转rol基因枳橙分子鉴定及部分生物学的观测

对转rol基因枳橙B、D、E3个系及对照田间高接植株进行了PCR分子鉴定、RT-PCR转基因表达分析和生物学特征的观测。PCR分析表明rolA、rolB、roIC已成功转入到3个转化枳橙系中。利用RT-PCR在田间转化植株中只检测到npt Ⅱ和rolC基因的表达，而rolA、rolB基因未检测到。3个转化系枳橙均表现出顶端优势减弱，侧枝增多，植株矮化性状明显，高度只有对照植株的44％～50％，节间长度缩短，叶面积减少；光合作用增强；内源赤霉素、生长素、玉米素等促进类激素在中部、下部叶片含量均高于对照，这可能是诱导上述形态特征的变化的因素之一。

发根农杆菌Ri质粒rol基因研究进展及在林木改良上的应用

Ri质粒上携带的诱根基因的表达不仅能导致植物被感染部位形成大量的毛根 ,而且由毛根容易获得再生的转化植株 ,这些植株可表现出许多能稳定遗传的表型变异 ,在植物遗传改良中有着广阔的应用前景。 2 0世纪 80年代以来 ,国内外学者对发根农杆菌Ri质粒及其rol基因进行了广泛深入的研究。本文重点综述了农杆碱型发根农杆菌Ri质粒的结构与功能 ,rol基因的位点与特征 ,Ri质粒的转化与rol基因的表达对植物生长发育的影响及在林木遗传改良上应用等方面的研究现状 ,并讨论了Ri质粒rol基因在林木遗传改良应用上存在的问题与应用前景。

发根农杆菌Ri质粒rol基因研究的综述

发根农杆菌Ｒｉ质粒ｒｏｌ基因研究的综述①周跃钢王三根（西南农业大学生理生化教研室，重庆４００７１６）ＲｅｖｉｅｗｏｆＳｔｕｄｉｅｓｏｎＲｏｌＧｅｎｅｓｏｆＲｉＰｌａｓｍｉｄｓｆｒｏｍＡｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｒｈｉｚｏｇｅｎｅｓＺｈｏｕＹｕｅｇａｎｇ...

多拷贝rol基因对转基因杨树生长及内源激素的影响

对转入多拷贝rolB、rolC基因的三倍体毛白杨进行高生长量、生根率和内源激素(IAA、ABA)含量等指标的测定,以研究多拷贝rol基因在转基因植物中的表达。结果显示:转Ri质粒三倍体毛白杨再次分别转入rolB、rolC基因后,部分株系试管苗的生长受到了抑制,但各株系生根率均有不同程度提高;rolB基因转化植株的内源IAA平均含量高于rolC基因转化植株,其IAA/ABA值亦高于rolC基因转化植株。试验结果表明rol基因的多拷贝促使转化植株快速大量生成毛状根。

转不同rol基因741杨株系相关性状比较分析

对已转入rolB、rolC基因741杨株系进行分子检测,并对其根系生长状况、苗高、叶绿素a和b、叶绿素荧光以及内源激素等指标进行测定。结果表明,转rolB、rolC基因741杨各株系发根率、发根量均高于未转基因对照。转rolB基因741杨株系苗高与对照无显著差异,叶绿素a、b含量上升,Fv/Fm、PI值下降,IAA、ZT含量上升,ABA含量下降。转rolC基因741杨各株系顶端优势减弱,植株矮化,叶绿素a、b含量降低,Fv/Fm、PI值下降,IAA、ZT、ABA含量上升。总体比较,转rolB基因741杨株系生根率,叶绿素a、b含量,PI值、ZT和IAA含量均高于转rolC基因741杨株系。

发根农杆菌Ri质粒rol基因的研究现状(英文)

发根农杆菌Ri质粒与诱根有关的rol基因在植物中的表达不仅能导致大量毛根形成 ,而且还表现出一系列能稳定遗传的表型变异 ,在植物遗传改良中有着广阔的应用前景 .2 0世纪 80年代以来 ,国内外学者对发根农杆菌 ,尤其是农杆碱型发根农杆菌Ri质粒及其rol基因进行了广泛深入的研究 .该文重点综述了农杆碱型发根农杆菌Ri质粒的结构与功能、rol基因的位点与特征、Ri质粒的转化及rol基因的表达对植物生长发育的影响及在林木遗传改良上的应用等方面的研究现状 ,并对Ri质粒rol基因在林木遗传改良应用上存在的问题与应用前景进行了分析 .

发根农杆菌Ri质粒rol基因矮化性状表达研究进展

rol基因的表达能诱导被感染植物产生发根,再培养后所形成的植株具有一系列的如矮化,生根力强等表现型,国内外学者对rol基因这一特性作了深入的研究.对rol基因产生的矮化性状及表达进行了综述,并探讨了rol基因矮化性状研究面临的问题和可能的解决途径.

Sqt-1的5'端侧翼序列在旋毛虫rol6基因中的启动功能验证

为验证秀丽隐杆线虫(C.elegans)sqt-1的5'端侧翼序列(5'-FSsqt-1)是否具有启动旋毛虫(T.spiralis)基因表达的功能,本研究采用PCR方法从C.elegans全基因组DNA中扩增5'-FSsqt-1,并将其克隆至以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因的C.elegans启动子验证载体p PD95.77中,构建重组质粒p PD-sqt-GFP。将T.spiralis表皮胶原蛋白rol6编码序列克隆至5'-FSsqt-1下游,构建重组质粒p PD-sqt-rol6-GFP。通过显微注射法将p PD-sqt-GFP和p PD-sqt-rol6-GFP分别转入C.elegans体内,进行荧光观察及western blot鉴定。结果显示,T.spiralis表皮胶原蛋白Rol6能够在C.elegans体内获得表达。研究表明,5'-FSsqt-1具有启动T.spiralis基因表达的功能,为T.spiralis基因在C.elegans体内表达奠定了基础。

玉米籽粒突变基因研究获进展

上海大学生命科学学院科研人员对玉米经典突变prolin erespondingl（prol）基因进行了克隆和功能解析，揭示了prol基因在调控玉米普通蛋白合成和细胞周期中所起的关键作用。

发根农杆菌诱导甘薯发根条件的优化

通过诱导甘薯(徐薯18)发根的条件进行优化,分别对侵染时间(10min、20min和30min)、培养基[MS、MSJ(MS+BA0.1mg/L+NAA0.2mg/L)和MSS(MS+BA0.2mg/L+NAA0.1mg/L)]、诱导材料(叶片、叶柄和茎切段)和除菌药物剂量(羧苄青霉素浓度0.5mg/L、1.0mg/L和1.5mg/L)进行优化。试验按L9(34)正交设计,每个处理3次重复。然后通过PCR检测徐薯18和其发根中的rol基因。结果表明用发根农杆菌A4经20min侵染,通过MSJ活化的徐薯18的茎切段生成发根的发根诱导率最高,最佳的除菌羧苄青霉素浓度为1.0mg/L。PCR检测证明得到的发根是发根农杆菌诱导产生的。在此优化条件下诱导的发根诱导率高,得到发根的可靠性强,且生成的发根粗壮、生长迅速、分支众多。

快速克隆DNA大片段的方法

文章采用菌落PCR的技术,快速扩增发根农杆菌Ri质粒rol(包括rolA、rolB、rolC)基因的DNA片段并用于测序分析。克服了由于Ri质粒过大,提取困难等问题。

转rolB和rolC基因杨树田间苗性状对比分析

为研究rol基因在杨树中的表达差异性,对转入不同rol基因的白杨杂种741杨株系进行分子检测,并对其外部形态、叶绿素含量、光合特性等指标进行测定和比较。结果表明:转rol B基因3个株系的叶片长、叶片宽度、叶柄长、苗高和地径均高于对照,但节间距均略低于对照株系;转rol B基因株系的叶绿素a、b含量均高于对照。转rol C基因11个株系的叶片长、叶片宽度、叶柄长、苗高、地径、节间距均低于对照;除株系C-18外,转rol C基因株系的叶绿素a、叶绿素b含量均不同程度低于对照。转rol B和rol C基因株系的净光合速率和气孔导度低于对照,蒸腾速率和胞间CO2浓度与对照存在无规律性差异。总体比较,rol C基因比rol B基因对杨树生长和光合能力具有更加明显的抑制作用。