小柴胡汤和柴胡—黄芩含药血清对CCl_4损伤肝细胞的影响

目的 建立CCl4肝细胞损伤模型 ,考察小柴胡汤及柴胡—黄芩配方含药血清对CCl4损伤肝细胞的保护作用。方法 制备小柴胡汤及柴胡—黄芩配方的大鼠含药血清 ,体外10mol·L-1CCl4诱导肝细胞损伤模型 ,观察体积分数为 0 1的含药血清对损伤肝细胞增殖率、GPT、细胞形态学以及凋亡率的影响。结果 与正常组比较 ,模型组肝细胞增殖率降低 (P <0 0 1) ,细胞培养上清液中GPT含量升高 (P <0 0 1) ;与模型组比较 ,小柴胡汤及柴胡—黄芩配方组的肝细胞增殖率提高 (P <0 0 1) ,细胞培养上清液中GPT含量降低 (P <0 0 1)。倒置显微镜和Giemsa染色观察到模型组肝细胞存在着明显的坏死和凋亡 ,小柴胡汤及柴胡—黄芩配方的凋亡细胞明显减少。与正常组比较 ,CCL4模型组细胞凋亡增高 (P <0 0 1) ;与模型组比较 ,柴芩组和小柴胡汤全方组的细胞凋亡率降低 (P <0 0 1)。结论 小柴胡汤及柴胡—黄芩配方含药血清对体外CCl4诱导的肝细胞损伤有保护作用。CCl4引起的肝损伤同时存在着明显的凋亡和坏死 ,小柴胡汤及柴胡 -黄芩配方可能具有抗CCl4诱导的肝细胞凋亡的作用。

基于雪旺细胞-背根节神经元共培养建立周围神经髓鞘化体外模型

目的:为探讨雪旺细胞与背根节(DRG)神经元髓鞘化共培养的标准化方法,并建立周围神经髓鞘化体外模型。方法:采用新生大鼠DRG神经节组织块培养法和胚胎大鼠DRG神经节分散培养法分别进行雪旺细胞和DRG神经元的培养和纯化,将雪旺细胞接种到培养DRG神经元的盖玻片上,按髓鞘化共培养程序进行雪旺细胞-DRG神经元共培养。结果:(1)雪旺细胞和DRG神经元的纯度、数量及比例;(2)共培养载体的包被基质;(3)髓鞘化共培养步骤和培养基成分是影响髓鞘形成的关键因素。原代雪旺细胞和DRG神经元S-100、神经元特异性烯醇化酶免疫荧光染色结果显示其纯度分别达到95%、90%;在髓鞘化培养基中共培养14d后相差显微镜和扫描电子显微镜下均观察到雪旺细胞包裹DRG神经元轴突形成髓鞘节段,髓鞘碱性蛋白免疫荧光染色结果显示免疫反应性;共培养体系和髓鞘结构可保持两个半月左右。结论:基于雪旺细胞和DRG神经元的条件化共培养能建立一种可靠的周围神经髓鞘化体外模型,为周围神经髓鞘化的主要调节因素及其作用机制研究提供有效的实验模型。

根管充填糊剂对根管常见混合细菌的体外抑制作用

目的评价3种根管充填材料在体外根充模型中对根管常见混合细菌的抑制作用。方法收集因正畸治疗而新鲜拔除的下颌双尖牙48颗,常规制备根管,随机分为4组(每组12颗)。实验组分为3组,分别用AH-Plus糊剂、Vitapex糊剂和氧化锌丁香油糊剂加牙胶尖作根管充填,对照组不作充填。根充后行冷热循环处理。使用国际参考菌株变异链球菌、粘性放线菌、嗜酸乳杆菌、粪肠球菌、殊异韦永氏菌、牙龈卟啉菌和核梭杆菌。将等体积混合制备成的混合菌液封入根管。孵育后截取根上1/3、根中1/3、根尖1/3,进行细菌采样、培养,观察细菌菌落数。利用ANOVA(P=0.05)软件,分析各组间的差异。结果所有的样本均培养出细菌。粪肠球菌在根管的所有部位均有较高的检出率。根管残留细菌总数比较,在根上1/3 Vitapex糊剂抑菌作用优于AH-Plus,而在根尖1/3 AH-Plus糊剂抑菌作用优于Vitapex。结论根尖1/3处的抑菌作用而言,AH-Plus糊剂优于Vitapex糊剂和传统的氧化锌丁香油糊剂,更具临床意义。

欧芹根总黄酮对体外脂肪肝细胞模型脂联素及其受体表达的影响

目的建立L-02脂肪肝细胞模型,观察欧芹根总黄酮对脂联素及其受体表达的影响。方法用游离脂肪酸(FFA)溶液建立L-02脂肪肝细胞模型,筛选最佳药物干预浓度。分化成熟的细胞分空白对照组、模型对照组、药物治疗组分别干预,测定甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)及丙二醛(MDA)水平;qRT-PCR、WB检测细胞中脂联素(ADPN)、脂联素受体(ADIPOR-2)蛋白表达。结果筛选出的药物最佳干预浓度为50μg/mL。药物治疗组的TC、MDA水平显著低于模型组,且差异有统计学意义(P<0.05)。与非酒精性脂肪肝(NAFLD)细胞模型组相比,ADPN、ADIPOR-2在药物治疗组中表达显著升高,且差异有统计学意义(P<0.05),药物治疗组能显著提升模型组的ADPN、ADIPOR-2水平。结论欧芹根总黄酮能对NAFLD起到良好的治疗作用,且呈剂量依赖性。欧芹根总黄酮的起效机制与激活脂联素及其受体相关。

四种冲洗剂对根管内粪肠球菌清除效果的体外实验

目的比较常用的根管冲洗剂对根管内粪肠球菌感染的清除效果。方法建立粪肠球菌根管内感染模型,实验组用4种常用的化学冲洗剂、对照组用0.9%NaCl 溶液冲洗根管。冲洗前、后计数根管内的细菌量,检测残余细菌并观察72h 细菌复苏情况。结果化学冲洗剂的杀菌效果明显好于0.9%Nacl 溶液(P<0.05),2.5%次氯酸钠及2%氯己定明显好于3% H_2O(P<0.05)。结论 2%氯己定、2%氯胺-T 的杀菌效果与2.5%次氯酸钠相似,3%H_2O 杀菌效果较弱。