转录组分析揭示荷叶离褶伞菌多糖LDS-1抗小鼠S180肿瘤的分子机制

以荷叶离褶伞菌多糖LDS-1、甘露聚糖肽和空白对照作用下的小鼠S180肿瘤细胞为研究材料,运用RNA-Seq测序技术进行生物信息学分析,结果显示LDS-1组、甘露聚糖肽组和空白对照组分别获得8.27、 8.35和8.97 G的分析数据.高表达基因(FPKM>2 200)分析显示LDS-1主要通过下调Rplp1基因调控细胞分裂,将S180细胞停滞在G1期以抑制其分裂.差异基因分析结果显示LDS-1主要通过上调Alb、 Timp4、 Apoa1基因调节蛋白表达或者细胞黏连性,抑制S180肿瘤细胞迁移.KEGG(京都基因与基因组百科全书)通路富集结果显示, LDS-1抑制S180肿瘤生长的关键基因主要富集在过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)信号通路中,上游Fabp3基因下调,激活下游Apoa1、Slc27a2和Adipoq等多个基因上调,调控S180细胞的脂质代谢和胆固醇代谢. LDS-1能够通过调控高表达关键基因Rplp1,差异表达关键基因Alb、 Timp4、 Apoa1,以及PPAR信号通路抑制S180肿瘤细胞的增殖分裂、能量获取和迁移侵袭.

草黄口蘑多糖对S180荷瘤小鼠抗肿瘤活性分子机制研究

多糖作为口蘑属真菌的主要功能成分之一,具有免疫调节、抗氧化及抗肿瘤等活性。为明确草黄口蘑多糖的结构特征及其对S180荷瘤小鼠抗肿瘤活性相关分子机制,该研究以草黄口蘑子实体经热水浸提法提取的草黄口蘑多糖[Tricholoma lascivum (Fr.)Gillet polysaccharide,TLG-1]为实验材料,初步解析TLG-1结构,以S180荷瘤小鼠为模型检测体内抗肿瘤活性,并采用转录组测序技术对S180肿瘤组织总RNA进行测序分析。结果表明,TLG-1重均分子质量为13 442 Da,由木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖4种单糖组成,其比例为1.57∶1.45∶2.84∶4.14。TLG-1可显著抑制荷瘤小鼠S180肿瘤的生长(P<0.01),抑瘤率为53.8%。转录组测序分析显示,TLG-1能显著上调mt-Co1、Prlr、Foxa1以及下调Pitx2、Rplp1、Eef1a1及Lgals1等基因,影响S180肿瘤细胞的代谢途径,调控细胞周期并抑制上皮间质转化过程。基因本体富集分析表明,TLG-1可激活细胞因子介导的信号通路,引发细胞免疫。京都基因与基因组百科全书富集分析显示,在Jak-STAT信号通路中的Il21、Il12rb2、Il12b、Il2ra、Il2rb、Il2rg、Il15ra和Ifng等基因显著上调,通过转换肿瘤相关巨噬细胞表型及分泌干扰素-γ等,增强小鼠抗肿瘤免疫应答。该研究结果为草黄口蘑多糖的开发和利用提供了一定的理论基础。

绞股蓝总皂甙对小鼠S_(180)肉瘤及K_(562)细胞的抑制作用

目的 绞股蓝总皂甙 (GP)对小鼠S180 肉瘤及K562 细胞的抑制作用。方法 通过动物实验观察绞股蓝总皂甙对小鼠S180 肉瘤生长状况、肿瘤坏死面积 (TNA)与肿瘤总面积 (TTA)的比率、瘤周瘤内免疫活性细胞浸润状况及荷瘤小鼠脾脏的影响 ;通过细胞培养观察绞股蓝总皂甙对K562 细胞生长的抑制作用。结果 经重复实验证实 ,GP能显著抑制小鼠S180 肉瘤的生长 ,TNA与TTA的比率显著增加 ,瘤周尤其是瘤内淋巴细胞、巨噬细胞浸润数量明显增加 ,荷瘤小鼠脾重增加、脾白髓数目增多、体积增大。同时证实 ,GP对K562 细胞株具有明显的生长抑制作用。结论 GP的抑瘤作用主要是直接杀伤瘤细胞 。

番茄红素对S_(180)荷瘤小鼠抗肿瘤作用的实验研究

目的 研究番茄红素 (LP)的体内抗肿瘤作用。方法 通过S1 80 肉瘤建立荷瘤小鼠模型 ,给予番茄红素后观察荷瘤小鼠肿瘤生长情况及对小鼠免疫系统和抗氧化酶的影响。结果 给药后能够增强脾脏淋巴细胞增殖能力 ,提高自然杀伤细胞 (NK)活性 ,可升高小鼠血清SOD、GSH Px活性 ,降低MDA含量 (P <0 0 5 )。结论 番茄红素具有明显的抗肿瘤作用 ,其作用可能是通过提高免疫系统功能和机体的抗氧化酶活力来实现的。

天然红心鸭蛋中的类胡萝卜素及对S_(180)肿瘤抑制作用的初步研究

本文对天然红心鸭蛋中的类胡萝卜素做了初步分析,同时探讨了红心鸭蛋中的类胡萝卜素对S180肿瘤的作用。初步结果表明,天然红心鸭蛋中的类胡萝卜素包含有虾青素及其它一些种类的类胡萝卜素。天然红心鸭蛋中的类胡萝卜素对肝匀浆MDA的产生有显著的抑制作用, 对昆明小白鼠S180肿瘤具有显著的抑制作用,且具有明显的量效关系。低、中、高剂量组的类胡萝卜素对肿瘤的抑制率分别为23.2%、35.7%和42.9%,对肿瘤小鼠的内脏指数有显著改善作用,并可显著地降低肿瘤小鼠血清MDA含量。

苦参碱对获得性多药耐药小鼠S_(180)肿瘤细胞基因表达产物P_(170)、LRP及TOPOⅡ表达的影响

目的 :实验观察苦参碱口服给药对化疗诱导的多药耐药基因表达产物P170 、肺耐药蛋白LRP和拓扑异构酶Ⅱ的影响 ,探讨其干预多药耐药的分子生物学基础 ,以指导临床应用苦参碱干预化疗多药耐药的产生。方法 :以亚于治疗剂量的联合化疗PFC方案 ,建立小鼠S180 肿瘤细胞多药耐药模型 ,同时给予苦参碱 4周 ,流式细胞仪荧光检测P170 、LRP、TOPOⅡ。结果 :苦参碱明显降低化疗诱导后耐药细胞P170 、LRP的表达率和ROPOⅡ活性。说明苦参碱可通过对相关生物活性物质的调节 ,干预化疗诱发的肿瘤细胞多药耐药的产生。

薏苡仁注射液对小鼠移植性S180肉瘤血管形成抑制的作用

目的 探讨薏苡仁注射液对肿瘤血管形成抑制作用。方法 通过建立动物肿瘤模型 ,运用薏苡仁实验治疗 ,检测其抑瘤率和肿瘤内血管密度 ,以及瘤体VEGF和bFGF表达的改变。结果 薏苡仁具有明显的抑制S180肉瘤生长作用。实验组的S180瘤体内微血管密度均明显低于对照组 ;免疫组化显示薏苡仁大、中剂量组均可下调S180瘤体内VEGF、bFGF的表达。结论 薏苡仁注射液对肿瘤血管形成均有明显抑制作用 ,降低VEGF、bFGF的表达可能是其抑制肿瘤血管形成的主要机制之一。

基因重组别藻蓝蛋白对小鼠S_(180)肉瘤的抑制作用

研究基因重组别藻蓝蛋白 (RAPC)的抑瘤作用 ,给皮下接种S180 瘤细胞的小鼠 ,每天分别ig及ipRAPC 13 4mg/kg ,6 7mg/kg和 3 4mg/kg ,共 10d ,第 11d处死小鼠 ,称瘤重和胸腺重 ,计数白细胞。结果表明 ,RAPC对小鼠S180 肉瘤有显著抑制作用 ,瘤重抑制率在 45 %～ 64 %之间 ,ig及ip均有效 ,对荷瘤小鼠的胸腺指数和白细胞数量无明显影响。

马齿苋多糖对S_(180)荷瘤小鼠免疫功能的影响

本文探讨马齿苋多糖对S180荷瘤小鼠免疫功能的影响。马齿苋采用水提醇沉法得到马齿苋多糖,分别以50、100、200mg/kg通过腹腔给药10d,观察马齿苋多糖对S180荷瘤小鼠的抑瘤作用及对小鼠淋巴细胞转化功能、腹腔巨噬细胞的吞噬能力、白介素l(IL l)和白介素2(IL2)生成量的影响。结果显示,马齿苋多糖对S180荷瘤小鼠有明显的抑瘤作用,抑瘤率分别为16.92%、51.45%和64.96%。不同剂量马齿苋多糖与对照组相比可明显促进淋巴细胞的转化、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力,可有效的增加荷瘤小鼠脾淋巴细胞的转化和腹腔巨噬细胞的吞噬能力以及白介素1(IL1)和白介素2(IL2)的分泌。说明马齿苋多糖对S180荷瘤小鼠具有显著的抗肿瘤作用,其作用机制与增强小鼠免疫作用有关。

阳和汤对移植S_(180A)小鼠抑瘤及体内诱生干扰素作用的实验研究

目的:探讨阳和汤抗肿瘤作用。方法;取昆明种小白鼠50只,常规接种S_(180A)瘤株于右后肢外侧皮下,次日分组给药,共给药10d,末次给药次日处死动物,称取瘤重,计算抑瘤率;无菌取脾,分离脾细胞悬液,用微量细胞病变抑制法,按Reed-Muench法计算干扰素效价。结果:阳和汤A组(42.9g/kg)、B组(57.2g/kg)、环磷酰胺组(75mg/kg)抑瘤率分别达36.53％、39.74％、48.08％;阳和汤A组、B组脾细胞产生干扰素分别为(1087.82±463.26)、(922.06±650.99)IU/mL,与荷瘤对照组(100.00±56.68)IU/mL比较,差异有非常显著意义。结论:阳和汤对小鼠肉瘤S_(180A)有明显抑制作用,并能明显诱导机体产生干扰素。

蜈蚣提取物对S180及H22荷瘤小鼠的影响及其毒性的实验研究

目的:研究蜈蚣提取物对正常小鼠和移植性S180、H22荷瘤小鼠的影响及其毒性。方法:分别对正常小鼠和S180、H22荷瘤小鼠经口服给药12 d,观察小鼠的生长情况、肿瘤生长情况、体重及小鼠胸腺、脾脏指数变化,毒性实验分别采用最大给药量口服一次给药和多次给药方法观察。结果:蜈蚣水提物对正常小鼠影响较小,蜈蚣醇提物对小鼠肝指数有增大作用。蜈蚣醇提物中低剂量组对S180荷瘤鼠肿瘤增殖有一定的抑制趋势,但无统计学差异,高剂量组无抑制作用。蜈蚣水提物对H22荷瘤小鼠不具有抑制肿瘤生长的作用,且能导致荷瘤小鼠衰弱和死亡。急性毒性实验中,小鼠给药48 g/kg,未见致死毒性。结论:蜈蚣水提物不能抑制荷瘤小鼠肿瘤增殖,蜈蚣醇提物有一定毒性,提示蜈蚣单独用于治疗癌症尚需深入研究。

黄芩茎叶总黄酮对小鼠肉瘤S_(180)瘤株体内增殖的抑制作用

目的:初步分析黄芩茎叶总黄酮的抗肿瘤药效。方法:采用小鼠肉瘤S180模型,观察黄芩茎叶总黄酮腹腔注射给药对移植瘤重量的影响。结果:2次重复实验,3个剂量的黄芩茎叶总黄酮皆可抑制移植肉瘤S180瘤株的体内增殖,量效关系较显著,其中,100～200mg/kg黄芩茎叶总黄酮的抑瘤率>30%,与对照组比较差异有高度显著性和显著性(P<0.01,P<0.05),但其活性低于50mg/kg环磷酰胺(平均抑瘤率达90.50%)。结论:黄芩茎叶总黄酮具有高效低毒的抗肿瘤活性,有可能开发成为新的抗肿瘤药物。

红芪总多糖诱导S180瘤细胞凋亡的实验研究

目的:研究红芪总多糖(THPS)诱导小鼠S180瘤细胞凋亡作用及其机制。方法:昆明小鼠60只接种S180瘤后随机分为5组。(1)模型组(S):生理盐水腹腔注射,(2)环磷酰胺组(CY):CY腹腔注射,(3)THPS低剂量(H100),(4)THPS中剂量(H200)和(5)THPS高剂量组(H400):分别给予THPS低剂量、中剂量和高剂量腹腔注射,14 d后处死小鼠。电镜观察各组瘤细胞的形态,激光共聚焦(LSCM)测定每组瘤细胞DNA、RNA含量、细胞内钙离子浓度、自由基含量及线粒体膜电位。结果:中剂量的THPS可明显升高细胞内钙离子浓度、自由基含量及降低线粒体膜电位和瘤细胞DNARNA含量的作用。结论:THPS中剂量通过升高细胞内钙离子浓度、自由基含量及降低线粒体膜电位诱导小鼠S180瘤细胞凋亡。

牛磺酸对小鼠移植瘤S_(180)肉瘤影响的研究

小鼠喂以基础饲料，对照组和实验组两组动物分别饮水和１％牛磺酸，进行下列实验：１．接种Ｓ１８０肉瘤后，各组又分为不注射环磷酰胺（ＣＴＸ）和注射环磷酰胺进行化疗两组。观察小鼠存活时间、肉瘤大小及抑瘤率。结果表明：补充牛磺酸的荷瘤小鼠存活时间（３５．７±２３．７）天，明显长于对照组（１８．７±５．６）天，抑瘤率为４２．２６％，牛磺酸与ＣＴＸ合用的小鼠生存至６１天仍无一例死亡，也未见到肉眼肿块，抑瘤率为１００％。对照组用ＣＴＸ小鼠存活时间（３９．８±１２．３）天，与未用ＣＴＸ小鼠无差别。２．小鼠接种艾氏腹水瘤瘤细胞后，观察瘤细胞的膜流动性。结果表明：接种艾氏腹水瘤后，牛磺酸组瘤细胞膜的荧光偏振度ｐ＝０．１０８±０．０２０、微粘度η＝０．６１８±０．１４０；而对照组ｐ＝０．１３９±０．０２０，η＝０．８７４±０．１５０，说明牛磺酸组细胞膜的流动性明显优于对照组（Ｐ＜０．０１）。３．以碳素廓清法和血清溶血素生成测定两组免疫功能。牛磺酸组小鼠的免疫功能也明显高于对照组（Ｐ＜０．０１）。以上结果证明：牛磺酸具有抑瘤效果，在用ＣＴＸ进行化疗时，具有明显的协同效应。其抑瘤效果可能与牛磺酸能加强机体免疫功能、保护细胞膜的稳定性和?

莲房原花青素对小鼠S_(180)肉瘤及其免疫功能影响的研究

目的:探讨莲房原花青素(LSPC)对S180肉瘤小鼠及免疫功能的影响。方法:采用称重方法来讨论LSPC对小鼠S180肉瘤的抑制作用;采用小鼠碳廓清单核巨噬细胞吞噬功能测定法、迟发型超敏反应及血清溶血素测定方法,研究LSPC对荷S180肉瘤小鼠免疫功能的影响;结果:LSPC可抑制小鼠S180肉瘤生长、提高免疫器官的增长指数;能显著增强荷瘤小鼠巨噬细胞的吞噬功能、DNFB所致迟发型超敏反应以及抗体生成的能力。结论:初步证明LSPC对小鼠S180肉瘤的抑制作用与其增强荷瘤小鼠免疫功能有关。

干壁虎对食管癌细胞和S180荷瘤小鼠的抑制作用

目的:观察干壁虎体外对食管癌细胞,体内对S180荷瘤小鼠的抑制作用及对免疫系统的影响。方法:体外实验应用血清药理学方法,MTT法测定含干壁虎血清对食管癌EC9706和食管癌EC1细胞系生长的抑制作用,按台盼蓝排染法绘制细胞生长曲线。体内实验建立移植瘤小鼠S180肉瘤模型,给药后计算抑瘤率、胸腺指数、脾脏指数,观察腹腔巨噬细胞吞噬鸡血红细胞实验指标;用SABC免疫组化法检测血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的蛋白表达,TUNEL方法检测细胞凋亡率。结果:干壁虎体外可抑制食管癌细胞的生长,体内可抑制小鼠肉瘤S180生长,对免疫系统无影响;可降低肿瘤组织VEGF、bFGF蛋白的表达,诱导肿瘤细胞凋亡。结论:干壁虎有抗肿瘤活性;其抗肿瘤的部分作用可能通过诱导肿瘤细胞的凋亡及抑制肿瘤血管的生成而实现。

白术对小鼠移植性肉瘤S180的抑瘤作用及对Bcl-2基因表达的影响

目的探讨白术对小鼠S180肉瘤的抑制作用及对肿瘤凋亡相关基因Bcl-2表达的影响。方法昆明系小鼠60只,皮下注射S180细胞,同时分别给予白术、环磷酰胺处理小鼠,其后2周内测量各组肿瘤生长大小;采用RT-PCR法检测凋亡抑制基因Bcl-2的表达。结果白术组的肿瘤重量低于模型组而大于环磷酰胺组(P均<0.05),但白术抑制肿瘤生长的作用强度未呈现量效关系,且其抑瘤率不及环磷酰胺(P<0.05);与对照组相比,白术能显著抑制肿瘤Bcl-2基因的表达水平(P<0.05)。结论白术具有抑制肿瘤生长的作用,可作为肿瘤治疗的辅助药物。

桑黄多糖对肉瘤S180细胞体内外的抑瘤作用

目的:研究桑黄多糖对肉瘤S180细胞体内外的抑瘤作用。方法:选用对数生长期肉瘤S180细胞,加入0(空白对照)、2、4、8 mg/m L的桑黄多糖溶液,分别培养12、24、36、48 h,MTT法测定细胞体外增殖抑制率,荧光染色法观察细胞凋亡形态,流式细胞术检测细胞凋亡率。建立S180细胞荷瘤小鼠模型并随机分为对照组和桑黄多糖高、中、低剂量组(400、200、100 mg/kg),每组10只,每天ig相应药物1次,连续12 d;末次给药24 h后处死小鼠,称瘤质量,计算抑瘤率,免疫组化法检测肿瘤组织中抑癌基因PTEN与癌基因C-myc蛋白表达。结果:与空白对照比较,桑黄多糖能增高S180细胞的增殖抑制率,促进其凋亡率升高(P<0.05或P<0.01),且具有浓度与时间依赖性。与对照组比较,桑黄多糖各剂量组小鼠的抑瘤率明显升高(P<0.01),PTEN蛋白表达增强(P<0.05或P<0.01),C-myc蛋白表达减弱(P<0.05)。结论:桑黄多糖具有体内外抑瘤作用,并能上调抑癌基因PTEN和下调癌基因C-myc的蛋白表达。

有机锗多酸衍生物对S_(180)肿瘤细胞DNA合成的抑制作用

目的 探讨有机锗多酸衍生物对S1 80 肿瘤细胞DNA合成的抑制作用。方法 用3H TdR掺入法检测有机锗多酸衍生物在体外对S1 80 肿瘤细胞DNA合成的抑制作用 ,观察不同剂量有机锗多酸衍生物对S1 80 实体瘤的抑制作用和对免疫器官的影响。结果 体外实验表明 ,有机锗多酸衍生物对S1 80 细胞的生长具有明显的抑制作用 ,而且浓度越高 ,抑制作用越强。体内实验也表明 ,有机锗多酸衍生物对S1 80 实体瘤的生长具有抑制作用 ,而且剂量越大 ,抑制作用越强。且有机锗多酸衍生物可防止荷瘤鼠脾脏重量的下降。结论 有机锗多酸衍生物可抑制肿瘤细胞生长 。