固定化酵母不对称水解布洛芬乙酯制备S（＋）－布洛芬

用多种固定化载体对含有不对称水解布洛芬酯的脂肪酶的丝孢酵母进行固定化。海藻酸钙、卡拉胶、聚丙烯酰胺凝胶和ＰＶＡ固定化酵母后，酶活力回收分别为６％、１６％、１８％和７％；用自制的高脱乙酰度、高分子量的壳聚糖，通过成囊装置包埋酵母细胞，并用戊二醛交联，制得直径１．０ｍｍ左右的固定化酵母细胞壳聚糖多孔微球，酶活力回收达８０％以上，操作半衰期７５天以上，而且每次反应所产生的布洛芬的比旋光度均为［α］２０Ｄ＝＋５５°左右。固定化酶的最适温度从未固定化时的３５℃提高到４５℃。每克干重的壳聚糖可固定化１～５倍干重的酵母，固定化壳聚糖微球有较高机械强度。

S-布洛芬印迹聚合物微球的制备及应用

以S-布洛芬为模板,丙烯酰胺（AM）为功能单体,二乙烯基苯（DVB）为交联剂,在甲苯-乙腈的混合溶剂中,采用沉淀聚合法制得粒径为3~6μm的印迹聚合物微球。将印迹聚合物微球用作高效液相色谱（HPLC）固定相,以乙腈为流动相,通过拆分外消旋布洛芬及分离其类似物,评价分子印迹聚合物的特异识别性能;研究了流动相中乙酸含量、流速对拆分能力的影响;通过测定分离过程中焓变、熵变及自由能的变化,对分子印迹聚合物的分离过程做了详细的解释。

S-布洛芬磁性分子印迹膜的吸附及拆分性能

以S-布洛芬为模板分子、3-氨丙基三乙氧基硅烷为功能单体、正硅酸乙酯为交联剂,采用溶胶凝胶法成功制备了对S-布洛芬具有特异选择识别功能的磁性分子印迹聚合物,并且分别采用红外(IR)光谱、扫描电镜(SEM)、X射线粉末衍射(XRD)对其结构进行了表征.通过紫外(UV)光谱研究了其对S-布洛芬的吸附性能,并且建立了高效液相色谱(HPLC)手性流动相法研究其对布洛芬的拆分.结果表明,该磁性分子印迹聚合物具有良好的磁响应性,在外加磁场下可实现快速分离;S-布洛芬分子印迹复合膜对S-布洛芬具有较好的选择结合性,其结合量达到68.3mg/g;每100mg复合膜可使外消旋布洛芬的分离度增加2.1%.

手性药物(S)-布洛芬氢键自组装印迹聚合物识别机理

以含有单一结合基团的手性药物(S)-布洛芬作为模板分子,制备了系列印迹聚合物.采用紫外-可见光谱和红外光谱对印迹及识别机理进行了研究.结果表明,模板分子与功能单体分别通过形成蓝移氢键和红移氢键完成预组装过程和再识别吸附过程,且形成了主客体配比为1∶1的配合物.等温吸附实验结果表明,印迹聚合物对模板分子表现出明显的选择性吸附,特异性吸附容量为37.92μmol/g,印迹指数为3.06,且印迹聚合物内特定的三维空间结构对其特异性吸附性能具有显著影响.由手性分离实验考察了印迹聚合物的拆分性能,其对(R)-布洛芬的分离因子为1.79.

离子束注入提高Trichosporon lactis T立体拆分布洛芬水平的研究

以从土壤中分离筛选到的可立体选择性水解布洛芬乙酯生成S-布洛芬的菌株Trichosporon lactis T为出发菌株，对其进行能量30KeV，剂量1×10^15-5×10^15 ions／cm^2的低能N^＋注入，筛选立体选择性水解布洛芬乙酯活性高的诱变株。菌株T．1actis T，在4×10^15 ions／cm^2的诱变剂量下突变率最高，正向和负向突变率分别达32．9％和37．1％，因此选定该荆量为T．lactis T的最佳N^＋离子注入剂量。经离子束诱变，通过初筛和复筛，共筛选到7株水解布洛芬乙酯的高产菌株，其中诱变株K1培养24h时酶活力比出发菌株T高50％，且具有较好的遗传稳定性。将菌株K1和出发菌株T培养24h，分别加入布洛芬乙酯水解24h，二者水解布洛芬乙酯生成S-布洛芬旋光度均为＋54．1°，对映体过量值ee％均为98％，K1菌株水解的产量达6．96g／L，而出发株仅为4．24g／L。

S-布洛芬的合成进展

布洛芬化学名称为4-异丁基-2-苯丙酸,本品具有镇痛、抗炎、解热等功效,临床上广泛用于治疗关节炎、咽喉炎、支气管炎及骨节炎等疾病。尽管本品有一个光学活性中心,但目前临床上使用的主要为外消旋体。研究表明,只有S构型的对映体具有抗炎的特性,单独使用S-布洛芬的药效比外消旋体更高,且能大大降低其副作用,引起了国内外学者的广泛关注。基于此,本文将重点介绍S-布洛芬的合成进展。

手性拆分法制备雷美替胺关键中间体(S)-2-(1,6,7,8-四氢-2H-茚并[5,4-b]呋喃-8-基)乙胺

以(S)-布洛芬为拆分剂,对(R,S)-2-(1,6,7,8-四氢-2H-茚并[5,4-b]呋喃-8-基)乙胺进行拆分,获得雷美替胺的关键中间体(S)-2-(1,6,7,8-四氢-2H-茚并[5,4-b]呋喃-8-基)乙胺,ee值99%,总收率60%,其结构经~1H NMR和HR-MS(ESI)确证。

光学对映体(S)-(+)-布洛芬的合成──1.光学活性(S)-乳酸酯及其相关物的制备

以光学活性（S）-乳酸为原料、硫酸催化下分别与甲醇、乙醇反应，生成相应（S）-乳酸甲酯及乙酯，并与对甲苯磺酞氯反应，生成0-对甲苯磺酰-（S）-乳酸甲酯及乙酯，再与异丁基苯进行Friedel－Crafts烷基化反应，得2－（4-异丁基苯基）丙酸酯，水解后即为（S）-布洛芬。这一合成方法反应步骤少、光学收率高，被认为是制备（S）-布洛芬十分有效的方法。本文是这一研究的第一部分，主要考察了酯化反应条件对合成（S）-乳酸甲酯及乙酯的影响并确定了最佳反应条件，其中合成的（S）-乳酸甲酯的收率达67．4％，光学纯度90％，合成（S）-乳酸甲酯及乙酯的收率85％－92％。

S-(+)-布洛芬衍生物的合成

一些非甾体抗炎药可减少阿尔茨海默症脑内老年斑的形成和炎症,但其长期服用会产生严重的胃肠道副作用。将S-(+)-布洛芬与L-氨基酸连接,设计了一系列布洛芬衍生物。以S-(+)-布洛芬为原料,与草酰氯反应生成酰氯,再与L-氨基酸反应,共合成了5个标题化合物,其结构均经1HNMR、IR和HR-MS确证。

S-布洛芬印迹复合膜的吸附及拆分性能

以聚偏氟乙烯(PVDF)微孔滤膜为基膜,S-布洛芬为模板分子,丙烯酰胺为功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂,采用热引发表面自由基聚合的方式制备了S-布洛芬印迹复合膜,并研究了其对布洛芬外消旋体的吸附及拆分性能。结果表明,该印迹膜对S-布洛芬具有一定的特异性吸附能力,当布洛芬异构体浓度在0.1～0.5mmol/L范围内逐渐增大时,吸附量也逐渐增大,吸附选择性因子则由1.68降至1.14;该膜对布洛芬异构体具有一定的拆分能力,渗透实验进行7 h,膜对R-布洛芬及S-布洛芬的渗透量分别为0.378和0.313μmol/(cm2.h),分离因子可达到1.21。

酶促酯化拆分-化学消旋串联法制备(S)-布洛芬

以(±)-布洛芬为原料、南极假丝酵母脂肪酶B(CALB)为催化剂,通过对映选择性酯化反应拆分布洛芬,对醇的种类及用量、反应介质、底物物质的量比、酶用量、干燥剂种类及添加量、温度、时间进行了优化。在1 mL环己烷、0.0206 g(0.1 mmol)(±)-布洛芬、0.0444 g(0.6 mmol)异丁醇、添加量为40 g/L 5A分子筛、15 mg CALB、温度60℃、时间48 h的条件下,以56%的收率、100%的对映体过量值得到了纯的(S)-布洛芬。接着对上述拆分时生成的(R)-布洛芬异丁酯进行酸性水解;然后以二异丙基氨基锂为催化剂,对水解生成的(R)-布洛芬进行化学消旋得到(±)-布洛芬,再进行酶促酯化拆分。该酶促酯化拆分-化学消旋串联法可循环进行多次,从而提高(±)-布洛芬的利用率。

一种应用催化不对称硼氢化反应合成S-布洛芬的新方法

以4-异丁基苯乙酮为原料,发展了一条简洁的S-布洛芬不对称合成方法。经4步反应得到具有光学活性的S-布洛芬,光学纯度e.e.达到66%,总收率为61%,其关键步骤为一步催化不对称硼氢化1,1-二取代末端烯烃。

右旋布洛芬栓剂的Ⅱ期临床研究

目的 :评估右旋布洛芬栓剂的疗效和安全性。方法 :术后疼痛病例 1 0 3例 ,发热病例 6 0例 ,各随机分为右旋布洛芬栓剂组和布洛芬栓剂组 ,每次 1栓 ,每日 1次 ,连用 3d ,评价二者疗效与观察二者的不良反应。结果 :右旋布洛芬组给药后前 4h疼痛强度差、总疼痛强度差、疼痛缓解度及降温幅度均高于布洛芬组。不良反应两组无统计学意义。结论 :右旋布洛芬栓剂解热、镇痛疗效确切 ,较布洛芬起效更快 ,作用更强 ,不良反应未增加 。

布洛芬立体拆分菌株的筛选与离子束诱变选育

在从土壤中分离到的 15 4个菌株中 ,通过筛选及旋光度的测定得到立体选择性水解布洛芬乙酯生成S 布洛芬的菌株CandidasorboxylosaT2P。用低能离子束诱变的方法得到了几株布洛芬乙酯水解活性提高的突变菌株 ,用 4× 10 5ion/cm2 剂量的低能离子束诱变菌株CandidasorboxylosaT2P可提高S 布洛芬的产量2 0 %左右。用菌株CandidasorboxylosaT2P的培养物催化水解布洛芬乙酯所得产品的外观、熔点、旋光度和红外光谱等各项检测指标与Sigma公司的标准品S 布洛芬基本一致 ,这表明该菌株具有提高S

右旋布洛芬混悬剂人体相对生物利用度

目的:研究右旋布洛芬混悬剂与片剂的生物等效性。方法:采用随机交叉试验设计,选择20名健康志愿者单剂量口服两种制剂400mg,采用HPLC-UV法测定其血药浓度。结果:单剂量口服右旋布洛芬混悬剂和参比片,测量AUC0-12分别为(118.1±28.4)mg.L-1.h和(117.6±19.7)mg.L-1.h,AUC0-∞分别为(119.2±29.0)mg.L-1.h和(118.6±19.7)mg.L-1.h,Cmax(32.9±6.8)mg.L-1和(35.7±5.1)mg.L-1,tmax分别为(1.4±0.7)h和(1.5±0.7)h。右旋布洛芬混悬剂对片剂的相对生物利用度为(102.0±24.1)%。结论:两种制剂的AUC和Cmax数值经对数转换后均落在置信区间范围内,说明混悬剂与参比片生物等效。

微生物酶催化布洛芬乙酯的不对称水解

从７００余株微生物中筛选到一株红酵母（Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａｓｐ．）ＬＹ－９５，具有高度选择性水解布洛芬乙酯的能力。该酵母菌ＬＹ－９５在最适摇瓶发酵的培养条件下，（Ｓ）－（＋）－布洛芬产率最高达５．１６ｇ／Ｌ，ｅｅ％为９０％。

右旋布洛芬/盐酸改性蒙脱土的制备及体外释放性能

为了提高右旋布洛芬的载药量,并探索载药复合物在不同释放介质中的释放规律,本文以盐酸改性蒙脱土为药物载体,用溶液插层法将右旋布洛芬负载于酸化后的蒙脱土上,制得右旋布洛芬/酸改性蒙脱土复合物[S（＋）-IBU/acid-MMT],利用XRD、BET、SEM对蒙脱土及S（＋）-IBU/acid-MMT进行了结构表征,筛选出最佳酸处理质量分数;采用透析法对S（＋）-IBU/acid-MMT进行了体外释放实验。结果表明：经酸改性后蒙脱土的结构发生了改变,当盐酸质量分数为15%时,蒙脱土的比表面积达到最大值246 m2/g,比改性前提高了10.7倍。上载右旋布洛芬后,蒙脱土的载药量最大可达352.4 mg/g,比改性前提高了1.1倍,体外释放实验表明,S（＋）-IBU/acid-MMT的累积释药量受p H影响：在12 h内,当p H为1.2和6.8时,其累积释药量分别为18.6%和89.3%。

右旋布洛芬/尿素改性蒙脱土复合物的制备及体外释药性能

以蒙脱土为药物载体,利用尿素固相研磨法将蒙脱土层间距撑大,以提高其载药量;采用溶液插层法实现右旋布洛芬的有效负载,制备右旋布洛芬/尿素改性蒙脱土[S(+)-IBU/urea-MMT]复合物;借助X射线衍射(XRD)和傅里叶红外变换光谱(FT-IR)对复合物进行结构表征;采用透析法研究复合物中药物的体外释药性能;运用3种数学模型对其体外释放行为进行拟合分析,探索释药机理。结果表明,在尿素的作用下,蒙脱土的层间距由1.20nm增大到1.79 nm,右旋布洛芬的负载量最高可达227.9 mg·g^(-1),较改性前提高了30%;S(+)-IBU/urea-MMT复合物具有良好的缓释效果,在人工模拟胃液(pH 1.2)和人工模拟肠液(pH 6.8)中的累计释放量分别为19.2%和88.4%;复合物的释药行为基本符合零级释放动力学模型。

Candida lypolytica脂肪酶催化布洛芬酯对映选择性水解

以国产Ｃａｎｄｉｄａ ｌｙｐｏｌｙｔｉｃａ ｌｉｐａｓｅ 脂肪酶（ＣＬＬ） 为手性催化剂催化布洛芬酯对映选择性水解。研究底物修饰、ｐＨ、温度和有机辅溶剂对拆分转化率和对映选择性的影响。ＣＬＬ催化布洛芬乙酯水解的优势产物为Ｓ布洛芬。在最优反应条件下，转化率３０－２％ ，对映体过量为８３－８ ％ 。

布洛芬乙酯的微生物拆分

目的 :从土壤中筛选出能立体选择性水解布洛芬乙酯 ,并且水解产物为S -布洛芬的菌株。方法 :土样通过吐温 2 0培养基初筛到酯酶活力较高的菌株 ,并通过复筛测定菌株水解布洛芬乙酯的产物旋光度 ,从而得到活性菌株。结果与结论 :用筛选到的菌株Candidasp .的培养物催化水解布洛芬乙酯所得产品的外观、熔点、旋光度和核磁共振色谱等各项检测指标与Sigma公司的标准品S -布洛芬基本一致 ,表明该菌株具有生产S -布洛芬的潜力。