乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸载量前S2蛋白阳性率与慢性乙型肝炎患者肝纤四项指标的相关性分析

目的分析慢性乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)载量、前S2蛋白(Pre S2)阳性率与乙型肝炎患者肝纤4项指标的相关性。方法选取上饶市第二人民医院2019年1月—2021年12月收治的68例乙肝患者为研究对象,测定其血清HBV-DNA载量、Pre S2阳性率及血清肝纤指标[层粘连蛋白(LN)、透明质酸(HA)、Ⅳ型胶原(ⅣC)、Ⅲ型前胶原肽(PⅢ)]水平,按照HBV-DNA载量与Pre S2检测结果,将患者分为低载量组、中载量组、高载量组及Pre S2阳性组与Pre S2阴性组,比较各组肝纤指标水平,并进行相关性分析。结果高载量组血清LN、HA、PⅢ水平明显低于中载量组与低载量组,且中载量组明显低于低载量组(P<0.05),3组ⅣC水平比较差异无统计学意义(P>0.05);高载量组Pre S2阳性率明显高于其余2组(P<0.05),中载量组明显高于低载量组(P<0.05)。Pre S2阳性组患者血清LN、HA及PⅢ水平明显低于Pre S2阴性组(P<0.05),2组ⅣC水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。相关性分析显示,HBV-DNA载量、Pre S2阳性率与LN、HA、PⅢ水平呈负相关(P<0.05)。结论慢性乙型肝炎患者HBV-DNA载量、Pre S2阳性率与LN、HA、PⅢ密切相关。

cDNA文库噬菌体展示法的建立及乙型肝炎病毒前S1蛋白结合蛋白筛检

为寻找乙型肝炎病毒 (HBV)前S1蛋白的结合蛋白 ,将前S1蛋白包被于聚苯乙烯平板 ,经过“包被 吸附 洗脱”筛检过程 ,获得前S1蛋白结合蛋白的cDNA序列 ,并将推断的氨基酸序列进行相互比较 ,经生物信息学方法获得结合蛋白的全长序列。共经过 4轮生物淘洗过程。结果提示 ,神经胶质瘤抑制子候选基因区基因 (GLTSCR) 2上游部分序列存在于与HBV前S1结合的重组T7噬菌体中 ,多个克隆的测序结果发现前S1蛋白结合蛋白具有KxPxKSGxxxL结构域。HBV前S1蛋白的结合蛋白可能是GLTSCR 2的编码产物。

噬菌体表面展示技术筛选乙型肝炎病毒前S1蛋白结合蛋白基因

目的 以乙型肝炎病毒 (HBV)前S1蛋白为靶蛋白 ,寻找其相应的结合蛋白。方法 应用T7cDNA文库噬菌体展示技术克隆与前S1蛋白具有结合作用的蛋白序列 ,命名为前S1结合蛋白 (PreS1BP)。将推断的氨基酸序列在蛋白质库中进行搜索 ,自GenBank中获得结合蛋白的cDNA和基因组的全长序列。结果 初步确定PreS1BP即为神经胶质瘤抑制基因区候选基因 2 (GLTSCR2 ) ,cDNA长为14 36核苷酸 ,基因位于第 19号染色体长臂 13.3区 (19q13 3) ,长度 114 4 5碱基对 (bp) ,位于 19号染色体 10 4 0 3483～10 4 14 989,PreS1BP基因含有 13个外显子 ,具有 12个内含子。结论 应用T7cDNA文库噬菌体展示技术和生物信息学方法获得了HBVPreS1BP基因。

乙型肝炎患者血清标志物、前S1蛋白和HBV-DNA检测的相关性探讨

的 :检测并观察乙型肝炎患者血清标志物(HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb)、前S1(Pre_S1)蛋白和HBV_DNA的相关性 ,探讨新型指标Pre_S1检测的临床意义。方法 :(1)用ELISA法测定100例乙型肝炎患者及35例健康体检者的乙肝血清标志物 ,并按结果分为3组。(2)各组用乙肝病毒Pre_S1蛋白诊断试剂检测Pre_S1蛋白。(3)用定量PCR检测上述标本的HBV_DNA。(4)观察检测血清标志物 ,Pre_S1和HBV_DNA相关性。结果 :Pre_S1蛋白在HBeAg( +)组中检出率 (82.50% )和HBeAg( -)组中检出率 (46.67 % )差别有统计学意义 ;Pre_S1蛋白与HBV_DNA有良好相关性。结论 :3项实验指标之间具有良好相关性 ,Pre_S1蛋白是HBV感染与复制的新指标 ,有望作为乙型肝炎新的检测手段和新的标志物。

HBV前S2蛋白对胰岛素受体基因下调作用的研究

目的探讨乙型肝炎病毒前S2蛋白(pre-S2)对胰岛素受体(INSR)基因的转录调节作用。方法以pGEM-Teasy-65-2质粒为模板,扩增乙型肝炎病毒(HBV)pre-S2基因片段,构建真核表达载体pcDNA3.1-preS2,以不同剂量(1.0、1.5、2.0μg)转染肝癌细胞系HepG2和Huh7,36h及72h后分别提取转染后细胞总RNA,利用实时荧光定量PCR检测细胞内的INSR mRNA水平,观察HBV的pre-S2蛋白对INSR基因的转录调节作用,同时观察阻断pre-S2蛋白后INSR的表达情况。结果转染不同剂量pcDNA3.1-preS2后,HepG2细胞内INSR基因的表达水平分别为对照的61%、20%、11%(转染后36h)和92%、69%、37%(转染后72h),Huh7细胞内INSR基因的表达水平分别为对照的63%、47%、35%(转染后36h)和83%、73%、34%(转染后72h);细胞INSR mRNA水平随真核表达载体pcDNA3.1-preS2转染剂量的增加而降低。在转染2μgpcDNA3.1-preS2的同时,将抗pre-S2单克隆抗体加入培养上清,可部分阻断pre-S2蛋白对INSRmRNA表达的抑制,HepG2细胞中的INSRmRNA水平分别恢复到转染空质粒对照的65%(转染后36h)和81%(转染后72h),Huh7细胞中的INSRmRNA水平则分别恢复到69%(转染后36h)和96%(转染后72h)。结论HBVpre-S2蛋白对肝癌细胞系HepG2和Huh7细胞的INSR基因有明显下调作用,抗pre-S2抗体能部分阻断这种下调作用,此机制可以在分子水平部分解释肝源性糖尿病的发生。

前S_1蛋白和前S_2蛋白及HBV-DNA平行检测对HBV感染诊断的临床价值

目的:探讨前S1蛋白和前S2蛋白联合诊断乙肝病毒感染复制的临床意义。方法:应用ELISA技术和PCR方法对216例HBsAg阳性标本进行前S1蛋白、前S2蛋白及HBV-DNA平行检测。结果:在“大三阳”组中,前S1蛋白、前S2蛋白及HBV-DNA检出阳性率分别为69．5％、42．9％和86．7％;在109例HBeAg阴性血清中,前S1蛋白39例(35．8％)、前S2蛋白5例(4．6％)及HBV-DNA14例(12．8％)检出阳性。前S1蛋白与HBV- DNA的阳性率比较差异无统计学意义(x2=0．613,P>0．250),与HBeAg的阳性率比较差异无统计学意义(x2= 0．493,P>0．250)。前S2蛋白与HBV-DNA阳性率比较差异有统计学意义(x2=40．36,P<0．005),与HBeAg 阳性率比较差异有统计学意义(x2=46．81,P<0．005)。结论:前S1蛋白和前S2蛋白是诊断乙肝病毒感染复制十分有价值的血清学指标。

两种HBV前S1蛋白试剂盒检测结果的比较与临床价值

目的比较两种前S1蛋白(preS1)试剂盒检测乙型肝炎的结果及临床价值。方法采用两种preS1试剂盒对248例HBsAg(+)、41例HBsAg(-)血清进行检测,并与常见HBV血清标志物及HBV DNA结果作比较分析。结果HBsAg(+)、HBeAg(+)、抗HBc(+／-)7l例,HBV DNA、试剂1 preS1和试剂2 preS1的阳性率分别为97．2％、70．4％和31．0％。HBsAg (+)、HBeAg(-)、抗HBe(+)、抗HBc(+)156例,HBV DNA、试剂1 preS1和试剂2 preS1的阳性率分别为57．1％、39．1％和16．7％。HBeAg(-)、HBsAg(+)、抗HBc(+)21例,HBV DNA、试剂1 preS1和试剂2 preS1的阳性率分别为76．2％、47．6％和9．5％。41例HBsAg(-)血清未检出preS1和HBV DNA。结论preS1反映HBV复制情况较HBeAg更敏感,但试剂盒的不同影响检测结果。对于HBeAg(-)患者,preS1是一个判断HBV复制的有价值的指标。

T7 cDNA噬菌体展示文库筛选乙型肝炎病毒前S2蛋白结合蛋白

目的以乙型肝炎病毒前S2蛋白(HBVPre-S2)为靶蛋白,寻找该蛋白相应的结合蛋白。方法应用噬菌体表面展示技术,以纯化的HBV前S2蛋白为固相筛选蛋白,用正常人肝细胞的噬菌体T7cDNA文库进行5轮生物筛选,经噬斑PCR,对筛选克隆进行DNA序列分析,将推断的氨基酸序列在蛋白质库中进行搜索,自GenBank中获得与HBVPre-S2有结合作用蛋白的cDNA和基因组的全长序列,并用ELISA验证筛选的结合蛋白。结果噬菌体经过5轮生物富集后,将随机筛选的200个噬斑裂解液做PCR,得到120个插入片段长短不一的克隆,ELISA证实获得43个阳性克隆。将其PCR产物序列测定后进行同源搜索,初步确定30个人体肝脏中固有的与乙型肝炎病毒前S2蛋白结合的蛋白,其中含细胞色素P450Ⅰ类A型亚基克隆2个、3个PI-3激酶相关激酶SMG-1同类蛋白、2个细胞生长抑制蛋白42,1个膜联蛋白A11转录变异体、3个转录激活因子5、2个α酸性糖蛋白、5个未知功能蛋白等。结论应用T7cDNA噬菌体表面展示技术和生物信息学方法筛选并验证了HBVPre-S2蛋白结合蛋白,为进一步研究Pre-S2蛋白的生物学功能提供新了思路。

乙肝病毒前S_2蛋白的临床研究

新近发现HBV的S区由S、前S_1和前S_2三个基因组成。前S_2蛋白(PreS_2)上具有与人血清多聚白蛋白(PHSA)

HBV前S1蛋白与HBV-DNA检测和乙肝二对半模式相关性研究

乙型肝炎病毒（HBV）为嗜肝DNA病毒。HBV-DNA基因组呈环状分为长的负链（L）和短的正链（S）两股。L链有四个开放读码区（S、C、P、X区）。S区又分为前S1、前S2两区及S区,分别编码包膜上有前S1、前S2和HBsAg[1-2]。前S1蛋白主要存在于Dane颗粒中,

HBV前S1蛋白与HepG2细胞膜蛋白结合位点鉴定

为鉴定HepG2细胞膜蛋白识别HBV包膜蛋白preS1区的位点。通过删除突变的方法构建preS1的不同区域片段与GST融合的重组表达质粒,将表达质粒转入E.coli BL21菌株中原核表达,以生物素标记HepG2细胞膜蛋白,pull down试验分析HepG2细胞膜蛋白识别preS1的位点。结果表明,21～33位氨基酸是HepG2细胞膜蛋白识别preS1的主要位点。通过对HepG2细胞膜蛋白与preS1结合的位点的分析,为进一步研究preS1在HBV早期感染中的作用和HBV包膜蛋白受体打下基础。

前S1蛋白在HBV指标中的重要意义

前S1蛋白是HBV衣壳蛋白的一部分 ,存在于大分子表面抗原蛋白之中 ,它是乙肝早期诊断的敏感指标 ,也反映了乙肝病毒的复制和乙肝病情的活动。本文研究显示 ,1 62例非乙肝病人血清中前S1蛋白全部阴性 ;31 1例乙肝患者中 ,前S1蛋白阳性率为 38 9% ,其中急性乙肝 93 8% ,慢性活动性肝炎 51 2 % ,在乙肝二对半检测模式中 ,大三阳中该指标阳性率 87 1 % ,小三阳为 32 1 %。以HBVDNA检测为标准 ,前S1蛋白的灵敏度为 94 1 % ,假阴性 5 9% ,总符合率 93 9%。

501例HBV感染者血清前S_1蛋白抗原检测

目的检测乙型肝炎病人血清进行HBV前S1蛋白抗原 (Pre -S1Ag) ,以便了解Pre -S1在HBV感染进程中的作用。方法采用ELISA方法对 5 0 1例HBV感染者及 5 0名健康对照组检测。结果HBsAg阳性、HBeAg阳性、HBcAb阳性 (大三阳 )病人组的Pre -S1Ag阳性率为 84 .8% ;HBsAg阳性、HBeAb阳性、HBcAb阳性 (小三阳 )病人组的Pre -S1Ag阳性率为 38.6 % ;HBsAg阳性、HBcAb阳性病人组的Pre -S1Ag阳性率为 4 0 .0 %。大三阳病人组Pre -S1Ag阳性率与各组间比较 ,具有显著性差异 (P <0 .0 1 )。结论Pre -S1Ag的检测可反映HBV在体内的复制情况 ,它与HBsAg阳性及HBeAg阳性有密切相关性 ,在防治中应引起重视。

前S1蛋白作为慢性乙型肝炎患者病毒复制标志物的价值

目的探讨乙型肝炎患者病毒血清前S1蛋白(PreS1)作为慢性乙型肝炎病毒复制标志物的价值。方法对210例慢性乙型肝炎患者和67例健康体检者进行HBV-DNA、PreS1、HBeAg测定;采用荧光定量-多聚酶链反应技术(FQ-PCR)对HBV-DNA进行定量检测,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对PreS1和HBeAg进行检测。结果210例慢性乙型肝炎患者中,以HBV-DNA>1×103拷贝/m l作为HBV复制的金标准,PreS1和HBeAg与HBV-DNA的总符合率为74.8%和57.6%。177例HBV-DNA阳性患者中,PreS1阳性135例,HBeAg阳性88例,2种检验标志物间差异存在显著性(2χ=26.8,P<0.01)。PreS1、HBeAg和PreS1/HBeAg联合检测作为病毒复制标志的敏感性分别为76.3%、49.7%和87.6%,特异性分别为66.7%、100%和66.7%,准确性分别为74.8%、57.6%和84.3%,阳性预测值分别为92.5%、100%和93.4%,阴性预测值分别为33.3%、100%和50%。结论PreS1与乙型肝炎病毒的复制密切相关,PreS1作为乙型肝炎病毒复制的标志物优于HBeAg。PreS1和HBeAg联合检测更能较好反映HBV病毒感染和复制状态,有利于乙肝病情监测和疗效评估。

前S1蛋白与乙型肝炎病毒传染性关系的病例对照研究

随机选择２４例前Ｓ１抗原阳性慢性乙型肝炎患者为病例组、２２例前Ｓ１抗原阴性慢性乙型肝炎患者为患者对照组、１６例无症状ＨＢｓＡｇ携带者为携带者对照组。检测其家庭共同生活成员乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染情况。结果表明：病例组家庭成员ＨＢＶ感染率，ＨＢｓＡｇ、ＨＢｓＡｇ、抗ＨＢｃＩｇＧ３阳性和ＨＢｓＡｇ、抗ＨＢｅ、抗ＨＢｃＩｇＧ３阳性检出率均高于对照组，而且病例组家庭内ＨＢＶ感染危险度也大于对照组，比值比（ＯＲ值）分别为５．０和６．４，两对照组间未见差别。说明前Ｓ１蛋白是ＨＢＶ传染指标之一。

前S1蛋白在乙型肝炎的诊断及预后判断中的临床价值

目的探讨前S1蛋白(PreS1)在乙型肝炎诊断及其预后判断中的临床意义。方法收集乙型肝炎患者血清共197例,检测其HBV-DNA,PreS1,HBV血清标志物,ALT和AST。结果在携带不同HBV血清标志物的各组患者中,PreS1与HBV-DNA的检出率较一致。在不同临床类型乙型肝炎患者中,PreS1与HBV-DNA的检出率高度符合,PreS1的阳性率较HBeAg高。以HBV-DNA定量>5×102拷贝/ml为阳性诊断标准,PreS1与HBV-DNA的检出率无显著性差异(P>0.05);HBeAg与HBV-DNA的检出率有显著性差异(P<0.001)。142例HBeAg阴性者中HBV-DNA与PreS1的检出率分别为57.7%,56.3%,两者无显著性差异(P>0.05),说明部分患者仍存在着病毒复制。PreS1阳性与阴性患者的转氨酶水平有显著性差异(P<0.05),说明PreS1阳性患者较阴性患者肝组织损伤严重。结论PreS1较HBeAg更敏感地反映HBV的复制情况,特别对HBV病毒是否发生基因变异是主要的观察指标;在急性乙型肝炎患者中,PreS1阴转越早,预后越好。

前S1蛋白与乙肝病毒DNA和e抗原对乙肝病毒复制诊断的研究

目的分析前S1(Pre-S1)蛋白在诊断慢性乙型肝炎病毒复制中的作用。方法收集慢性乙型肝炎患者共104例,均经病原学及血生化检查证实。检测其Pre-S1蛋白、乙肝病毒(HBV)标志物与HBV DNA。结果乙型肝炎表面抗原(HbsAg)、乙型肝炎e抗原(HbeAg)、乙型肝炎核心抗体(抗-HBc)阳性者29例,HBV DNA与Pre-S1蛋白的检出率均达96.5%,这组患者存在病毒的高复制。HBsAg、乙型肝炎e抗体(抗-Hbe)和抗-HBc阳性者65例,HBVDNA与Pre-S1蛋白的检出率分别为81.5%和72.3%;HBsAg和抗-HBc阳性者8例,HBV DNA与Pre-S1蛋白的检出率分别为87.5%、75.0%,说明部分HBeAg阴性而抗-HBe阳性/阴性的患者仍存在着病毒复制.以HBV DNA定量>103拷贝/m l为诊断标准,HBV DNA阳性患者HBeAg、Pre-S1蛋白的检出率分别为31.5%(28/89)、80.9%(72/89);两者与HBV DNA的总符合率分别为40.0%(42/104)、82.0%(85/104)。HBV DNA与HBeAg检出率差异有显著性(χ2=53.397,P<0.001);HBV DNA与Pre-S1蛋白检出率差异无显著性。结论Pre-S1蛋白较HBeAg更敏感的反映了HBV复制的情况。