基于网络药理学和实验验证的蒙药如达-6治疗胃溃疡作用机制研究

目的:通过网络药理学和动物实验,探讨蒙药如达-6治疗胃溃疡的潜在活性成分、核心靶点和作用机制。方法:利用TCMSP、SwissTargetPredition、BATMAN-TCM、GeneCards、OMIM、PharmGkb、TTD和Drugbank数据库预测和筛选如达-6潜在活性成分及其治疗胃溃疡靶点。利用STRING数据库进行蛋白-蛋白(Protein-protein interaction,PPI)互作分析,使用Metascape数据库进行GO功能注释和KEGG通路富集分析。通过Cytoscape3.8.0软件绘制PPI网络和“成分-靶点”网络。建立吲哚美辛诱导的胃溃疡大鼠模型,观察如达-6对胃溃疡大鼠的胃保护作用,再利用q RT-PCR方法检测关键靶点的mRNA表达水平。结果:共筛选出如达-6的58个潜在活性成分和137个治疗胃溃疡靶点。通过PPI网络分析得到STAT3、PIK3CA、SRC、RELA、TP53、MAPK1、AKT1、JUN、CTNNB1和PTPN11等10个核心靶点;通过“成分-靶点”网络分析得到槲皮素、木犀草素、山柰酚、β-谷甾醇、豆甾醇、异鼠李素、华良姜素、5-羟基-7-甲氧基-2-(3,4,5-三甲氧基-苯基)色酮、3-甲基樟脑酚以及N-(2,5-二甲氧基苯基)-4-甲氧基苯甲酰胺等10个关键成分。功能富集分析显示,如达-6可能通过癌症的途径、人巨细胞病毒感染、PI3K/Akt信号通路、癌症中的蛋白聚糖、脂质与动脉粥样硬化以及MAPK等信号通路发挥抗胃溃疡作用。实验验证结果表明,如达-6对吲哚美辛诱导的胃溃疡大鼠具有预防性保护作用,可缓解胃组织病理学改变,并增加胃组织PIK3CA、TP53、MAPK1和AKT1的mRNA表达水平(P<0.05)。结论:通过网络药理学分析和实验验证,初步揭示了蒙药如达-6通过多成分、多靶点发挥抗胃溃疡作用。

高效液相色谱法测定蒙药如达-6中栀子苷的含量

目的：建立蒙药如达-6的质量标准.方法：用高效液相色谱法对处方中栀子有效成分栀子苷进行定量分析.采用VP-ODS（150L＊4.6）柱,流动相：乙腈-0.1%磷酸水溶液（15：85 V/V）,检测波长：238nm,流速：1.0ml.min^-1.结果：栀子苷进样量在0.14-0.69μg范围内与峰面积线性关系良好（r=0.9997）.平均加样回收率为102.7%（RSD=0.54%）.结论：本试验方法即先进又简便,结果准确可靠,为该制剂的质量标准提供了可靠依据.

蒙药如达-6中胡椒碱的含量测定

目的:建立蒙药如达-6中胡椒碱的含量测定方法。方法:采用RP-HPLC检测方法,色谱柱为Accusil-C18柱(250mm×4.6mm,10μm),流动相为甲醇-水-三乙胺(75∶25∶0.4),流速:1.0mL·min-1,检测波长343nm,外标法定量。结果:胡椒碱组分峰与其他组分峰达基线分离,浓度在0.0408~0.6528μg范围内;峰面积值与进样量呈良好的线性关系(r=0.9996),加样回收率为97.9%,RSD=0.61%(n=9)。结论:该方法简便准确可靠,可作为本品质量控制方法。

HPLC测定如达-6中木香烃内酯和去氢木香内酯的含量

目的建立如达-6中木香烃内酯和去氢木香内酯的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法,Chrom Core 120-C_(18)(4.6×250 mm,5μm)色谱柱,甲醇-水(65:35)为流动相;流速1.0 ml/min;柱温30℃;进样量为20μL;检测波长为225 nm。结果木香烃内酯和去氢木香内酯分别在0.399-7.984μg(r=0.9993)、0.527-10.536μg(r=0.9999)范围内呈现良好的线性关系。对供试品进行精密度试验结果显示,木香烃内酯和去氢木香烃内酯的RSD分别为0.57%<和0.89%。对供试品进行稳定性试验结果显示,木香烃内酯和去氢木香内酯的RSD分别为1.02%<和1.13%。木香烃内酯和去氢木香烃内酯的平均加样回收率分别为98.12%、98.53%,二者的RSD分别为1.80%、1.42%。结论用高效液相色谱法测定如达-6中木香烃内酯和去氢木香内酯的含量具有专属性、精密度、稳定性良好等优点。