多花蔷薇假珠芽诱导、体细胞胚发生及植株高效再生

以多花蔷薇‘无刺3号’成熟种子为外植体,探讨了假珠芽诱导、体细胞胚发生及植株高效再生的方法。结果表明,种子的子叶在添加2,4-D0.5-2mg·L^-1的1/2MS培养基上暗培养30d后所产生的愈伤组织,接种到添加TDZ5-20mg·L^-1的1/2MS培养基上光培养20d产生初级假珠芽。假珠芽在添加TDZ10mg·L^-1和GA30.1mg·L^-1的诱导培养基上暗培养20d后,在含麦芽糖的无植物生长调节剂的培养基上光培养产生少量次级假珠芽和胚性愈伤组织。假珠芽保存在诱导培养基上。胚性愈伤组织可发育成大量正常体细胞胚,继而再生正常植物。假珠芽可通过上述方法不断诱导体细胞胚和假珠芽,通过这种方法假珠芽已经保存了2年。

微波消解-火焰原子吸收法测定新疆野蔷薇果中金属元素

采用HNO3消解体系对野蔷薇果进行程序升温微波消解制样,应用火焰原子吸收法测定野蔷薇果中的Ca、K、Mn、Zn、Mg、Fe、Cu、Na、Cr、Ni、Sr共11种金属元素的含量。对样品前处理条件进行筛选,确定样品适合的微波消解体系并进行消化结果的准确度和精密度实验。该方法的加标回收率为96.50%～104.50%,相对标准偏差(RSD)≤3.21%。结果表明,新疆野蔷薇果中富含Ca、Mg、K、Na、Mn、Fe等对人体有益的金属元素,而Cr、Ni等金属元素的含量较低。

红刺玫愈伤组织诱导再生体系的建立

红刺玫（Rosa multiflora Thunb.var.cathayensis）为蔷薇科蔷薇属野蔷薇的一个变种,半常绿灌木,花色粉红。红刺玫以花期长、耐受高温和高湿气候等特性成为园林绿化的新宠[1]。但红刺玫的单瓣花和花色单一的缺陷限制了其广泛的应用,改良红刺玫花色引起园艺工作者的极大兴趣。

野蔷薇根总黄酮的提取及纯化工艺

目的:优化野蔷薇根总黄酮提取及纯化工艺。方法:L9(34)正交试验回流提取确定最适提取剂乙醇浓度、料液比、提取时间组合;从静态吸附-解吸、动态吸附-解吸两方面筛选最佳树脂型号,单因素考察最佳纯化条件。结果:UV 508 nm检测波长下,最佳提取条件为50%乙醇溶剂,料液比1∶10,进行90℃、90 min回流提取;14种大孔树脂中,HPD-400型大孔树脂对野蔷薇根总黄酮的吸附-解吸能力最好,树脂纯化最佳上样浓度为浸膏母液稀释1.5倍;上样量35 m L,流速3 s/滴;除杂用水量40 m L,流速1 s/滴;50%乙醇32 m L洗脱,流速2 s/滴。结论:最优提取纯化条件下,总黄酮回收率达50%以上。

月季和野蔷薇的试管嫁接研究

【目的】研究月季和野蔷薇的试管嫁接技术,为月季繁殖的有效途径提供参考。【方法】以野蔷薇带芽茎段为外植体,通过比较不同灭菌方法、不同激素种类和浓度的培养基对组培快繁的影响,筛选出适宜的灭菌方法以及培养基,从而建立野蔷薇的无菌快繁体系,并以不同品种月季无菌苗的茎尖为接穗,野蔷薇为砧木进行远缘嫁接。【结果】野蔷薇的外植体灭菌宜采用75%酒精溶液拭擦茎段表面后浸泡10 s,再用0.1%的升汞溶液浸泡10 min,继代增殖培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.10 mg/L,生根培养基为WPM+NAA 0.05 mg/L;保留砧木叶片有利于提高嫁接成活率和生根率;以继代增殖培养25 d的月季茎尖为接穗,有利于远缘嫁接的成活。移栽以绯扇-野蔷薇的成活率最高,其次为"卡罗拉-野蔷薇"、"金凤凰-野蔷薇"、"红双喜-野蔷薇"、"龙沙宝石-野蔷薇"、"遗产-野蔷薇"。【结论】不同月季品种与野蔷薇嫁接的成活率因品种而异,砧木保留叶片与否以及接穗的继代培养时间与嫁接成活率有着密切的关系。

野蔷薇根醇提物对大鼠动脉粥样硬化的影响

目的:观察YT对大鼠AS的影响。方法:50只SD大鼠按随机数字表法分为空白组、模型组、YT低、高剂量组、AL组,灌胃给药90 d,每2周称摄食量和体质量,调整灌胃量;空白组喂标准饲料,其余组高脂饮食联合注射维生素D3并加免疫损伤造成AS;末次给药1h后,取主动脉进行病理组织学观察,比色法检测血清中SOD、MDA水平,化学发光法检测血清中CRP水平,ELISA法检测血清中sCD40L、ADNP、IL-18、IL-16水平,放射免疫分析法检测血清中IL-6、TNF-α水平。结果:YT低、高剂量组明显改善AS大鼠主动脉壁增厚、脂质沉积,减少泡沫细胞形成及淋巴细胞浸润;YT低剂量组体质量增加幅度、MDA水平显著降低,摄食量显著增加,YT高剂量组IL-18水平显著降低。结论:YT可通过调节脂质过氧化及炎症反应改善AS。

多花蔷薇花挥发油化学成分的GC／MS分析

本文采用ＧＣ／ＭＳ技术，分析了经并时蒸馏萃取装置获得的多花蔷薇挥发油化学成分。共鉴定出２８种化合物，为开发、利用这一野生资源提供了科学依据。

野蔷薇根总黄酮对H_(2)O_(2)诱导损伤的HUVEC线粒体功能及凋亡通路的影响

目的探讨野蔷薇根总黄酮(TF-RM)对H_(2)O_(2)诱导损伤的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)线粒体功能及凋亡通路的影响。方法将SD雄性大鼠随机分正常对照组、维生素C组(0.08 g·kg^(-1))、TF-RM组(2.5 g·kg^(-1)),每组10只。灌胃给药,每天1次,连续7 d,制备含药血清。采用H_(2)O_(2)(950μmol·L^(-1))诱导HUVEC损伤,并分别与维生素C及TF-RM低、中、高剂量(5%、10%、15%)含药血清共培养24 h。采用DCFH-DA荧光定量法检测HUVEC中活性氧(ROS)的含量;JC-1染色法检测细胞线粒体膜电位的变化;Fluo-4染色法检测细胞内Ca^(2+)浓度;Western Blot法检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-9、Caspase-3蛋白的表达情况。结果与正常对照组比较,模型组HUVEC内的ROS水平、线粒体膜电位下降率、Ca^(2+)浓度以及Bax蛋白表达量显著升高,差异均有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,TF-RM各剂量组细胞内的ROS水平、Ca^(2+)浓度及Bax蛋白表达量均明显降低(P<0.05,P<0.01),Bcl-2蛋白表达量升高(P<0.05);TF-RM高剂量组的线粒体膜电位下降率明显降低(P<0.05);TF-RM中剂量组的Caspase 9蛋白表达量明显降低(P<0.05)。结论TF-RM能够改善H_(2)O_(2)诱导的HUVEC线粒体功能损伤,发挥对细胞凋亡的保护作用。

营实挥发性成分的GC-MS分析

目的:对营实挥发油成分进行分析,为其质量评价提供科学依据。方法:采用水蒸气蒸馏法提取营实挥发油,经GC-MS结合计算机检索对其化学成分进行鉴定,用色谱峰面积归一化法确定各化学成分的相对含量。结果:从营实挥发油中分离出95个化学组分,鉴定了其中70个,占挥发油总含量的91.01%。主要成分为软脂酸甲酯和9,12,15-十八烷三烯酸甲酯,相对含量分别为9.132%和10.515%。结论:分析了营实中挥发油的组成和相对含量,该法简便、快速、灵敏度高,为其进一步的开发利用提供了理论依据。

野蔷薇根总黄酮对H2O2诱导损伤的人脐静脉内皮细胞的影响

目的研究野蔷薇根总黄酮(Total Flavonoids from Rosa multiflora Thunb,TF-RM)对过氧化氢(H2O2)诱导损伤的人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)的影响。方法将SD大鼠随机分为3组,每组10只:空白对照组,维生素C(Vit C)组(0.08 g·kg-1),TF-RM组(2.5 g·kg-1),连续灌胃给药7 d,制备含药血清。采用H2O2诱导HUVEC损伤,分别加入Vit C、TF-RM低、中、高剂量含药血清,噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力,AnnexinV-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,微量酶标法检测乳酸脱氢酶(LDH)含量,硝酸还原酶法检测一氧化氮(NO)含量,酶联免疫吸附法(ELISA)检测内皮素-1(ET-1)含量。结果与模型组比较,Vit C组、TF-RM低、高剂量组细胞活力明显提高(P<0.05,P<0.01);Vit C组、TF-RM中、高浓度组正常细胞增加,早、晚期凋亡、坏死细胞减少;Vit C组、TF-RM高剂量组LDH含量显著降低(P<0.05,P<0.01);TF-RM高浓度组NO含量显著提高(P<0.05),ET-1含量显著降低(P<0.01)。结论TF-RM对H2O2诱导损伤的血管内皮细胞具有明显保护作用。

野蔷薇果皮色素的提取和稳定性研究

采用正交试验对野蔷薇果皮色素的最佳提取条件进行了研究,并探讨该色素的稳定性。结果表明:在60℃下采用60%乙醇,以1:6物料比,pH6.0,浸提时间4h条件下色素产率最高;该色素属水溶性色素,耐光性、耐高温性好,在酸性介质以及常用食品添加剂等条件下有较好的稳定性,可作为食品饮料、医药等行业的天然植物色素广泛使用。

氮磷供应水平对野蔷薇生长和养分吸收的影响

【目的】研究不同养分梯度下野蔷薇生长、养分吸收特征及根土互作效应,为优化施肥提供科学依据。【方法】采用大田实验,研究5个施氮和5个施磷水平(分别为0、50、100、200和300 mg/kg)对无刺野蔷薇(Rosa multiflora Thunb.ex Murr.)主干地径、养分吸收、叶片SPAD及土壤养分有效性的影响。【结果】随着施氮量增加,主干地径生长呈现先增加后降低的趋势,施氮量从0增加到50 mg/kg时,地径生长量增加22.69%~35.05%;施氮量增加到100 mg/kg时,地径生长量增加46.34%~51.14%;随后保持平稳状态,当施氮量增加到300 mg/kg时,地径生长量显著降低。磷供应水平在2018年表现出与氮类似的趋势,当施磷量为100 mg/kg时,地径生长达到最大值,随后开始降低;2019年当施磷量从0增加到50 mg/kg时,地径生长量增加38.02%,随后保持稳定状态。当施氮量为200 mg/kg或施磷量为100 mg/kg时,叶片SPAD值较其他处理分别增加4.79%~17.12%和5.85%~17.82%。随着施氮量增加,植株(叶片和枝条)氮含量表现出先增加后降低的生长特征。随着施磷量增加,植株磷含量表现出先增加然后平稳的生长特征。并且不同氮水平下,主干地径生长与植株氮含量和土壤有效氮均表现出显著的正相关关系(P<0.05)。不同供磷水平下,主干地径生长仅与土壤有效磷表现出正相关关系(P<0.01)。【结论】野蔷薇生长对氮和磷供应强度表现出高度的可塑性,适宜的氮磷供应水平有利于维持土壤较高的养分有效性,促进养分吸收,促进主干地径增粗生长。

反相液相色谱法测定新疆野蔷薇果中的黄酮类化合物

为建立一种简单、快速测定野蔷薇果中黄酮类化合物含量的反相液相色谱方法。利用甲醇、异丙醇和水以一定比例1mL/min流速梯度洗脱,360nm波长检测,芦丁和槲皮素在4min内即可达到基线分离。经与标准品对照,野蔷薇果中含有芦丁和槲皮素,含量分别为17.7、94.7μg/gmd。芦丁和槲皮素回收率较好,分别为95.6%和97.3%;相对标准偏差均小于5%,方法重复性较好。本法可用于野蔷薇果中黄酮类化合物的快速分析检测。

HPLC法测定野蔷薇中齐墩果酸和熊果酸的含量

目的：采用HPLC法测定野蔷薇不同部位（根、茎、果实）中齐墩果酸和熊果酸的含量,比较不同产地野蔷薇果实中齐墩果酸和熊果酸含量的差异。方法：采用Zorbax ODS色谱柱（4.6 mm×250 mm×5μm）,以甲醇-水（88∶12）为流动相,流速为1.0 mL/min,检测波长为210 nm。结果：齐墩果酸和熊果酸在20 min内较好分离,其质量浓度分别为0.02468-0.2468 mg/mL和0.02523-0.2523 mg/mL时与峰面积线性关系良好,相关系数分别为0.9994和0.9996;平均回收率为分别为99.96%（RSD为0.74%）和100.03%（RSD为0.95%）。结论：该方法操作简便、结果准确、重现性好,可同时测定野蔷薇中齐墩果酸和熊果酸的含量,均在果实中含量最高;库车县、阿图什市的野蔷薇果实中齐墩果酸和熊果酸的含量最多,可作为最适开发利用的固定来源。

野蔷薇果皮多酚的提取与抗氧化和抑菌作用研究

通过单因素以及正交试验,对野蔷薇果皮中多酚的提取工艺进行研究.确定超声-微波协同萃取野蔷薇果皮中多酚的最佳提取工艺:提取溶剂为体积分数40%的乙醇、微波功率120 W、微波时间12min、料液比1∶25(g/mL),此条件下野蔷薇果皮中多酚含量为4.46g/100g.通过4种不同的抗氧化体系,分别测定野蔷薇果皮多酚类提取物对超氧阴离子自由基、DPPH·自由基、羟基自由基的清除能力及还原能力的影响,并与Vc进行比较,结果显示:它对超氧阴离子自由基、过氧化氢和羟基自由基都有一定清除能力.采用平板打孔法和试管稀释法测定抗菌活性,结果表明野蔷薇果皮多酚提取液对枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、变形杆菌和白色黏菌均有较强的抑制作用.

野蔷薇根多糖超声微波酶解协同提取及抗氧化活性

采用超声-微波酶解协同提取法提取野蔷薇根多糖,以单因素试验为基础,结合响应面试验优化野蔷薇根多糖的提取工艺,并采用化学方法对野蔷薇根多糖进行体外抗氧化活性测定,并与VC进行了比较。结果表明,野蔷薇根多糖的最佳提取工艺条件为:纤维素酶添加质量分数1.15%(酶活为40 U/mg)、pH值5.72、提取温度81.19℃、液料比12.56∶1(mL/g)。在此条件下,野蔷薇根多糖的实际产率为10.48 mg/g,与模型预测结果(10.63 mg/g)基本相接近。抗氧化试验测定结果表明,野蔷薇根多糖具有一定的抗氧化活性。野蔷薇根多糖的抗氧化性略低于VC,并在一定浓度范围内抗氧化活性与多糖含量呈正相关系。

响应曲面法优化野蔷薇根多糖脱色工艺

【目的】优化野蔷薇根多糖的过氧化氢(H_2O_2)法脱色工艺条件,为野蔷薇根多糖的脱色纯化提供技术支持。【方法】以野蔷薇根为试验材料,以多糖脱色率和保留率为考察指标,利用响应曲面法对H_2O_2法脱色野蔷薇根多糖的工艺条件进行优化。【结果】通过响应曲面法建立野蔷薇根多糖脱色的回归模型为:Y=94.84+3.08A+1.83B+0.88C+0.17AB+0.23AC-0.055BC-3.17A2-1.31B2-0.87C2(Y为多糖脱色率,A为H_2O_2体积分数、B为溶液p H、C为脱色时间),该模型拟合度较好。H_2O_2法脱色野蔷薇根多糖的最佳工艺条件为:H_2O_2体积分数35.0%、溶液p H 9.00、脱色时间4.5 h,在此条件下多糖脱色率和保留率分别为95.48%和75.17%,脱色率与理论值96.55%的相对误差为1.11%。H_2O_2体积分数、溶液p H和脱色时间3个因素对野蔷薇根多糖脱色效果均有极显著影响(P<0.01)。【结论】H_2O_2脱色法具有操作简便、脱色效果明显、成本低等优点,可对野蔷薇根多糖进行有效脱色。

响应曲面法优化野蔷薇根多糖脱蛋白工艺的研究

以蛋白去除率为主要考察指标,比较了Sevag法、TCA法(三氯乙酸法)、酶法及TCA-酶结合法对野蔷薇根多糖脱蛋白率的效果,并采用响应曲面法优化TCA法脱蛋白的最佳工艺。结果表明,TCA法脱蛋白最佳工艺为:TCA质量分数0.9%,体积比1∶1,静置时间70 min。在此条件下,蛋白去除率为75.92%,多糖损失率为22.57%。

新疆多花蔷薇根中熊果酸的提取及分离纯化工艺研究

通过超声-微波辅助法提取了多花蔷薇根中的熊果酸,并对其进行分离、纯化,确定了最优提取及分离纯化条件.采用响应面法优化熊果酸的提取工艺,经脱脂、脱色、酸碱沉淀、凝胶柱层析等方法得到了分离纯化熊果酸的最佳条件,用紫外光谱(UV),红外光谱(IR),核磁共振氢谱(1H NMR),核磁共振碳谱(13CNMR)对产品进行鉴定.结果表明:在超声功率50W,微波功率310W,提取时间2.4min,液固比20:1mL/g,微波浸提时间15min,浸提温度55℃的提取条件下,熊果酸的得率可达2.64%.当石油醚用量为提取液体积的0.2倍,脱脂2次,活性炭用量0.04g/mL,脱色3次,碱沉淀pH值为12,酸沉淀pH值为4,熊果酸粗品用葡聚糖凝胶LH-20分离洗脱2次时,重结晶后的熊果酸纯度在97%以上,达到较好的分离效果.

响应曲面法优化野蔷薇根多糖的提取工艺及抑菌作用研究

利用响应曲面法优化野蔷薇根多糖的提取工艺,并对提取液进行抑菌活性研究。以野蔷薇根多糖得率为指标,采用单因素和响应曲面法对提取温度、提取时间、料液比和微波功率进行考察,优化最佳提取条件。采用平板打孔法和试管稀释法对野蔷薇根多糖进行抑菌实验。结果表明,野蔷薇根多糖的最佳提取工艺为提取时间22 min,微波功率317 W,提取温度81℃,料液比32:1 m L/g,实测的多糖得率为6.10mg/g,与模型理论值基本符合。野蔷薇根多糖对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、奇异变形杆菌都具有较明显的抑制作用。模型可较好地预测野蔷薇根多糖的得率,响应面法对野蔷薇根多糖提取条件参数优化具有可行性。