正交法优选高粱泡叶水提物的提取工艺

目的:建立高粱泡叶鞣花酸含量测定方法并优选高梁泡叶水提物的最佳工艺。方法:在高粱泡叶鞣花酸含量测定方法建立的基础上,通过正交试验,以鞣花酸和浸膏提取率为测定指标,优选高粱泡叶的水提工艺。结果:色谱柱:WondaSil■-C18(5μm,4.6 mm×250 mm);流动相:2%磷酸水-乙腈;梯度洗脱程序:0~5 min,10%~15%B;25~30 min,19%~21%B;38~40 min;19%~10%B;检测波长:254 nm;洗脱时长:40 min;流速:1.0 mL·min^(-1);进样量:10μL;柱温:30℃。高粱泡叶水提物最佳提取工艺为10倍水,煎煮1.5 h,煎煮3次。结论:建立的高粱泡叶鞣花酸含量测定方法及水提工艺简便、可靠,为高粱泡叶后续的研究及开发提供数据支撑。

大孔吸附树脂对高粱泡鲜果红色素的吸附与洗脱性能

探讨了高粱泡果实红色素的提取条件及大孔吸附树脂对其吸附和洗脱特性．结果表明，高粱泡果实红色素的最适提取剂为酸性EtOH．3种大孔树脂中，X-5型树脂对高粱泡果实红色素的吸附和洗脱性能较好，吸附率达96．17％，解吸率为94．40％，适宜用作高梁泡果实红色素的分离、纯化；适当的色素液浓度、流速、NaCl质量分数及温度均可增大X-5型树脂对色素的吸附率，而用80％～95％EtOH作为洗脱剂，洗脱效果最好．

悬钩子类果实色素理化性质研究

比较了黑莓品种Boysen、Kiowa和高粱泡(Rubus lambertianus Ser.)果实色素的光谱特性和理化性质,主要包括光照、温度、pH、氧化剂和还原剂5个因素对三种色素水溶液稳定性的影响。结果表明,黑莓Boysen、Kiowa和高粱泡果实色素对光、热有较好的耐受性,对pH、氧化剂和还原剂较为敏感,其中Boysen色素的光稳定性较强;高粱泡色素的热稳定性较强;Kiowa的光和热稳定性均较差,耐氧化性较强。

3种悬钩子植物叶的营养成分及利用价值

为充分发掘和综合利用贵州悬钩子资源,采用原子吸收光谱和火焰原子吸收光谱等方法,研究了插田泡、粗叶悬钩子和高粱泡3种悬钩子植物叶的营养成分及利用价值。结果表明:插田泡叶的营养价值最高,氨基酸含量达6020 mg/100g,香气味觉氨基酸含量达3335 mg/100g,蛋白质、维生素C、粗纤维和脂肪含量依次为2758.59、2208.26、8.87 g/100g和5070.42 mg/100g;矿物质元素含量丰富。插田泡叶营养价值、香气味觉品质远高于青茶叶,且其中砷、汞、铅的含量均低于食品卫生标准的限量规定,但插田泡叶的营养价值远低于青饲料的营养要求。插田泡叶可作为悬钩子属植物药茶开发利用,但不能作为饲料开发利用。

高粱泡果实营养评价及其种子油脂肪酸组分的分析

分析测定了福建产的高粱泡果实营养成分及其种子油脂肪酸组分。结果表明 :其果实含总酸量高 ,达 3 37%,蛋白质含量为 6 81%,氨基酸为 6 33g/ 10 0 g .DW ,必需氨基酸占氨基酸总量的2 5 81%;SOD含量高达 2 75 0 3u/g .FW ;矿质元素含量丰富 ,尤其是Fe、Zn等 ;种子油以不饱和脂肪酸为主 ,其中亚油酸 (5 1 7%～ 5 2 2 %)、α 亚麻酸 (33 1%～ 34 8%)和油酸 (6 4 %～ 8 5 %)较丰富。此外 ,含丰富粗脂肪、糖类、维生素等营养物质。高粱泡资源丰富、营养价值和医疗保健作用高 ,具有较大的开发利用潜力。

高梁泡红色素及其稳定性研究

对高梁泡红色素的提取,及其对光、温度、pH值、氧化剂、还原剂等稳定性进行了研究。结果表明,pH值对高梁泡红色素的影响明显;在酸性条件下,该色素对光和热有较好的耐受性,有一定的耐还原性,但抗氧化性较差。该色素属水溶性花青苷类色素,可作为新型天然食用色素加以开发利用。

高粱泡组织培养技术

为了加快高粱泡的开发利用,以MS为基本培养基,以高粱泡的带芽茎段为外植体进行组织培养研究。结果表明:不同种类和浓度的激素对高粱泡不定芽增殖和生长的影响不同。最佳启动培养基为MS+0.5mg·L-16-BA,最佳增殖培养基为MS+6-BA0.5mg·L-1+NAA0.1mg·L-1,最佳生根培养基为1/2MS+0.05mg·L-1NAA。

食品添加剂和金属离子对高粱泡红色素稳定性的影响

探讨了5种常用食品添加剂和7种金属离子对高粱泡红色素稳定性的影响。结果表明：葡萄糖、蔗糖和苯甲酸钠对高粱泡红色素稳定性无不良影响，其中葡萄糖、蔗糖有不同程度的增（护）色效果；柠檬酸能显著提高色素的稳定性；而VitC能促进色素的氧化降解，有明显的破坏作用。金属离子中，Na+、Mg2+、Al3+、Zn2+等对高粱泡红色素稳定性无影响，且有一定增色作用；较高浓度（≥0.0025mol/L）Mn2+有一定不良影响，而Cu2+、Fe3+则有明显的破坏作用。

高粱泡叶绿体基因组特征分析

【目的】解析高粱泡(Rubus lambertianus)叶绿体基因组特征。【方法】采用高通量测序技术对高粱泡叶绿体基因组进行测序,经组装和注释后,对其叶绿体基因组进行结构、基因组成及密码子偏好性等特征分析,并使用maximum likelihood法构建高粱泡与48个悬钩子属及2个路边青属植物的系统发育树。【结果】高粱泡叶绿体基因组结构为经典四段式结构,其大小为156266 bp,总GC含量为37.2%,大单拷贝区和小单拷贝区长度分别为85849和18855 bp,反向互补重复区长度为25781 bp,共注释131个基因,包含86个蛋白质编码基因、37个tRNA基因和8个rRNA基因。高粱泡叶绿体基因组密码子中有33个以A、U结尾,18个密码子确定为最优密码子;ENC-plot等绘图分析揭示其密码子偏好性更多地受自然选择影响。系统发育树表明:高粱泡与棕红悬钩子亲缘关系最近,其次是蛇泡筋和锈毛莓。【结论】高粱泡的叶绿体基因组相对较大,且较为保守,并与棕红悬钩子亲缘关系最近。研究结果可为高粱泡乃至悬钩子属植物叶绿体基因组系统进化分析提供重要的理论参考。

外源植物激素、冷湿层积和变温处理对悬钩子属光滑高粱泡种子休眠与萌发的影响

光滑高粱泡(Rubus lambertianus var.glaber)是悬钩子属优良种质资源之一,极具开发利用潜力,然而其种子所具有的休眠特性在一定程度上限制了该种质资源的选育种等工作,因此,探明其休眠原因并找到解除休眠的有效方法具有重要意义。本研究通过变温处理、外源植物激素处理和冷湿层积处理探讨了光滑高粱泡种子的休眠原因及休眠解除方法。结果表明:15℃/25℃和20℃/30℃变温处理可有效解除光滑高粱泡种子休眠并促进其萌发,最终平均萌发率均达95%以上;外源GA3和6-BA处理对其种子休眠未显示出显著性影响;冷湿层积处理在一定程度上显著提高了光滑高粱泡种子在10℃和15℃恒温条件下的平均萌发率,但对其在20℃及其以上恒温条件下的萌发未显示出显著性影响。因此,光滑高粱泡种子很可能为浅生理休眠类型,并且最佳休眠解除方法为15℃/25℃变温条件下处理20d以上。

四种悬钩子属植物不同部位总皂苷含量的比较

[目的]比较4种悬钩子属药用植物茅莓、蓬蘽、高粱泡和红腺悬钩子不同部位总皂苷含量。[方法]采用比色法测得4种药用植物不同部位总皂苷的含量。[结果]茅莓不同部位总皂苷平均含量分别为:根为8.71%,叶为1.65%,茎为1.58%;高粱泡不同部位总皂苷平均含量分别为:根为3.33%,叶为1.23%,茎为0.86%;蓬蘽不同部位总皂苷平均含量分别为:根为1.59%,叶为1.41%,茎为1.01%;红腺悬钩子不同部位总皂苷平均含量分别为:根为1.64%,叶为1.18%,茎为0.86%。[结论]不同植物其总皂苷含量依次为茅莓>高粱泡>蓬蘽>红腺悬钩子;4种植物不同部位总皂苷含量依次为根>叶>茎。

高粱泡的生长调控与结实状况

高粱泡(Rubus lambertionus Ser.)是一种有利用价值的野生果树资源。其优点为:(1)结果早,产量高,亩产量可达500kg以上;(2)适应性广,耐瘠薄,是开发利用低山丘陵的优良资源植物;(3)果实营养丰富,酸味纯正,尤其是所含红色素稳定性好,是加工果汁饮料的优质添加剂;(4)果实采收期在11月中旬到12月底,此时气温低,有利于浆果加工和贮藏,并可利用农闲季节的劳动力。上述特点表明,高粱泡有很好的开发利用前景。但本种在野生状态下蔓生性强,多刺,并具有枝顶生根的习性,因而树形紊乱而松散,栽培时搭架困难,植株占地面积大,而单位面积产量不易提高。为了便于操作管理和提高产量,减少栽培成本,增进经济效益,我们于1990～1991年进行了生长和株形调控试验,

不同因素对高粱泡扦插生根的影响

[目的]开展高粱泡扦插繁殖试验。[方法]采用正交试验设计方法,以植物生长调节剂、扦插基质、插穗类型和处理时间为影响因子,开展高粱泡扦插繁殖试验。[结果]植物生长调节剂处理高粱泡插穗,插穗生根率、平均根数、平均根长、生根质量均明显高于清水对照组。萘乙酸(NAA)处理对高粱泡插穗生根率具有明显的促进作用。插穗类型对高粱泡生根率、平均根数、生根质量的影响最大,而扦插基质对高粱泡平均根长的影响最大。从总的生根质量来看,当插穗类型为顶芽茎段、扦插基质为菜园土、萘乙酸(NAA)浓度为300mg/L、处理时间为2h时,高粱泡无性繁殖的生根效果最好。[结论]该研究为高粱泡种苗提供了一种高效的繁殖方法。

高粱泡无性扦插繁殖方法研究

为了探究高粱泡无性扦插繁殖的最优方法,采用正交试验法,选取植物生长调节剂、扦插基质、插穗类型和处理时间等为影响因子,开展高粱泡扦插繁殖试验。结果表明:在湖南地区高粱泡只适合在冬季(11月至翌年1月)扦插,其他季节几乎全部死亡;插穗类型对高粱泡生根质量的影响达到显著水平(P<0.05),生根粉(ABT)对高粱泡成苗率具有明显促进作用;从总的生根质量来看,当ABT浓度为300 mg/L、插穗为带叶茎段、扦插基质为生黄泥、处理时间为6 h时,高粱泡的生根效果最好。

高粱泡叶中异槲皮素TLC鉴别与HPLC含量测定研究

目的 通过建立高粱泡叶药材中异槲皮素活性成分的薄层鉴别(TLC)及高效液相色谱分析方法(HPLC)测定槲皮素含量。方法 70%乙醇为溶剂超声提取高粱泡叶中异槲皮素,以乙酸乙酯∶甲酸∶水∶氨水(18∶2∶1∶0.5)为展开剂于聚酰胺薄膜上展开,3%三氯化铝乙醇溶液为显色剂,105℃烘3 min, 365 nm下检视。采用HPLC,以异槲皮素为对照品,色谱柱为Agilent SB-C18柱(5μm, 4.6 mm×150 mm),以乙腈为流动相(B),以水(含2%磷酸)为流动相(A),梯度洗脱,洗脱程序如下:0~2 min, 10.0%~15.0%B;2~22 min, 15.0%~19.5%B;22~26 min, 19.5%~21.0%B;26~30 min, 21.0%~20.0%B;30~35 min, 20.0%~10.0%B;35~45 min, 10.0%B。柱温30℃,检测波长360 nm,流速1.0 mL/min。结果 高粱泡叶中异槲皮素在紫外灯下出现明显斑点。异槲皮素2~20μL范围内呈良好的线性关系,相关系数(r)为1,平均回收率(n=9)分别为95%,99%,103%,RSD分别为1.0%,0.8%,0.6%。结论 本实验所建立的高梁泡叶药材异槲皮素含量测定方法简便快速、准确可行,通过对高粱泡叶薄层色谱及含量测定方法的建立,为后期高粱泡叶的应用开发奠定相关基础。

高粱泡叶化学成分的UHPLC-Q Exactive Focus MS/MS分析

目的采用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱法(UHPLC-Q Exactive Focus MS/MS)对高粱泡叶的化学成分进行快速识别和鉴定。方法选择高粱泡叶的80%乙醇提取液作为供试品溶液,采用ACE Ultracore2.5 SuperC18(100 mm×2.1 mm,0.5μm)色谱柱(2.1 mm×150 mm,2.6μm),流动相乙腈(C)-0.1%甲酸水溶液(B)梯度洗脱,流速0.3 mL/min,柱温40℃;质谱分析采用加热电喷雾离子源(HESI),正、负离子模式扫描,扫描范围100~1500 m/z。结果共鉴定出了61个成分,包括游离氨基酸、酚酸类、黄酮类、有机酸类、糖苷类及其他类。结论该方法可系统、准确、快速地对高粱泡叶中化学成分进行定性分析,可为高粱泡叶药效物质研究及质量评价提供重要依据。

高粱泡叶治疗Ⅱ型糖尿病的分子作用机制的网络药理学研究

目的:通过网络药理学方法研究,预测高粱泡叶治疗Ⅱ型糖尿病的潜在分子作用机制。方法:通过Gene Cards数据库检索Ⅱ型糖尿病相关靶点;建立“高粱泡叶-化学成分-靶点”作用网络,通过Metascape数据库对交集靶点进行GO功能富集分析和KEGG通路富集分析,运用AutoDock及Pymol对度值靠前的靶点与对应活性成分进行分子对接验证。结果:筛选出高粱泡叶12个成分和169个预测靶点,2026个疾病靶点;通过Venny2.1在线分析,得到73个共同靶点。GO富集分析得到蛋白丝氨酸/苏氨酸/酪氨酸激酶活性、成纤维细胞增殖的正调控、胰岛素结合、血管内皮生长因子激活受体活性等多种生物学过程和癌症的途径、PI3K-Akt信号通路、ErbB信号通路等21条信号通路。分子对接结果显示筛选的主要活性成分与其对应靶蛋白均具有较好的结合活性。结论:高粱泡叶通过众多靶点、多途径、多通路治疗Ⅱ糖尿病。该研究为高粱泡叶的后期开发利用奠定了相关理论基础。

高粱泡叶中毛蕊花糖苷的TLC鉴别和HPLC含量测定

目的:以毛蕊花糖苷为指标成分,建立高粱泡叶中的毛蕊花糖苷TLC鉴别和HPLC含量测定的方法。方法:使用TLC鉴别高粱泡叶中的毛蕊花糖苷成分;使用HPLC测定高粱泡叶中毛蕊花糖苷的含量。结果:TLC鉴别:以聚酰胺薄膜为薄层板,乙酸乙酯-甲苯-甲酸-甲醇(10:1.5:1:4)为展开剂,3%三氯化铝乙醇溶液为显色剂,置紫外光灯(365 nm)检视,所得薄层色谱分离效果和显色效果佳,斑点清晰。HPLC含量测定:色谱柱为WondaSilC18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相:2%磷酸水溶液(A)-乙腈(B),梯度洗脱,检测波长330 nm,柱温30℃,流速1.0 mL/min,进样10μL,结果表明毛蕊花糖苷在0.2368~0.4736μg线性关系良好(R=0.9997),加样回收率为98.5%,RSD为2.70%。结论:通过建立高粱泡叶中毛蕊花糖苷TLC鉴别和HPLC含量测定的方法,能够准确定性和定量分析高粱泡叶中毛蕊花糖苷,该方法操作简便快速,稳定可靠,专属性强,为其质量标准研究提供参考,也为其后续开发提供理论依据。