Ropporin基因在人精子中的表达和意义

目的检测ropporin基因在人精子中的表达。探讨Ropporin抗体对人精子运动的影响,评价Ropporin蛋白在精子运动中的功能。方法收集正常男性精子,非连续梯度离心法分离精子,用RT-PCR、免疫印迹和免疫荧光方法检测ropporin基因在精子中的表达和蛋白定位;将纯化精子分别在含不同浓度Ropporin抗体的培养液中孵育(0,0.8,4和20μg/mL),在不同时间点(1,2,6h)用精子计算机辅助分析系统(computer-assisted sperm analysis,CASA)检测精子活动力。结果RT-PCR、免疫印迹和免疫荧光方法均检测出ropporin基因在精子中表达;免疫荧光表明Ropporin主要定位在精子鞭毛的主段和末段;抗体实验显示抗体孵育1h、2h、6h后精子的快速前向运动(a级)和慢速前向运动(b级)均明显受到抑制,并显示剂量依赖性。结论Ropporin在精子鞭毛的主段和末段上的表达与精子的运动密切相关。

Ropporin基因在人睾丸和精子中的鉴定与蛋白定位

目的:对人睾丸和精子中的Ropporin基因表达进行鉴定和蛋白定位,为进一步研究其在精子中的作用奠定基础。方法:应用免疫组织化学Western blotting和RT-PCR及间接免疫荧光方法检测Ropporin在正常人睾丸组织射出精子中的表达特征。结果:在睾丸组织中,Ropporin主要表达在圆形精子细胞阶段;在精液精子中,mRNA和蛋白水平上均检测出Ropporin的表达,且蛋白主要定位在精子鞭毛的主段和末段上。结论:人睾丸圆形精子细胞和精液精子中均有Ropporin mRNA和蛋白的表达,其可能与精子运动有关。