S基因突变对慢性乙型肝炎肝硬化患者血清AFP、PTX3表达及预后的影响

目的 探讨S基因突变与AFP、PTX3水平及患者预后的相关性。方法 选取2017年7月至2019年6月于北京市大兴区人民医院治疗的76例慢性乙型肝炎肝硬化患者为研究对象(肝硬化组);同期选取慢性乙型肝炎患者87例作为对照(肝炎组);根据S基因是否发生突变将慢性乙型肝炎肝硬化患者分为S基因突变组22例和S基因未突变组54例。采用半套式PCR检测HBV S基因突变情况;采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清AFP、PTX3水平;采用全自动生化分析仪检测血清总胆红素(TBil)、天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)水平;Pearson法分析S基因突变慢性乙型肝炎肝硬化患者血清AFP、PTX3水平与肝功能指标相关性;多因素logistic回归分析影响慢性乙型肝炎肝硬化患者预后的因素。结果 肝硬化组TBil水平为(42.59±6.81)μmol/L,S基因突变患者比例为(22/54),高于肝炎组的(25.46±7.32)μmol/L和(9/78),AST(156.83±24.57)U/L、ALT水平(125.31±30.25)U/L低于肝炎组的(238.46±40.22)U/L、(193.74±42.81)U/L,差异均有统计学意义(t/χ^(2)=15.395、9.114、15.362、11.626,均P<0.05);S基因突变组血清AFP(5.98±2.01)ng/mL、PTX3(5.24±1.43)μg/L高于S基因未突变组的(4.86±1.34)ng/mL和(3.84±1.05)μg/L,差异均有统计学意义(t=2.839、4.729,均P<0.05);S基因突变慢性乙型肝炎肝硬化患者血清中AFP、PTX3水平与TBil均呈正相关(r=0.502、0.479,均P<0.05),与AST、ALT均呈负相关(P<0.05);S基因突变与慢性乙型肝炎肝硬化患者预后有关(r=0.553,P<0.05),且发生S基因突变的慢性乙型肝炎肝硬化患者中预后不良比例高于预后良好(86.36%比13.64%);S基因突变、AFP是影响慢性乙型肝炎肝硬化患者发生不良预后的独立危险因素(P<0.05)。结论 S基因突变可能导致慢性乙型肝炎肝硬化患者血清AFP、PTX3水平升高,且可能对患者不良预后的预测具有重要意义。

GSS基因突变致谷胱甘肽合成酶缺乏症一例

患儿女,2日龄,因进行性呼吸困难1d急诊入住郑州市儿童医院.患儿为第一胎第一产,母亲孕36＋6周因“胎儿宫内窘迫,羊水少”实施剖宫产.患儿出生体重2050 g,生后精神反应差,吃奶少,24h未排胎便,36h出现轻-中度黄疸.生后第2天出现呼吸困难.父母为非近亲婚配,母孕期健康.入院体格检查：体重1950 g,身长47 cm,心率175次/min,呼吸72次/min,皮下脂肪菲薄,皮肤黏膜轻-中度黄染,颜面及颈部散在数枚脓疱疹,呼吸节律不规则,三凹征（＋）.双肺呼吸音粗,心音有力,律齐,心率175次/min,心前区可闻及柔和收缩期Ⅱ级杂音.肝、脾未触及,四肢肌张力增高,肌力正常.

CACNA1S基因突变致低钾周期性麻痹的产前基因诊断

目的对CACNA1S基因R1239H突变导致的低钾周期性麻痹(HoKPP1型)家系中的1例中期妊娠者进行产前基因诊断,从而预防HoKPP患儿出生。方法患者于16孕周在B超下进行羊膜囊穿刺,抽取羊水10 mL,提取羊水细胞基因组DNA。选择3个多态性STR位点,D13S317、D8S1179和D16S539,排除母体细胞的污染。在此基础上对CAC-NA1S基因外显子30进行扩增,PCR产物进行正、反向测序。结果 STR多态性位点分析,证明无母体细胞污染,胎儿CACNA1S基因30外显子测序结果显示,胎儿带有和母亲同样的CACNA1S基因突变R1239H。结论对于有HoKPP风险的胎儿进行产前基因诊断非常重要,可以明确胎儿基因型,预防患儿出生。

先天性甲状腺功能减退症钠碘转运体基因突变研究

目的研究天津市区先天性甲状腺功能减退症(简称甲低)患者钠碘转运体(NIS)基因突变情况。方法用TKM法提取18例先天性甲低、35例随机正常对照者外周血DNA,分别聚合酶链反应(PCR)扩增NIS基因第1～15外显子,单链构象多态性分析(SSCP)筛查NIS基因15个外显子突变,突变经直接测序证实。结果所有研究对象NIS基因15个外显子均可以PCR扩增,经SSCP分析无异常电泳条带,表明18例先天性甲低无NIS基因突变。结论所研究的天津市区先天性甲低患者无NIS基因突变。

23S rRNA耐药基因2063位点突变与MPP患儿MP-DNA载量及大环内酯类药物耐药的关系研究

目的探究23SrRNA耐药基因2063位点突变与肺炎支原体肺炎(Mycoplasma pneumoniae pneumonia,MPP)患儿肺炎支原体脱氧核糖核酸(mycoplasma pneumoniae deoxyribonucleic acid,MP-DNA)载量及大环内酯类抗生素(macrolides antibiotics,MA)耐药的关系研究。方法选择2016年12月—2019年12月MPP患儿共126例。通过微量稀释法测定MP对MA的耐药性。通过聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测MP-DNA载量。通过基因测序技术检测2063位点突变情况。根据是否出现MA耐药将MPP患儿分为耐药组和非耐药组,比较两组一般资料、实验室指标、A2063G突变情况,Logistic回归分析探究MA耐药的危险因素。结果在126例MPP患儿中,共出现23S rRNA基因A2063G突变62例,占49.21%。突变组和未突变组患儿的年龄和性别比较差异不显著(P>0.05)。突变组log10MP-DNA水平显著高于未突变组(P<0.05)。本研究共出现51例MA耐药,发生率为40.48%。耐药组≥7岁的患儿比例、发生在春冬两季的患儿比例、log10MP-DNA以及23SrRNA基因A2063G突变水平均显著高于非耐药组(P<0.05)。结论 23S rRNA基因的A2063G突变与MA耐药和MP-DNA载量有关,年龄、发病季节、Log10MP-DNA及23S rRNA基因A2063G突变均是MPP患儿出现MA耐药的高危因素。

隐匿性感染的慢性乙型肝炎患者HBV S基因分析

目的 研究慢性乙型肝炎(CHB)患者中隐匿性乙肝病毒(HBV)感染的特点,分析S基因突变及发生隐匿性感染的可能原因.方法 收集CHB患者经治疗后血清学HBsAg检测结果转为阴性而HBV DNA阳性的标本10例.采用实时定量PCR进行HBV DNA定量检测.PCR扩增HBV S区基因,并进行克隆测序.结果 10例标本ALT均正常(23.3±13.3U/L),定量和定性试剂检测血清学HBsAg结果均为阴性,HBV DNA定量结果均为阳性且病毒载量相对偏低(中位数:4.82×104拷贝/ml).经S基因测序分析,10例标本均存在S区基因突变,其中8例标本存在不同突变株或突变株与野生型的混合感染,突变频率较高的位点为T47A、L98V、I/T126N/S、T131N、M133T/I、W172*、M198I、W199*、N207T.结论 CHB患者经过抗病毒治疗后HBsAg转为阴性的病例中存在隐匿性HBV感染,发生隐匿性感染可能与HBV S基因突变或循环HBsAg低于检测限有关,使用敏感度高的试剂进行HBV DNA检测有利于CHB患者治疗后隐匿性HBV感染的发现.

39例乙型肝炎表面抗原与表面抗体同时阳性的结果分析

目的探讨乙型肝炎表面抗原（HBsAg）与表面抗体（HBsAb）同时阳性的原因。方法应用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测标本，收集HBsAg与HBsAb同时阳性标本，再进行乙型肝炎病毒DNA（HBV—DNA）和谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总胆红素等肝功能项目检测。结果HBsAg与HBsAb同时阳性标本有四种模式，HBV—DNA阳性率为74．4％，肝功能异常率为71．8％。结论HBsAg与HBsAb同时阳性原因较多，S基因突变可能是其主要原因。

乙型肝炎表面抗原疑难判定血清的研究

用中国药品生物制品检定所检定合格的国内外HBsAgEIA试剂及ABBOTT抗 HBs、抗 HBcEIA试剂 ,对所收集的 13份HBsAg疑难判定血清进行检测 ,并用PCR方法检测血清中HBVDNA ,结果显示国内外HBsAg试剂对部分HBVDNA阳性样品的检出率差异较大 ,提示这些样品可能为S基因突变株或HBsAg含量较低 ,因此 ,HBsAgEIA试剂的敏感度仍有待进一步提高 ,并应进一步研制检测S基因突变株的HBsAg诊断试剂。

慢性肝病患者拉米夫定耐药毒株突变模式特征分析

目的 探讨拉米夫定（LAM）耐药毒株突变模式及HBV S基因相关变异在不同疾病进展慢性肝病患者中的特征.方法 收集LAM耐药慢性肝病患者的血液标本,获得相应的HBV RT基因核苷酸序列,分析耐药突变位点、药物耐受和耐药相关HBV S基因变异特点及组间差异.结果 本研究纳入慢性乙型肝炎（CHB）患者47例,乙肝肝硬化（LC）和乙肝相关肝细胞癌（HCC）患者16例.M204I单点突变与L180M＋M204I/V为LAM耐药的慢性肝病患者最常见突变形式（35/63,55.56％）.LC/HCC组对三种以上核苷（酸）类似物同时耐药人数高于CHB组（62.50％ vs 34.04％,P =0.046）.LC/HCC组在HBV-S区检测到与免疫逃逸相关的HBsAg突变位点数多于CHB组（62.50％ vs 31.91％,P=0.031）,I126T/V与G145A（LCC/HCC,60％）、I126S/T与S117T（CHB,46.67％）为HBsAg逃逸突变的最常见形式.两组患者均检测到RT区变异伴随HBsAg终止密码子的突变（rtA181T/sW172＊和rtM204I/sW196＊）.结论 不同疾病进展慢性肝病患者LAM耐药毒株突变及相关HBV S基因变异特征存在差异,LC/HCC患者多重耐药和免疫逃逸毒株比例高于CHB患者.

Hunter综合征胎儿的产前基因诊断

Hunter综合征是一种我国南方地区高发、严重致残、致死性的X染色体连锁隐性遗传病。临床表现多样，严重病例多于1～4岁起病，一般成年前天折。本病的根本原因是IDS基因突变导致艾杜糖-2-硫酸酯酶缺乏或活性降低，进而影响硫酸皮肤素（DS）和硫酸乙酰肝素（HS）的降解，导致DS、HS在体内大量堆积，最终引起各器官的病变。检测IDS基因的突变情况是确诊本病的关键。我们在开展Hunter综合征致病基因突变研究的基础上，

胱氨酸贮积症诊治新进展

胱氨酸贮积症（cystinosis）是指由于CTNS基因突变，导致溶酶体膜上L-胱氨酸转运蛋白（cystinosin）缺乏，胱氨酸在溶酶体内蓄积，引起眼、肾脏、神经、内分泌腺等多器官功能障碍的常染色体隐性遗传病。