Study on the Determination Conditions of Lipase Activity and the Effects of Commercial Detergent Products

The activity of lipase was determined by alkaline titration method and the conditions for the determination of lipase activity were studied. The results showed that the lipase activity was stable when the volume fraction of olive oil was 25% and the temperature was at 40℃ with PH=7.5. Under the proper conditions, the effects of anionic and nonionic surfactants were investigated. The effect of nonionic surfactants on the activity of lipase was less than that of anionic surfactants. Finally, the analysis method was used to determine the activity of the lipase in the commercial detergent products. The results showed that the method can be used for the determination of lipase activity in both liquid detergent and laundry powder. However, the temperature and pH value of the detergent solution should be controlled strictly during the conduction of the determination.

Rqflex 法检测牛乳中脂肪酶的实验报告

本文重点介绍了Rqflex仪测定脂肪酶法,并简单介绍一些常规的方法。

三子养亲汤中11种成分含量同时测定及其胰脂肪酶抑制作用研究

目的同时测定三子养亲汤中3,6′-二芥子酰基蔗糖、西伯利亚远志糖A5、西伯利亚远志糖A6、阿魏酸、芥子酸、咖啡酸、木犀草素、原告依春、芹菜素、异鼠李素、原儿茶醛的含量,并考察其对胰脂肪酶的抑制作用。方法高效液相色谱-串联三重四级杆质谱(HPLC-QQQ-MS/MS)分析采用Halo-C 18色谱柱(2.1 mm×100 mm,2.7μm);流动相水(含0.05%甲酸)-乙腈(含0.05%甲酸),梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min;柱温25℃;电喷雾离子源;负离子扫描;多反应监测模式。采用分子对接进行模拟,对硝基苯酚法评价抑制作用。结果11种成分在各自范围内线性关系良好(R^(2)>0.9920),平均加样回收率85.79%~117.52%,RSD 0.78%~3.73%。3,6′-二芥子酰基蔗糖、咖啡酸、芥子酸和原儿茶醛与胰脂肪酶具有良好的亲和力,三子养亲汤、咖啡酸、芥子酸、原儿茶醛IC_(50)值分别为41.16 mg/mL、4.006 mmol/L、6.798 mmol/L、10.48 mmol/L。结论该方法稳定可靠,可为具有胰脂肪酶活性抑制作用的三子养亲汤质量控制提供理论基础。

微生物脂肪酶的研究与应用

脂肪酶是一类能够催化酯的水解反应以及在非水相体系中催化脂肪酸和醇类发生酯化反应的酶类。随着酶学技术的快速发展,微生物脂肪酶也受到了越来越多的关注。作为生物催化剂,脂肪酶一直以来都是生物技术领域中最重要的一类酶。本文探讨了脂肪酶的来源、理化性质、脂肪酶活力测定,同时对脂肪酶的非水相催化特性以及脂肪酶在食品工业,医药、洗涤剂、皮革、造纸和生物柴油工业领域中的应用进行了讨论。

脂肪酶活力测定方法及其在筛选产脂肪酶微生物中的应用

比较了罗丹明平板法、橄榄油乳化法、对硝基苯酚法测脂肪酶水解酶活和对硝基苯酚法测脂肪酶酯合成酶活4种常用的脂肪酶活力测定方法。结果表明,罗丹明平板法只适合脂肪酶活力的定性和初步定量判断,后3种方法适合于脂肪酶活力的定量检测,但只有对硝基苯酚法有较好的重现性。而且,脂肪酶水解酶活力和其合成活力无对应关系,所以在筛选产脂肪酶微生物时要选择合适的脂肪酶活力测定方法。也即,筛选产水解酶活的菌株应选择水解酶活测定方法,否则,选择酯合成酶活力测定方法。基于这一原则筛选到了预期产脂肪酶微生物。

改进铜皂-分光光度法测定脂肪酶活力

建立了一种改进的脂肪酶活力的检测方法。以乳化橄榄油为底物,用乙醇和盐酸终止酶反应,并使底物乳液破乳,用异辛烷萃取生成的脂肪酸,并用醋酸铜显色,通过铜皂的吸光度来测定生成的脂肪酸的量而得到脂肪酶的活力。主要研究了异辛烷萃取乳化体系中脂肪酸的条件,测定了脂肪酸的萃取百分率和该方法检测的线性范围。用改进的方法对两种脂肪酶的活力进行了检测,并与传统的滴定法进行了对比。结果表明,在优化的萃取条件下脂肪酸的回收率为83.68%,该方法的线性范围为吸光度(OD值)0.154～0.291。改进的铜皂-分光光度法测定结果的重复性优于滴定法。由于该方法的测定不受反应体系的缓冲性的影响,测得的酶活力-pH曲线更准确。

三种脂肪酶活力测定方法的比较及改进

比较了碱滴定法、对硝基苯酚法和铜皂法等三种常用的脂肪酶活力测定方法的测定时间、准确性和重复性。为对硝基苯酚法找到了有效的终止反应方法,改进的对硝基苯酚法具有检测快捷、结果稳定的特点。对铜皂法进行改进,用甲苯代替了苯,改进的铜皂法具有毒性小、结果稳定、重复性好的优点。

花生种子脂肪酶活力定量测定及其与储藏特性的相关性

对已有水稻脂肪酶活力比色测定方法进一步修改和优化,建立了花生脂肪酶活力定量测定方法,并确定取样量5mg、底物浓度30mgmL-1为最适试验条件,该方法具有精确性好、特异性强、重复性好等特点。利用该方法检测216份花生种质资源的脂肪酶活性,表明不同材料间差异极显著(P<0.001)。试验筛选出酶活力高低差异显著的材料10份(高低各5份),并以其中2份高脂肪酶活性和2份低脂肪酶活性材料进行高温、高湿人工加速老化试验,结果表明,随老化时间延长,高脂肪酶活性材料发芽率下降较快,而低脂肪酶活性材料发芽率下降较慢,花生脂肪酶活力与其种子活力呈负相关(相关系数为-0.8875)。该结果为进一步深入研究脂肪酶对花生储藏劣变的影响提供了参考。

植物源脂肪酶抑制剂研究进展

脂肪酶抑制剂通过抑制脂肪酶的活性,减少食物中脂类物质的消化和吸收,达到控制和治疗肥胖的目的。植物来源的天然产物化合物具有来源广泛、结构多样、特异性高、毒性低等特点,因而从植物中筛选安全有效的脂肪酶抑制剂成为研究热点。本文综述了脂肪酶活性测定方法以及植物来源的不同结构类型的脂肪酶抑制剂研究进展。

碱滴定法测定脂肪酶活力影响因素的研究及其在洗涤产品中的应用

采用碱滴定法测定脂肪酶活力,结果显示,在橄榄油体积分数为25%,温度为40℃,p H=7.5时酶活力较为稳定。在较佳条件下,考察了添加阴离子、非离子表面活性剂对测定脂肪酶活力的影响,实验结果表明,非离子表面活性剂对测定脂肪酶活力的影响较小。将该分析方法应用于市售洗涤产品中脂肪酶活力的测定,研究结果显示,方法可用于液体洗涤剂和洗衣粉中脂肪酶活力的测定,但需严格控制洗涤剂或洗衣粉溶液的温度及p H。

脂肪酶高产菌株的筛选及产酶条件优化

为获得高产脂肪酶菌株,对包括白地霉在内的数十种微生物进行了筛选。在采用油脂培养基进行初步筛选之后,用酸碱滴定法对菌株所分泌的脂肪酶活力进行测定,筛选获得了高产脂肪酶的白地霉菌株,其酶活力达10.79 U/mL;然后对该菌株的产脂肪酶培养基配方、pH值、温度、摇床转速等条件进行优化,得到最适产脂肪酶条件是:培养基配比的橄榄油2%、牛肉膏2%、蔗糖0.5%、(NH4)2SO40.1%,最优培养条件为pH值7.0、温度28℃、摇床转速225 r/min。

从猪胰制备甘油三酯测定用脂肪酶

从猪胰制取测定甘油三酯(TG)的脂肪酶,其活性大于2.7×10~4u/mg;比活为5.5×10~4u/mg 蛋白;酶作用的最佳 pH、最适反应时间及最适温度分别为7.5～10.0、15min 及37～50℃。聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳测得分子量为34700及20900;以橄榄油为底物的米氏常数为0.77%。

脂肪酶活力测定方法的改进

改进了传统测定脂肪酶活力的方法,探讨了脂肪酶的活力测定的最适应条件.改进后的方法不需要制备乳化液,采用了分光光度法测定生成的脂肪酸,提高了灵敏度.

谷物脂肪酶活测定方法的改进研究

对谷物脂肪酶活检测的国家标准方法中的样品提取、转移方面进行了改进,以期提高谷物脂肪酶活检测的可操作性。同时,对国标法和改进法的测定结果进行比较分析。结果表明,采用改进法与现行常规检测方法结果一致,其准确性和重复性更容易实现,减少了样品转移过程中的人为误差,是一种简便、高效的测定方法。

单环刺螠(Urechis unicinctus)幼体肠道消化酶活性的测定方法

探究了单环刺螠(Urechis unicinctus)幼体(平均体重(1.468±0.222)g)肠道蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶的测定方法、操作步骤、注意事项。蛋白酶测定采用Folin-酚法,其中建立的酪氨酸回归方程为y=15.487x-0.092 3(决定系数R2=0.999 2);淀粉酶测定采用淀粉-碘比色法,以0.08%的淀粉溶液为底物。脂肪酶测定采用聚乙烯醇橄榄油乳化液水解法(NaOH滴定法)。结果表明,单环刺螠幼体肠道蛋白酶活力、淀粉酶、脂肪酶活力分别为29.350±2.592、10.600±0.844、(5.266±0.224)U/mg prot。

4种消食中药的质量生物活性测定方法研究:消化酶种类选择与活力效价测定

目的为有效评控消食类中药的质量,研究基于消化酶活力检测的消食类中药生物效价测定方法并结合传统论述以探索消食类中药的质量控制方法。方法以山楂、六神曲、麦芽、谷芽为研究对象,筛选适宜消化酶种类;采用“质反应平行线法”建立基于酶活性的生物效价测定法,并进行方法学考察,测定10个批次各药物的生物效价;最后采用营养糊黏度测定法验证不同效价各药降低黏度的活性差异,评价酶活力效价与药物质量的相关性。结果蛋白酶、脂肪酶与淀粉酶活力测定方法的吸光度与产物质量浓度有良好线性关系,r2均大于0.99;结合实验结果与传统论述,山楂善消肉积且蛋白酶活力效价系数为效价综合系数中的最大值,六神曲善消谷麦酒积但脂肪酶活力效价系数为效价综合系数中最大值,麦芽谷芽善消淀粉食积且淀粉酶活力效价系数为效价综合系数中的最大值,故山楂、六神曲、麦芽和谷芽分别选取蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶做标准酶。实验所用供试品制备方法的量效曲线与阳性药胃蛋白酶片相似,重复性、精密度及中间精密度考察结果均符合要求;各药10批样品的效价差异较大,山楂蛋白酶活力效价为175.40~330.66 U/mg,六神曲脂肪酶活力效价为187.36~858.61U/mg,麦芽淀粉酶活力效价为6.18~19.35U/mg,谷芽淀粉酶活力效价为1.87~7.79U/mg。验证实验结果显示,各药样品对应效价越高,营养糊黏度降低越明显,表明酶活力效价与药物质量有较高相关性。结论结合药物传统论述所建立的基于消化酶活性的消食类中药生物效价测定方法可靠,可用于反映部分消化类中药的质量优劣,可为消食类中药的质量标准研究提供参考。