合成抗孕酮新药RU-486中间体3,3-乙撑二氧-5α,10α及5β,10β-环氧-Δ^(9(11))-雌烯-17α(1-丙炔基)-17β醇的薄层分析

采用薄层色谱成功地分离了 3,3-乙撑二氧 - Δ5(1 0 ) ,9(1 1 ) -雌甾二烯 - 1 7α( 1 -丙炔基 ) - 1 7β醇的环氧化产物 3,3-乙撑二氧 - 5α,1 0α-环氧 -Δ9(1 1 ) -雌烯 - 1 7α( 1 -丙炔基 ) - 1 7β醇 (简称 Iα)和 3,3-乙撑二氧 - 5β,1 0β-环氧 -Δ9(1 1 ) -雌烯 - 1 7α( 1 -丙炔基 ) - 1 7β醇 (简称 Iβ) ,并对 Iα 和 Iβ进行了定性和定量分析 ,其结果在红外谱图、核磁实验中得到验证。

抗孕酮新药RU-486的合成研究——Ⅲ.3,3-乙撑二氧-△^(5(10),9(11))-雌甾二烯-17-酮的合成

本文报道了合成RU-486的中间体3,3-乙撑二氧-Δ5(10),9(11)-雌甾二烯-17-酮[Ⅰ]的制备。以乙二醇为缩合剂,选用三种不同的催化剂,分别对Δ4,9-雌甾二烯-3,17-双酮[Ⅱ]进行选择性缩合反应得到[Ⅰ]。用单因素变量法和正交法进行合成条件优选,使[Ⅰ]的收率由17～20%提高到65～69%。[Ⅰ]的结构经红外光谱、紫外光谱、元素分析和比旋度证实。

抗孕酮新药RU-486的合成研究——Ⅰ.3,3-乙撑二氧5α,10α-和5β,10β-环氧-△^(9(11))-雌烯-17酮的合成

用单过氧化邻苯二甲酸可以将3,3-乙撑二氧-5(10),9(11)-雌二烯-17-酮[Ⅳ]转变成5α,10α-和5β,10β-环氧化合物。其收率比为3.5:1～5.5:1。[Ⅱa]是合成RU-486[Ⅰ]的关健中间体。化合物[Ⅱa]和[Ⅱb]的结构经~1H-NMR谱和比旋度得到确定。

11β-[4-(N,N-二甲胺基)-苯基]-17α-(丙炔-1)-△^(4,9)-雌甾二烯-17β-羟基-3-酮的制造Ⅳ(RU-486)

本文报道了11β—取代17α—丙炔基甾体化合物的合成,并详述了丙炔气体制备的一种简便方法。17α—丙炔基的引入是 RU—486具有抗孕酮和抗糖皮质激素活性的重要基团之一。

抗孕激素RU-486与鼠卵巢类固醇受体的结合力

RU-486是一种类固醇,对孕酮和糖皮质激素诱发的反应具有强有力的拮抗特性。已证明此复合物可诱致鼠流产和猴来经,并使妇女流产和月经提前。RU-486的上述影响是对子宫孕酮受体起拮抗孕酮作用。鼠卵巢有孕酮、雄激素和糖皮质激素受体。作者选择研究抗激素 RU-486对卵巢受体的结合力的原因有二:其一,若 RU-486紧密地与卵巢受体结合,就有可能调节妊娠和周期性生殖变化的影响,至少部份直接影响卵巢而调节,其二,因类固醇对卵巢形态学和激素产生有直接影响。

In-Vitro Inhibition of Human Melanoma (BLM) Cell Growth by Progesterone Receptor Antagonist RU-486 (Mifepristone)

RU-486 is an abortifacient which is used to terminate early pregnancy. It acts by blocking progesterone receptor. In our earlier study with progesterone, RU-486 was used as a progesterone receptor antagonist to find out the mechanism of progesterone action on melanoma cells. Results indicated that the effect of progesterone was not mediated through progesterone receptor. In the course of experiments, it was observed that RU-486 by itself inhibited mouse melanoma cell growth. Further research work with RU-486 showed a dose dependent inhibition of human melanoma cell growth. The mechanism of inhibition of cell growth was due to apoptosis and this effect of RU-486 was neither mediated through progesterone receptor nor glucocorticoid receptor. This in-vitro study suggested that melanoma also could be a target for RU-486 action, apart from breast, ovary and prostate cancers.

抗早孕药RU-486对妇女的rRNA活性基因的影响

作者用银染技术对21名妇女服用RU-486前后的淋巴细胞染色体rRNA活性基因变化进行了研究。结果表明:服药前核仁组织区银染点(Ag-NOR)平均值为5.03±0.76/细胞,服药后为5.01±0.59/细胞;服药前核仁组织区银染联合数(Ag-AA)平均数为0.61±0.17/细胞,服药后为0.64±0.16/细胞。这两组数值经配对t检验处理,P>0.05,无显著性差异。

不同超剂量组RU_(486)对大鼠卵巢中细胞亚显微结构的作用

目的 :电镜下观察不同时间、不同超剂量组 RU486 对大鼠卵巢中细胞亚显微结构的影响 ,从形态学角度研究 RU486 避孕机制。方法 :给实验大鼠灌服不同超剂量 RU486 ,于不同时间取卵巢组织 ,制作电镜标本并观察。结果 :实验各组生长卵泡发育不良或闭锁 ,未见成熟卵泡和黄体 ,闭锁卵泡、间质腺增多 ,卵泡细胞、间质腺细胞内含大量脂滴、空泡、滑面内质网 ( SER)及次级溶酶体 ( s Ly) ,巨噬细胞、变异颗粒细胞内出现残余体和聚集成团的溶酶体 ( L y) ,其超微结构改变随用药时间延长而加重。结论 :使用不同超剂量 RU486 可抑制卵泡发育成熟及黄体形成 ,并对卵巢内部分细胞的细胞器有一定的损害。

RU486对体外大鼠垂体胞液孕激素受体的作用

Sprague-Dawley去卵巢雌性大鼠,经雌激素刺激6天后,取垂体制成胞液。以3~H-R5020为配基,用羟基磷灰石吸附已结合配基的受体分子来测定垂体胞液中孕激素受体的结合活性;由测得的饱和曲线Scatchard作图法计算孕激素受体和配基结合的平衡解离常数(Kd)等于1.8nM,最大结合位点为138fmoles/mg蛋白。RU486可抑制3~H-R5020与垂体胞液孕激素受体的结合,抑制是竞争性的。非标记的RU486、R5020或孕酮都可竞争3~H-R5020与孕激素受体的结合,三者的竞争能力无明显差异。本实验表明在离体情况下RU486可与垂体胞液孕激素受体相结合,其亲和力与R5020或天然配基孕酮相类似。

服用RU486及米索前列醇作为每月一次避孕药的研究

本研究旨在观察服用ＲＵ４８６及米索前列醇作为每月一次避孕药的有效性、安全性和可接受性。共接纳２４例对象，观察了８４个周期。用药方案为：预期月经来潮前一日服用ＲＵ４８６２００ｍｇ，４８ｈ后在家中服用米索前列醇４００μｇ。结果显示，妊娠率约为２２．６２％。１９个妊娠周期中有１３个周期完全流产（６８．４２％），２个周期不全流产（１０．５３％），４个周期继续妊娠（２１．０５％）。８４个观察周期中有６个周期出现２次阴道流血，１个周期出现３次阴道流血，７个周期出现周期延长。２４例对象中仅１例因乏力、嗜睡影响工作和生活而退出研究，其余仅极个别对象有恶心、下腹部疼痛、手麻等副反应，但都无需治疗。结果表明用本方案作为每月一次避孕药的效果和可接受性并不理想。

RU486代谢物和微量杂质的合成与鉴定

本文以RU486为起始物,经一步氧化去甲基反应,直接得到了11β-[4-(N-甲基-胺基)-苯基]-17α-丙炔基-4,9-雌二烯-17β-羟基3-酮和11β-[4-(胺基)-苯基]-17α-丙炔基-4,9-雌二烯-17β-羟基-3-酮。本法较国外专利报道的方法大为简化,而且避免使用一些难得的价格昂贵的试剂。用本法制得的样品,确证了国内外RU486样品中两个难以用纯化方法完全除去的微量杂质的化学结构,并提供RU 486质控、代谢等深入研究之用。

公雏鸡去除肾上腺后对地塞米松和RU_(486)的反应

应用电灼烧和强酸腐蚀的方法成功地对１０周龄公雏鸡实行了肾上腺去除术。在此基础上对完全去除肾上腺雏鸡给以外源性糖及皮质激素（ＧＣ）———地塞米松（Ｄｅｘ）２ｍｇ／ｋｇ·ｄ，可以逆转由于ＧＣ缺失造成的血糖降低和水盐代谢紊乱。对去除１２３肾上腺雏鸡给以ＲＵ４８６—ＰＶＡ５０ｍｇ／ｋｇ·ｄ，雏鸡血糖、血清钠、血清钾维持正常水平；虽然其血清ＡＣＴＨ浓度升高至１４６９４±７５６ＩＵ／Ｌ（Ｐ＜００１），但血清皮质酮并没有在高浓度ＡＣＴＨ刺激下大量分泌，而维持于９０４８—１０３１４ｎｍｏｌ／Ｌ的生理范围内。为在不受内源性ＧＣ干扰下建立鸡糖皮质激素受体（ＧＲ）阻断提供了实验动物模型。

RU486对硫酸皮质酮引起的头端延髓腹外侧区心血管神经元作用的影响

目的研究糖皮质激素（ＧＣ）的非基因组机制在交感神经活动调节中的作用。方法细胞外记录氨基甲酸乙酯麻醉的ＳＤ大鼠头端延髓腹外侧区（ＲＶＬＭ）被鉴定的心血管神经元的自发放电，观察微电泳硫酸皮质酮（Ｏ３ＲＴ对心血管神经元活动的影响，及其 ＧＣ受体拮抗剂 ＲＵ ４８６对ＣＯＲＴ导致神经元作用的影响。结果在ＲＶＬＭ共记录到３３个心血管神经元，微电泳硫酸皮质酮（ＣＯＲＴ）后２５（７６％）个神经元放电迅速加快，且具有剂量依赖性，余８个（２７％）心血管神经元自发放电没有变化；其中被ＣＯＲＴ兴奋的１２个单位微电泳ＲＵ４８６（糖皮质激素受体阻断剂）后神经元的基础放电没有明显变化（Ｐ＞０．０５），但能部分（９个单位）或完全（３个单位）阻断硫酸皮质酮导致的兴奋作用。结论Ｏ３ＲＴ对ＲＶＬＭ心血管神经元具有快速的兴奋作用，ＲＵ４８６并不改变ＲＶＬＭ心血管神经元的基础活动，但能部分或完全阻断ＣＯＲＴ导致的神经元兴奋作用。

RU 486对体外小鼠着床前胚胎的影响

本文研究了RU486对体外着床前不同时期小鼠胚胎的RNA聚合酶活性及糖蛋白合成的影响。RNA聚合酶活性以~3H-尿嘧啶核苷(~3H-尿苷)的掺入率为指标,糖蛋白合成以~3H-氨基葡萄糖的掺入量为依据。实验发现:10^(-7)M～10^(-5)MRU486使各期胚胎~3H-尿苷及~3H-氨基葡萄糖掺入降低(P<0.05～0.01);在10^(-6)MRU486处理同时加入10^(-7)M～10^(-5)M孕酮,则各期胚胎两种前体的掺入有不同程度的恢复(P<0.05)。实验结果说明RU486可直接作用于着床前小鼠胚胎,而且这种作用与孕酮相拮抗,为RU486抗早孕提供了一种理论依据。

不同剂量组RU_(486)对大鼠内分泌腺亚显微结构的影响

目的 :电镜下观察不同时间、不同超剂量组 RU4 86对大鼠内分泌腺细胞亚显微结构影响 ,从形态学方面探索 RU4 86避孕机制。方法 :给大鼠灌服不同剂量 RU4 86,于不同时间取垂体、甲状腺、肾上腺 ,电镜制样、观察。结果 :实验各组垂体促性腺激素细胞、促肾上腺皮质激素细胞粗面内质网 ( RER)、线粒体 ( Mi)、高尔基体 ( Go)均减少 ,溶酶体 ( L y)略增多 ,分泌颗粒变化不明显 ;肾上腺糖皮质激素细胞 Ly增多增大 ,巨噬细胞中出现巨大残余体 ,随用药时间延长 ,上述三种细胞超微病理改变有加重趋势。垂体和肾上腺其它细胞、甲状腺细胞亚微结构均与对照组无明显差别。结论 :无论用药时间长短 ,剂量大小 ,RU4 86均可以影响促性腺激素细胞。

RU486合并前列腺素终止早孕的效果及对性激素影响的研究

4O例早孕妇女,停经49天以内,给予RU 486合并前列腺素(Sulprostone)终止早孕。对象随机分为两组(每组20例)。组Ⅰ,口服RU 486 25mg2次/日×4天,在第四天上午肌注Sulprostone 0.25mg;组Ⅱ,RU 486 25mg2次/日×3天,在第三天上午肌注Sulprostone 0.25mg。对象必须从服药的第一天起连续四天(组Ⅱ三天)上午来门诊,此外第8、15及43天亦须来门诊,接受访视及取血,用以测定B-hCG、E_2、P、PRL及Cortisol等。检测结果,血清B-hCG及E_2水平在服药期间继续上升,但流产后迅即下降;PRL及Cortisol在服药期间及服药后,血清水平上下波动不大;P在服药期间水平未见上升,但流产后迅即下降。40例对象,不论服药三天或四天,均发生完全流产,无一例需要刮宫或输血。

RU 486处理后大鼠垂体前叶对GnRH反应的影响

本实验选用动情前期的雌性Sprague-Dawley 大鼠在GnRH 刺激之前不同时间(0,0.5,1,2,24,48h)先肌肉注射RU 486,剂量为2mg/kg 体重,大鼠麻醉后由外颈静脉插入套管,从套管中分两次(0及1h)注入GnRH 各100ng,随后分别不同时间采血,用放射免疫法测定血浆中的LH 含量。实验结果显示在GnRH 诱导后LH 分泌出现两次高峰,正常对照组大鼠与注射RU 486的实验组大鼠作比较,实验组的LH 分泌量在0,0.5,1,2h 与对照组比有明显的降低,P<0.05;24和48h 实验组与对照组比P>0.05无明显差异;实验进行到4h 后血浆中LH 的浓度都逐渐恢复到起始基准线所需的时间,RU 486实验组与正常对照组无显著性差异(P>0.05)。以上实验表明RU 486处理后会显著降低大鼠垂体对GnRH 的反应,而对LH 水平的恢复无明显影响。

高效液相色谱分析人血中RU486及其代谢产物

本文采用HPLC分析RU 486及其代谢产物。分析用200mm×3.5mm ODS/YWG柱(青岛海洋化工厂担体),流动相为甲醇:乙腈:水42:28:30(V:V:V),pH4.7,流速1ml/min,紫外检测为302nm。在此色谱条件下,能使RU 486及其三种代谢产物得到很好分离。四种化合物的标准曲线在100～2800ng/ml浓度范围内,线性的相关系数为0.999。RU 486和其代谢产物去单甲基衍生物(RU 42633),丙炔醇衍生物(RU 42698)不同浓度的回收率均达90%左右,另一代谢产物去双甲基衍生物(RU 42848)的回收率为60%左右,本方法已用于RU 486及其代谢产物的临床药代动力学研究。

RU_(486)阻断鸡糖皮质激素受体及其对糖代谢和ACTH分泌的影响

采用化学药物腐蚀法建立了鸡肾上腺的摘除方法,用竞争蛋白结合分析测得血浆总糖皮质激素(GCT)为38.44±9.50nm ol/L,显著低于正常鸡血浆GCT(93.50±5.78nm ol/L),并至少能维持72h,可以满足非GC依赖性生理试验的要求。给化学摘除肾上腺公鸡皮下注射GC拮抗剂RU486 缓释胶(50m g/kg),使外周血淋巴细胞糖皮质激素受体(GR)阻断率达74.93±9.59% ,而血浆GCT 维持正常水平,从而成功地建立了鸡非GC依赖性GR阻断模型。在此期间实验鸡ACTH 分泌增加,糖代谢维持正常。