旋转式生物反应器培养细胞因子诱导的杀伤细胞研究

目的采用旋转式生物反应器(rotating wall-vessel bioreactor,RWV)与传统的T-Flask培养瓶培养人外周血细胞因子诱导的杀伤(cytokine-induced killer,CIK)细胞,比较CIK细胞的增殖能力、细胞因子分泌情况、细胞杀伤力.方法提取健康志愿者的外周血,分离出外周单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),体外诱导成CIK细胞,分别接种到T-Flask培养瓶及RWV中培养.采用台酚蓝染色法检测细胞活率并绘制其生长曲线;ELISA法检测各组CIK细胞的IL-2,IFN-γ,TNF-α分泌情况;乳酸脱氢酶测定法检测CIK细胞对靶细胞的杀伤力.结果与传统的T-Flask培养瓶培养CIK细胞比较,RWV培养CIK细胞增殖数量明显多且生长力旺盛;使用RWV培养CIK细胞能使其分泌更多的IL-2,IFN-γ,TNF-α细胞因子;RWV组培养的CIK细胞对肿瘤细胞的杀伤力更强.结论RWV培养CIK细胞更能提高其增殖能力、细胞因子分泌能力及肿瘤杀伤活力,同时可解决传统细胞培养数量少、稳定性差、易污染、工作量大及周期长等问题,有效地降低临床治疗成本.