Lv-scramble组较tMCAO/R+Lv-Robo4组高(P<0.05)。tMACO/R组Robo4 mRNA和蛋白相对表达量较Sham组低(P<0.05),tMCAO/R+Lv-Robo4组较tMCAO/R+Lv-scramble组高(P<0.05)。tMACO/R组脑梗死面积较Sham组大(P<0.05),tMCAO/R+Lv-Robo4组较tMCAO/R+Lv-scramble组小(P<0.05)。tMACO/R组较Sham组高(P<0.05),tMCAO/R+Lv-Robo4组iNOS、CD86较tMCAO/R+Lv-scramble组低,Arg-1、CD206较tMCAO/R+Lv-scramble组高(P<0.05)。tMACO/R组较Sham组高(P<0.05),tMCAO/R+Lv-Robo4组TNF-α、IL-1β较tMCAO/R+Lvscramble组低,IL-10、TGF-β较tMCAO/R+Lv-scramble组高(P<0.05)。tMACO/R组Notch-1、Hes1和Hes5相对表达量较Sham组高,tMCAO/R+Lv-Robo4组较tMCAO/R+Lv-scramble组低(P<0.05)。结论Robo4可调控CIRI后小胶质细胞极化向M2表型转移,并调控Notch信号通路,缓解CIRI。 展开更多
关键词 脑缺血再灌注损伤 环形交叉轴突导向受体同源物4 NOTCH信号通路 M1/M2极化 小胶质细胞
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ROBO4在上皮性卵巢癌组织和血清中的表达及临床意义 被引量:3
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作者 马瑞琼 叶雪 +4 位作者 程洪艳 陈军 崔恒 魏丽惠 昌晓红 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期64-69,共6页
目的探讨ROBO4在上皮性卵巢癌组织和血清中的表达及其在卵巢癌发生发展中的作用。方法采用免疫组织化学和反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测110例卵巢癌,54例卵巢良性肿瘤,40例正常卵巢组织中ROBO4蛋白和ROBO4mRNA表达,比较其表达与... 目的探讨ROBO4在上皮性卵巢癌组织和血清中的表达及其在卵巢癌发生发展中的作用。方法采用免疫组织化学和反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测110例卵巢癌,54例卵巢良性肿瘤,40例正常卵巢组织中ROBO4蛋白和ROBO4mRNA表达,比较其表达与卵巢癌临床病理特征的关系;并采用ELISA检测卵巢癌、卵巢良性肿瘤和正常人血清中ROBO4表达水平。结果卵巢癌组织中ROBO4蛋白和ROBO4mRNA表达显著低于正常对照组和卵巢良性肿瘤组(P<0.05);上皮性卵巢癌血清中ROBO4的表达明显低于卵巢良性肿瘤和正常人(P<0.05);卵巢癌组织中ROBO4表达降低与卵巢癌FIGO分期、淋巴结转移、大网膜转移和腹水相关(P<0.05);卵巢癌组织中ROBO4表达与年龄、组织学类型和病理分级无相关性。卵巢癌患者血清ROBO4、CA125的相关分析显示,两者之间无相关性。结论在卵巢癌发生过程中ROBO4表达降低起到重要作用,表达异常的ROBO4与卵巢癌的侵袭转移能力相关,并与卵巢癌的临床病理学特征有明显的相关性。 展开更多
关键词 卵巢癌 robo4 免疫组织化学 反转录聚合酶链反应
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Robo4在实体肿瘤血管新生中的表达及其意义 被引量:2
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作者 张波 吴国豪 +1 位作者 吴肇汉 秦新裕 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期585-589,共5页
目的了解引导神经发育的Robo4基因在实体肿瘤血管新生中的表达,证实Robo4是肿瘤血管新生特异性标志物(tumor endothelial marker,TEM)。方法采用RT-PCR技术检测多种不同细胞中Robo4 mRNA的表达情况;采用原位杂交和免疫组化染色检测多种... 目的了解引导神经发育的Robo4基因在实体肿瘤血管新生中的表达,证实Robo4是肿瘤血管新生特异性标志物(tumor endothelial marker,TEM)。方法采用RT-PCR技术检测多种不同细胞中Robo4 mRNA的表达情况;采用原位杂交和免疫组化染色检测多种肿瘤组织及其对应正常组织的相邻组织切片中Robo4和CD31在微血管的表达情况。结果RT-PCR显示在包括肿瘤细胞和正常细胞的9种受检细胞株中,Robo4 mRNA特异性表达于血管内皮细胞HUVEC和HMVEC中;Robo4在各种正常组织的微血管中表达极其微弱,而在肿瘤组织的微血管上显著表达;CD31在正常和肿瘤组织的微血管上均显著表达。结论Robo4仅特异性表达于肿瘤血管新生的部位,是肿瘤血管新生标志物。 展开更多
关键词 robo4 血管新生 恶性肿瘤
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Slit3/Robo4信号通道对血管新生作用的研究进展 被引量:2
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作者 刘小艳 王浩宇 刘涛 《西部医学》 2013年第11期1748-1750,1753,共4页
Slit蛋白是一种在进化上高度保守的分泌型糖蛋白,其通过与跨膜蛋白受体Robo结合调节神经元前体细胞定向迁移、神经轴突的定向生长和促进轴突发芽。Slit/Robo信号通道还对肿瘤转移、血管生成、心脏形态发生等多种生命活动具有调节作用。R... Slit蛋白是一种在进化上高度保守的分泌型糖蛋白,其通过与跨膜蛋白受体Robo结合调节神经元前体细胞定向迁移、神经轴突的定向生长和促进轴突发芽。Slit/Robo信号通道还对肿瘤转移、血管生成、心脏形态发生等多种生命活动具有调节作用。Robo4特异性表达于血管内皮细胞,这意味着Robo4在血管新生中起着重要作用。但近来发现Slit3是新的血管新生活性因子,可与其配体Robo4结合促进血管内皮细胞的增殖迁移,本文就Slit3/Robo4信号通道对血管新生的作用进行综述。 展开更多
关键词 Slit3 robo4 血管内皮细胞 血管新生
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卵巢癌患者血清中ROBO4、sB7-H4含量与肿瘤病理特征的相关性研究 被引量:7
7
作者 于文亮 《海南医学院学报》 CAS 2019年第11期877-880,共4页
目的:研究卵巢癌患者血清中ROBO4、可溶性B7-H4(sB7-H4)含量与肿瘤病理特征的相关性。方法:选择本院手术切除治疗的卵巢癌患者及卵巢良性肿瘤患者,测定血清中ROBO4、sB7-H4的含量以及病灶组织中ROBO4、B7-H4、癌基因的表达量。结果:卵... 目的:研究卵巢癌患者血清中ROBO4、可溶性B7-H4(sB7-H4)含量与肿瘤病理特征的相关性。方法:选择本院手术切除治疗的卵巢癌患者及卵巢良性肿瘤患者,测定血清中ROBO4、sB7-H4的含量以及病灶组织中ROBO4、B7-H4、癌基因的表达量。结果:卵巢癌患者血清中ROBO4的含量较卵巢良性肿瘤患者显著降低,sB7-H4的含量较卵巢良性肿瘤患者显著升高;卵巢癌组织中ROBO4的mRNA表达量较卵巢良性肿瘤组织显著降低,B7-H4的mRNA表达量较卵巢良性肿瘤组织显著升高,且卵巢癌患者血清中ROBO4、sB7-H4的含量与卵巢癌组织中ROBO4、B7-H4的mRNA表达量具有正相关关系;肿瘤的FIGO分期及病理分级越高,卵巢癌患者血清中ROBO4的含量越低、sB7-H4的含量越高;卵巢癌组织中β-catenin、CyclinD1、MMP9的mRNA表达量与卵巢良性肿瘤组织比较显著升高且与ROBO4呈负相关、与sB7-H4呈正相关,PTEN、E-cadherin的mRNA表达量与卵巢良性肿瘤组织比较显著降低且与ROBO4呈正相关、与sB7-H4呈负相关。结论:卵巢癌患者血清中ROBO4、sB7-H4含量的变化与肿瘤临床病理分期改变、癌基因异常表达均密切相关。 展开更多
关键词 卵巢癌 robo4 可溶性B7-H4 癌基因
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Robo4敲除促进大鼠缺血心肌微血管生成 被引量:1
8
作者 周蓉芳 毛建华 +2 位作者 寿晓玲 王雁 王伯忠 《心脑血管病防治》 2019年第1期61-63,共3页
目的探讨Robo4敲除对大鼠急性心肌梗死后缺血心肌微血管生成的影响。方法采用结扎左冠状动脉主干方法复制大鼠急性心肌梗死模型,分为Robo4敲除大鼠假手术组(Robo4 sham)、SD大鼠假手术组(SD sham)、Robo4敲除大鼠心肌梗死组(Robo4 MI)... 目的探讨Robo4敲除对大鼠急性心肌梗死后缺血心肌微血管生成的影响。方法采用结扎左冠状动脉主干方法复制大鼠急性心肌梗死模型,分为Robo4敲除大鼠假手术组(Robo4 sham)、SD大鼠假手术组(SD sham)、Robo4敲除大鼠心肌梗死组(Robo4 MI)和SD大鼠心肌梗死组(SD MI)。14天后提取大鼠MI边缘区心肌组织,VWF8免疫组织化学染色,检测微血管生成密度(MVD)。结果两假手术组间MI边缘区MVD无明显变化[(2.27±0.53)个比(1.89±0.34)个,P>0.05]。与SD sham组相比,SD MI组MI边缘区MVD显著增加[(16.63±3.13)个比(1.89±0.34)个,P<0.01]。与SD MI组相比,Robo4 MI组MI边缘区MVD显著增加[(22.49±3.05)个比(16.63±3.13)个,P<0.05]。结论大鼠急性心肌梗死14天后缺血心肌微血管生成增加,且Robo4敲除可以促进缺血心肌微血管生成。 展开更多
关键词 robo4 急性心肌梗死 微血管生成
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Slit3/Robo4在大鼠角膜新生血管中的表达
9
作者 肖诗艺 王莉 +3 位作者 陈仁典 吴进 张越骊 何莉 《国际眼科杂志》 CAS 2014年第7期1190-1192,共3页
目的:通过研究神经轴突导向因子Slit3及Robo4受体在大鼠正常角膜与新生血管化角膜中的差异性表达,探讨其在角膜新生血管( corneal neovascularization,CNV)形成中的作用。 方法:采用角膜微囊袋法建立以碱性成纤维细胞生长因子( b... 目的:通过研究神经轴突导向因子Slit3及Robo4受体在大鼠正常角膜与新生血管化角膜中的差异性表达,探讨其在角膜新生血管( corneal neovascularization,CNV)形成中的作用。 方法:采用角膜微囊袋法建立以碱性成纤维细胞生长因子( bFGF)诱导的大鼠CNV模型,采用眼前段照相,免疫组化染色、彩色图像分析系统分别计算1,4,7,10,14d共5个时间点的CNV面积和Slit3, Robo4的平均光密度值。结果:Slit3及Robo4在新生血管化角膜中表达增加,在第7 d达到最高,且二者的表达水平与 CNV 的面积除第1 d外,在其他各时间点均呈正相关(r=0.84~0.91,P〈0.05)。结论:Slit3/Robo4与CNV形成明显相关,其可能成为抑制CNV的重要靶点。 展开更多
关键词 神经轴突导向因子 Slit3 robo4 角膜新生血管 微囊袋法
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小鼠主动脉平滑肌细胞Robo4膜蛋白的提取
10
作者 倪伟 刘涛 +5 位作者 王浩宇 刘小艳 刘丽华 陈桂秀 白亦光 李健 《检验医学与临床》 CAS 2013年第22期2968-2969,2972,共3页
目的优化小鼠主动脉平滑肌细胞膜蛋白提取方法,获得高纯度的Robo4膜蛋白。方法高速离心法选择性地分离提取总膜蛋白,BCA法测定总膜蛋白含量,Western-Blot检测目的蛋白条带。结果成功提取总膜蛋白,总膜蛋白浓度达1.47μg/μL,Western-Blo... 目的优化小鼠主动脉平滑肌细胞膜蛋白提取方法,获得高纯度的Robo4膜蛋白。方法高速离心法选择性地分离提取总膜蛋白,BCA法测定总膜蛋白含量,Western-Blot检测目的蛋白条带。结果成功提取总膜蛋白,总膜蛋白浓度达1.47μg/μL,Western-Blot检测出Robo4膜蛋白条带。结论该提取方法简单、可靠、快速,获得的膜蛋白纯度高,可用于Western-Blot后续试验。 展开更多
关键词 主动脉 平滑肌细胞 robo4 膜蛋白
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Slit3/Robo4信号通路功能研究进展
11
作者 何蔺 任丽蓉 +1 位作者 刘涛 王浩宇 《西部医学》 2015年第10期1598-1600,F0003,共4页
Slit是一种高度保守的分泌型细胞外基质蛋白,Robo作为Slit蛋白的单次跨膜受体,二者相互作用共同调节神经细胞和非神经细胞的生长发育。Slit3是近年发现的一种强有力的促血管生成因子,与其受体Robo4结合参与血管新生、器官发育、肿瘤发... Slit是一种高度保守的分泌型细胞外基质蛋白,Robo作为Slit蛋白的单次跨膜受体,二者相互作用共同调节神经细胞和非神经细胞的生长发育。Slit3是近年发现的一种强有力的促血管生成因子,与其受体Robo4结合参与血管新生、器官发育、肿瘤发生、生殖系统和乳腺调节及人类干细胞工程等过程,该文就Slit3/Robo4的最新研究现状作一综述。 展开更多
关键词 Slit3 robo4 血管新生 器官发育
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脂多糖对人脐静脉内皮细胞Robo4表达的影响
12
作者 王琳 郑荣秀 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第8期1230-1232,共3页
目的:观察不同浓度脂多糖(LPS)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)Robo4受体表达的作用。方法:体外培养HUVECs,分正常对照组和2个浓度LPS组(正常对照组基础上分别加入终浓度为10μg/m L和100μg/m L LPS),每组重复实验6次。免疫荧光染色及Weste... 目的:观察不同浓度脂多糖(LPS)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)Robo4受体表达的作用。方法:体外培养HUVECs,分正常对照组和2个浓度LPS组(正常对照组基础上分别加入终浓度为10μg/m L和100μg/m L LPS),每组重复实验6次。免疫荧光染色及Western blot检测各组细胞Robo4蛋白表达,RT-PCR检测Robo4 m RNA表达。结果:高剂量LPS组HUVECs Robo4蛋白与m RNA表达分别为(0.49±0.08)和(0.23±0.08),较正常对照组(1.35±0.15)和(0.97±0.17)明显下降(P<0.05);低剂量LPS组Robo4蛋白与m RNA表达分别为(0.13±0.13)和(0.94±0.14),较正常对照组均有下降,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论:高剂量100μg/m L LPS可下调HUVECs Robo4的表达。 展开更多
关键词 脂多糖 人脐静脉内皮细胞 Roundabout4(robo4)
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Robo4敲除对急性心肌梗死大鼠心功能的影响
13
作者 周蓉芳 毛建华 +2 位作者 寿晓玲 王雁 王伯忠 《现代实用医学》 2019年第2期152-154,共3页
目的探讨Robo4敲除对大鼠急性心肌梗死后心功能的影响。方法采用结扎左冠状动脉主干方法复制大鼠急性心肌梗死模型,分为Robo4敲除大鼠假手术组(Robo4 sham)、SD大鼠假手术组(SD sham)、Robo4敲除大鼠心肌梗死组(Robo4 MI)和SD大鼠心肌... 目的探讨Robo4敲除对大鼠急性心肌梗死后心功能的影响。方法采用结扎左冠状动脉主干方法复制大鼠急性心肌梗死模型,分为Robo4敲除大鼠假手术组(Robo4 sham)、SD大鼠假手术组(SD sham)、Robo4敲除大鼠心肌梗死组(Robo4 MI)和SD大鼠心肌梗死组(SD MI)。14 d后通过右颈总动脉插管法分析大鼠心功能的变化。结果两组假手术组相比,心功能无明显变化。与SD sham组相比,SD MI组左室舒张末压(LVEDP)显著升高,左室最大收缩速率(+dp/dtmax)和左室最大舒张速率(-dp/dtmax)显著下降。与SD MI组相比,Robo4 MI组LVEDP显著下降,+dp/dtmax、-dp/dtmax显著升高。结论心肌梗死14 d后大鼠心功能下降,但Robo4敲除可以改善大鼠心功能。 展开更多
关键词 心肌梗死 心功能 robo4
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ROBO4过表达抑制高糖条件下人肾小球内皮细胞高通透性的体外研究 被引量:2
14
作者 唐璐瑶 刘军辉 +2 位作者 候世会 官涛 黄云剑 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期190-195,共6页
目的探讨ROBO4基因过表达对高糖诱导的人肾小球内皮细胞(HRGEC)高通透性的影响。方法体外培养HRGEC,以携带ROBO4基因的重组慢病毒载体感染HRGEC获得过表达ROBO4的HRGEC。将细胞分为低糖培养组和高糖培养组,采用Western blotting检测ROBO... 目的探讨ROBO4基因过表达对高糖诱导的人肾小球内皮细胞(HRGEC)高通透性的影响。方法体外培养HRGEC,以携带ROBO4基因的重组慢病毒载体感染HRGEC获得过表达ROBO4的HRGEC。将细胞分为低糖培养组和高糖培养组,采用Western blotting检测ROBO4和ARF6蛋白的表达,异硫氰酸荧光素右旋糖酐(FITC-Dextran)法检测HRGEC的通透性,CCK-8法测定细胞存活率。结果慢病毒在HRGEC中的72h转染率达80%,与空载体组相比ROBO4转染组HRGEC细胞的ROBO4蛋白明显过表达(P<0.05),CCK8检测显示慢病毒转染后HRGEC细胞活性不受影响。与低糖组相比,高糖组ROBO4蛋白表达在12h时点明显增高(P<0.05),24h回落,72h下降最为明显(P<0.05),而ARF6蛋白的表达在12h开始明显升高,72h时升高最为明显(P<0.05)。高糖组FITC-Dextran层HRGEC屏障的通透性在24h开始逐步升高,72h时升高最为明显(P<0.05);与空载体组相比,ROBO4过表达可显著抑制高糖条件下ARF6的表达及降低体外单层HRGEC屏障的FITC-Dextran通透性。结论 ROBO4过表达可降低高糖条件下HRGEC的通透性,激活ROBO4有望成为治疗糖尿病肾病内皮功能障碍的新方向。 展开更多
关键词 robo4 ARF6 通透性 基因过表达 糖尿病肾病
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Slit2/Robo4/Rho信号通路在野百合碱诱导的大鼠肝窦阻塞综合征中的变化及意义 被引量:2
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作者 徐魁 任晓非 宋育林 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2021年第11期1756-1761,共6页
目的探讨Slit2/Robo4/Rho信号通路在野百合碱(MCT)导致肝窦阻塞综合征(HSOS)发病中的作用。方法34只SD大鼠随机分为正常对照组和实验组。实验组大鼠给予MCT灌胃(160 mg/kg),分批在造模后第1、2、4天随机处死,正常组第4天处死。收集血液... 目的探讨Slit2/Robo4/Rho信号通路在野百合碱(MCT)导致肝窦阻塞综合征(HSOS)发病中的作用。方法34只SD大鼠随机分为正常对照组和实验组。实验组大鼠给予MCT灌胃(160 mg/kg),分批在造模后第1、2、4天随机处死,正常组第4天处死。收集血液样本和肝组织,测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平,观察肝脏组织学变化,测定肝脏α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达和肝脏Slit2、Robo4、RhoA、Rac1、Cdc42及基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9 mRNA和蛋白的变化。结果大鼠单次灌胃MCT(160 mg/kg)后,第1天肝窦淤血、肝细胞变性和中央静脉内皮损伤;第2天肝窦淤血扩张明显;第4天肝脏病变加重,可见窦周纤维化。与正常对照组比较,各实验组大鼠的肝指数均升高(P <0.05),实验组第2、4天AST水平升高(P <0.01),第2天ALT升高(P <0.01)。与正常对照比较,各实验组α-SMA表达升高(P <0.01)。各实验组Slit2和Robo4 mRNA和蛋白低于正常对照(P <0.01),随着给药时间的延长,实验组大鼠Slit2和Robo4 mRNA和蛋白的表达逐渐降低(P <0.05);而各实验组RhoA、Rac1、Cdc42及MMP-2、MMP-9 mRNA和蛋白高于正常对照组,且表达逐步升高(P <0.05)。结论单次MCT摄入可使大鼠发生HSOS,且肝损伤呈进行性加重。Slit2/Robo4/Rho信号通路、肝星状细胞激活及MMP-2、MMP-9升高可能是MCT致HSOS发生的重要作用机制之一。 展开更多
关键词 野百合碱 肝损伤 Slit2/robo4 RHO 肝窦阻塞综合征
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Slit2/Robo4信号通路在神经元迁移中的活力与凋亡影响 被引量:4
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作者 刘忠志 张正洪 《检验医学与临床》 CAS 2015年第8期1065-1067,共3页
目的探讨Slit2/Robo4信号通路在神经元迁移中的活力与凋亡影响,为阐明脑缺血后神经血管新生的机制提供理论和实验依据。方法选择成年雄性远交群(SD)大鼠,建立缺血性脑卒中动物模型,采用Western blot方法测定梗死侧与非梗死侧Slit2和Ro... 目的探讨Slit2/Robo4信号通路在神经元迁移中的活力与凋亡影响,为阐明脑缺血后神经血管新生的机制提供理论和实验依据。方法选择成年雄性远交群(SD)大鼠,建立缺血性脑卒中动物模型,采用Western blot方法测定梗死侧与非梗死侧Slit2和Robo4的表达。取原代培养10-14d的神经元种六孔板,分为加药组H2O2(100μmol/L)、对照组、H2O2(100μmol/L)+Slit2(3μg/mL)组,行MTT方法检测细胞活力与双染流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果 Western blot结果显示,梗死侧Slit2和Robo4表达均较非梗死侧明显升高,差异有统计学意义(P〈0.05)。100μmol/L H2O2处理原代培养神经元24h会导致Slit2和Robo4表达升高(P〈0.05)。MTT结果示,H2O2、H2O2+Slit2组细胞活力都有明显下降,其中,H2O2+Slit2组的细胞存活率明显高于单纯H2O2组(P〈0.05)。流式细胞学显示,H2O2+Slit2组的细胞凋亡率明显低于H2O2组,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论缺血性脑卒中有内源性Slit2/Robo4信号通路的激活,而外源性Slit2可以促进氧化应激时神经元的存活能力,抑制其凋亡作用,从而起到神经保护作用。 展开更多
关键词 Slit2/robo4信号通路 缺血性脑卒中 神经元迁移
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Slit2/Robo4信号通路,内皮祖细胞与多器官功能障碍综合征的研究进展
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作者 杜磊 徐俊 罗天航 《外科理论与实践》 2016年第1期87-90,共4页
近年来多发伤的发生率逐年提高,严重程度逐步加剧,伤情也日趋复杂。创伤后脓毒血症及多器官功能障碍综合征(multiple organ dysfunction syndrome,MODS)的发生率和死亡率也随之升高[1-2],我国每年因创伤致死的人数上升至人口死因的第... 近年来多发伤的发生率逐年提高,严重程度逐步加剧,伤情也日趋复杂。创伤后脓毒血症及多器官功能障碍综合征(multiple organ dysfunction syndrome,MODS)的发生率和死亡率也随之升高[1-2],我国每年因创伤致死的人数上升至人口死因的第4-5位。内皮祖细胞(endothelial progenitor cell,EPC)是1997年由Asahara等[3]首先从外周血液单个核细胞中分离出的一种祖细胞群,具有增殖、迁徙和分化为成熟内皮细胞的能力。 展开更多
关键词 Slit2/robo4信号通路 创伤 多器官功能障碍综合征
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脓毒症大鼠肠黏膜Slit2/Robo4蛋白表达及其与血管生成的关系 被引量:2
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作者 陈盈泰 吴昊 +2 位作者 张森 李文放 王虑 《中国卫生标准管理》 2022年第16期163-167,共5页
目的 研究Slit2/Robo4蛋白对脓毒症大鼠肠黏膜微循环及屏障功能的影响。方法 利用实验用大鼠16只,采用盲肠末端结扎穿孔(cecal ligation and puncture,CLP)模型制备脓毒症组(n=8),假手术组(n=8),24 h后处死,取回肠末端组织,4%多聚甲醛... 目的 研究Slit2/Robo4蛋白对脓毒症大鼠肠黏膜微循环及屏障功能的影响。方法 利用实验用大鼠16只,采用盲肠末端结扎穿孔(cecal ligation and puncture,CLP)模型制备脓毒症组(n=8),假手术组(n=8),24 h后处死,取回肠末端组织,4%多聚甲醛溶液固定后进行实验分析。采用聚合酶链反应(polymerasechainreaction,PCR)的方法进行Slit2/Robo4、血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)蛋白mRNA表达量检测,同时采用Western印迹法进行Slit2/Robo4蛋白的表达检测。Slit2/Robo4蛋白表达与VEGF表达的相关性采用Pearson秩相关检验。结果 Slit2蛋白mRNA以及Robo4蛋白mRNA表达量在脓毒症组均明显下降(P<0.05),Slit2蛋白表达量与Robo4蛋白表达量呈正相关(r=0.805,P<0.001);VEGF蛋白mRNA在脓毒症组的表达量明显增加(P<0.05),Slit2蛋白表达量与VEGF蛋白表达量呈负相关(r=-0.688,P=0.003),Robo4蛋白表达量与VEGF蛋白表达量呈负相关(r=-0.836,P<0.001)。结论 脓毒症模型大鼠肠黏膜血管中Slit2/Robo4蛋白表达量下降,VEGF表达量增加,两者变化可能与肠黏膜血管系统的稳定性密切相关。 展开更多
关键词 Slit2/robo4蛋白 血管内皮生长因子 脓毒症 肠黏膜 微循环 屏障功能
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Correlation of serum ROBO4 and sB7-H4 contents with the pathological features of tumor in patients with ovarian cancer
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作者 Wen-Liang Yu 《Journal of Hainan Medical University》 2019年第11期75-78,共4页
Objective:To study the correlation of serum ROBO4 and soluble B7-H4 (sB7-H4) contents with the pathological features of tumor in patients with ovarian cancer.Methods:The patients with ovarian cancer and the patients w... Objective:To study the correlation of serum ROBO4 and soluble B7-H4 (sB7-H4) contents with the pathological features of tumor in patients with ovarian cancer.Methods:The patients with ovarian cancer and the patients with ovarian benign tumor who underwent surgical resection in our hospital between March 2015 and August 2017 were selected, and the contents of ROBO4 and sB7-H4 in serum as well as the expression of ROBO4, B7-H4 and oncogenes in the lesion tissues were determined.Results: ROBO4 content in serum of patients with ovarian cancer was significantly lower than that of patients with ovarian benign tumor whereas sB7-H4 content was significantly higher than that of patients with ovarian benign tumor, ROBO4 mRNA expression in ovarian cancer tissues was significantly lower than that in ovarian benign tumor tissues whereas B7-H4 mRNA expression was significantly higher than that in ovarian benign tumor tissues, and ROBO4 and sB7-H4 contents in serum of patients with ovarian cancer were positively correlated with ROBO4 and B7-H4 mRNA expression in ovarian cancer tissues;the higher the FIGO stage and pathological grade of the tumor is, the lower the ROBO4 content and the higher the sB7-H4 content in serum of patients with ovarian cancer will be;β-catenin, CyclinD1 and MMP9 mRNA expression in ovarian cancer tissues were significantly higher than those in ovarian benign tumor tissues, negatively correlated with ROBO4 and positively correlated with sB7-H4 whereas PTEN and E-cadherin mRNA expression were significantly lower than those in ovarian benign tumor tissues, positively correlated with ROBO4 and negatively correlated with sB7-H4.Conclusion: The changes of ROBO4 and sB7-H4 contents in serum of patients with ovarian cancer are closely related to the changes of clinicopathologic stage and the abnormal expression of oncogenes. 展开更多
关键词 OVARIAN cancer robo4 SOLUBLE B7-H4 ONCOGENE
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急性肺损伤大鼠肺组织神经导向因子Slit2及Robo4的表达 被引量:2
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作者 李霖 卿国忠 +4 位作者 杨靖 鼋牟 彭正良 张克娜 丁灿 《中华急诊医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期261-266,共6页
目的观察神经导向因子Slit2及Rob04在肺组织的表达并探讨二者在ALI发病中的作用。方法在南华大学实验动物部将48只SD雄性大鼠随机(随机数字法)分为对照组(n=24)与ALI组(n=24)。ALI组采用盲肠结扎穿孔术复制急性肺损伤模型,对照... 目的观察神经导向因子Slit2及Rob04在肺组织的表达并探讨二者在ALI发病中的作用。方法在南华大学实验动物部将48只SD雄性大鼠随机(随机数字法)分为对照组(n=24)与ALI组(n=24)。ALI组采用盲肠结扎穿孔术复制急性肺损伤模型,对照组只开腹关腹,不行盲肠结扎穿孔术,以血清炎症因子浓度、动脉血氧分压(PaO2)、组织水肿、肺部特征性病理改变作为ALI模型成功主要指标。两组又分为术后12、24、48h3个组,每组8只。取大鼠动脉血测定PaO2;取肺组织测定湿/干质量(W/D)比值,并观察肺毛细血管通透性及组织病理学改变;ELISA检测血清TNF-α水平;RT-PCR测定肺组织Slit2及Rob04mRNA表达,免疫组织化学法观察蛋白表达情况。采用SPSSl3.0统计软件行单因素方差分析,P〈0.05为差异具有统计学意义。结果与对照组比较,Au组致伤后各时间点PaO2均降低,肺W/D比值、肺毛细血管通透性、血清TNF-α水平均升高(P〈0.05),病理观察显示肺组织受损;RT-PCR结果显示ALI组12h,24h,48h肺组织Slit2mRNA表达量较同期对照组下降[(0.56±0.13)V8.(0.87±0.05),F=41.39,P〈0.05,(O.42±0.10)vs.(0.85±0.07),F=93.54P〈0.05,(0.26±0.08)vs.(0.89±0.09),F=227.05,P〈0.05];ALI组肺组织Robo4mRNA表达量与同期对照组比较,差异无统计学意义[(0.86±0.07)vs.(0.83±0.05),F=0.695,P〉0.05,(0.82±0.05)VS.(0.89±0.08),F=2.061,P〉0.05,(0.85±0.08)vs.(0.86±0.05),F=0.035,P〉0.05];免疫组织化学研究显示Slit2主要表达于内皮细胞膜上,亦可表达于肺上皮细胞胞核及胞浆,Robo4则只表达于内皮细胞膜上;ALI组3个时间点肺组织Slit2蛋白表达量较同期对照组下降[(0.37±0.05)vs.(0.45±0.07),F=6.82,P〈0.05,(0.32±0.06)VS.(0.47±0.09),F=23.54,P〈0.05,(0.28±0.07)vs.(0.46±0.06),F=28.01,P〈0.05];与对照组比较,ALI组肺组织Robo4蛋白表达量差异无统计学意义[(0.53±0.04)vs.(0.52±0.05),F=0.155,P〉0.05,(0.53±0.09)vs.(0.50±0.05),F=0.498,P〉0.05,(0.55±0.06)vs.(0.56±0.07),F=0.073,P〉0.05]。结论对照组大鼠肺组织可表达Slit2及Robo4,盲肠结扎穿孔致ALI大鼠肺组织Slit2表达下降,这可能与ALI发病有关。 展开更多
关键词 SLIT2 robo4 急性肺损伤 脓毒症 内皮渗漏 盲肠结扎穿孔术 肿瘤坏死因子-Α 神经导向因子
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