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萝卜抗真菌蛋白1(Rs-AFP1)在大肠杆菌中的融合表达及其对大丽轮枝菌抑制活性的研究(英文)
被引量:
3
1
作者
周向军
王仑山
+4 位作者
林芝萍
贾军伟
卢山
储昭庆
陈晓亚
《Acta Botanica Sinica》
CSCD
2000年第7期703-707,共5页
利用聚合酶链式反应 (PCR)获得了萝卜 (RaphanussativusL .)抗真菌蛋白 1(Rs_AFP1)基因编码区核苷酸序列。将整个阅读框架片段和去除了N_端信号肽序列的片段分别装入原核表达载体pET_32b(+)中 ,在大肠杆菌中表达 ,发现带有信号肽的Rs_A...
利用聚合酶链式反应 (PCR)获得了萝卜 (RaphanussativusL .)抗真菌蛋白 1(Rs_AFP1)基因编码区核苷酸序列。将整个阅读框架片段和去除了N_端信号肽序列的片段分别装入原核表达载体pET_32b(+)中 ,在大肠杆菌中表达 ,发现带有信号肽的Rs_AFP1不能在大肠杆菌中表达 ,而当这一序列去除后 ,表达出约 2 7kD的Rs_AFP1的融合蛋白。用凝血酶处理融合蛋白以去除N_端His.tag的部分序列 ,然后用处理后的融合蛋白进行了抑制真菌生长的实验。结果表明 ,在加入 0 .3g/L的Rs_AFP1的融合蛋白的培养液中 ,大丽轮枝菌 (VerticilliumdahliaeKleb .)的生长受到抑制 ,分别比加入对照细菌蛋白和PBS下降 5 7.5 %和 6 9.8% ;孢子的萌发也受到抑制。显然 ,细菌表达的融合蛋白对大丽轮枝菌的生长有抑制作用。
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关键词
大丽轮枝菌
rs-afp1
融合表达
抑制作用
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职称材料
农杆菌介导将抗真菌r-硫堇蛋白Rs-afp1基因导入水稻获得转基因植株
被引量:
5
2
作者
姚方印
李广贤
+3 位作者
杨磊
刘理梅
李中华
翟红梅
《山东农业科学》
2002年第3期20-21,共2页
利用农杆菌介导的高效遗传转化系统 ,将抗真菌r -硫堇蛋白Rs -afp1基因导入黄淮稻区主栽品种豫梗 6号的胚性愈伤组织 ,获得了 8株转基因植株 ,Gus染色和PCR分析表明 。
关键词
农杆菌介导
rs-afp1
基因
水稻
转基因植株
r-硫堇蛋白
稻瘟病
纹枯病
抗病育种
真菌
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职称材料
农杆菌介导AFP1基因转化小麦获得转基因植株
被引量:
5
3
作者
支大英
徐春晖
+3 位作者
薛哲勇
刘庆忠
姜鸿鸣
夏光敏
《山东农业科学》
2004年第3期14-16,19,共4页
以nptⅡ基因为筛选基因,利用农杆菌转化系统向普通小麦品种核生3号和99P的愈伤组织中转入白粉病抗性基因Rs-AFP1;获得抗生素抗性克隆数目分别为27个和24个,其中再生绿苗的克隆分别为2个和8个;PCR分析检测所得nptⅡ阳性植株分别为2株和6...
以nptⅡ基因为筛选基因,利用农杆菌转化系统向普通小麦品种核生3号和99P的愈伤组织中转入白粉病抗性基因Rs-AFP1;获得抗生素抗性克隆数目分别为27个和24个,其中再生绿苗的克隆分别为2个和8个;PCR分析检测所得nptⅡ阳性植株分别为2株和6株,AFP1基因阳性植株分别为1株和4株。
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关键词
普通小麦
农杆菌介导转化
转基因植株
rs-afp1
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职称材料
题名
萝卜抗真菌蛋白1(Rs-AFP1)在大肠杆菌中的融合表达及其对大丽轮枝菌抑制活性的研究(英文)
被引量:
3
1
作者
周向军
王仑山
林芝萍
贾军伟
卢山
储昭庆
陈晓亚
机构
中国科学院上海生命科学研究院植物生理研究所植物分子遗传国家重点实验室
兰州大学生命科学学院
出处
《Acta Botanica Sinica》
CSCD
2000年第7期703-707,共5页
基金
TheNationalScienceandHighTechnologyProgram ( 863
grantZ17_0 4_0 2 )
文摘
利用聚合酶链式反应 (PCR)获得了萝卜 (RaphanussativusL .)抗真菌蛋白 1(Rs_AFP1)基因编码区核苷酸序列。将整个阅读框架片段和去除了N_端信号肽序列的片段分别装入原核表达载体pET_32b(+)中 ,在大肠杆菌中表达 ,发现带有信号肽的Rs_AFP1不能在大肠杆菌中表达 ,而当这一序列去除后 ,表达出约 2 7kD的Rs_AFP1的融合蛋白。用凝血酶处理融合蛋白以去除N_端His.tag的部分序列 ,然后用处理后的融合蛋白进行了抑制真菌生长的实验。结果表明 ,在加入 0 .3g/L的Rs_AFP1的融合蛋白的培养液中 ,大丽轮枝菌 (VerticilliumdahliaeKleb .)的生长受到抑制 ,分别比加入对照细菌蛋白和PBS下降 5 7.5 %和 6 9.8% ;孢子的萌发也受到抑制。显然 ,细菌表达的融合蛋白对大丽轮枝菌的生长有抑制作用。
关键词
大丽轮枝菌
rs-afp1
融合表达
抑制作用
Keywords
Raphanus sativus_antifungal protein
1
(
rs-afp1
)
fungus
Verticillium dahliae
prokaryotic expression
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
农杆菌介导将抗真菌r-硫堇蛋白Rs-afp1基因导入水稻获得转基因植株
被引量:
5
2
作者
姚方印
李广贤
杨磊
刘理梅
李中华
翟红梅
机构
山东省水稻研究所
济宁市种子公司
出处
《山东农业科学》
2002年第3期20-21,共2页
文摘
利用农杆菌介导的高效遗传转化系统 ,将抗真菌r -硫堇蛋白Rs -afp1基因导入黄淮稻区主栽品种豫梗 6号的胚性愈伤组织 ,获得了 8株转基因植株 ,Gus染色和PCR分析表明 。
关键词
农杆菌介导
rs-afp1
基因
水稻
转基因植株
r-硫堇蛋白
稻瘟病
纹枯病
抗病育种
真菌
分类号
S511 [农业科学—作物学]
S435.111.4 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
农杆菌介导AFP1基因转化小麦获得转基因植株
被引量:
5
3
作者
支大英
徐春晖
薛哲勇
刘庆忠
姜鸿鸣
夏光敏
机构
山东大学生命科学学院
山东省果树研究所
烟台市农业科学研究院
出处
《山东农业科学》
2004年第3期14-16,19,共4页
基金
国家转基因专项J99-0 3 7
山东省重大项目SD990 3资助
文摘
以nptⅡ基因为筛选基因,利用农杆菌转化系统向普通小麦品种核生3号和99P的愈伤组织中转入白粉病抗性基因Rs-AFP1;获得抗生素抗性克隆数目分别为27个和24个,其中再生绿苗的克隆分别为2个和8个;PCR分析检测所得nptⅡ阳性植株分别为2株和6株,AFP1基因阳性植株分别为1株和4株。
关键词
普通小麦
农杆菌介导转化
转基因植株
rs-afp1
Keywords
Commom wheat (Triticum aestivum L.), transformation mediated by Agrobacterium tumefaciens, regenerated transgenic plant,
rs-afp1
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
S512.11 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
萝卜抗真菌蛋白1(Rs-AFP1)在大肠杆菌中的融合表达及其对大丽轮枝菌抑制活性的研究(英文)
周向军
王仑山
林芝萍
贾军伟
卢山
储昭庆
陈晓亚
《Acta Botanica Sinica》
CSCD
2000
3
下载PDF
职称材料
2
农杆菌介导将抗真菌r-硫堇蛋白Rs-afp1基因导入水稻获得转基因植株
姚方印
李广贤
杨磊
刘理梅
李中华
翟红梅
《山东农业科学》
2002
5
下载PDF
职称材料
3
农杆菌介导AFP1基因转化小麦获得转基因植株
支大英
徐春晖
薛哲勇
刘庆忠
姜鸿鸣
夏光敏
《山东农业科学》
2004
5
下载PDF
职称材料
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