目的:探讨S期激酶相关蛋白2(S-phase kinase-interacing protein 2,SKP2)在食管癌组织中的扩增、表达状态及其临床意义。方法:应用荧光原位杂交、RT-PCR、Western印迹和免疫组织化学方法检测SKP2在食管癌组织中的扩增和表达水平,结合临...目的:探讨S期激酶相关蛋白2(S-phase kinase-interacing protein 2,SKP2)在食管癌组织中的扩增、表达状态及其临床意义。方法:应用荧光原位杂交、RT-PCR、Western印迹和免疫组织化学方法检测SKP2在食管癌组织中的扩增和表达水平,结合临床病理资料进行统计学分析。结果:食管癌组织中SKP2的扩增频率为46.0%,SKP2扩增与肿瘤淋巴结转移和临床分期具有显著相关性(P<0.05)。在SKP2扩增的食管癌组织中SKP2 mRNA和蛋白的表达水平均明显升高。免疫组织化学检测结果表明,食管癌组织中SKP2蛋白的过表达与肿瘤淋巴结转移和肿瘤分期有显著相关性(P<0.05),与预后无相关性(P>0.05)。结论:SKP2可能具有癌基因的潜能,在食管癌的发生、发展和淋巴结转移中发挥一定作用。展开更多
目的探讨细胞S相激酶相关蛋白(S-phasekinase associated protein 2,Skp2)、p27蛋白与喉鳞状细胞癌(简称喉癌)各临床因素及预后的相关性。方法采用免疫组化SP法检测79例喉癌患者肿瘤组织的Skp2、p27表达。结果喉癌中Skp2高表达率(53.16%...目的探讨细胞S相激酶相关蛋白(S-phasekinase associated protein 2,Skp2)、p27蛋白与喉鳞状细胞癌(简称喉癌)各临床因素及预后的相关性。方法采用免疫组化SP法检测79例喉癌患者肿瘤组织的Skp2、p27表达。结果喉癌中Skp2高表达率(53.16%)显著高于正常喉组织(0%,P<0.05);喉癌Skp2蛋白低表达组的5年生存率(72.18%)显著高于高表达组(44.17%,P<0.01)。p27蛋白在喉癌和癌旁喉组织中的高表达率分别为30.38%和90%,差异具有显著性(P<0.05);喉癌p27蛋白高表达组的5年生存率(72.98%)显著高于低表达组(51.13%,P<0.01)。将Skp2和p27结合分析,Skp2高表达并p27低表达组的5年生存率最低,与另一组相比具有显著性差异(P=0.001)。结论Skp2蛋白通过降解靶蛋白p27可能在喉癌发生、发展中发挥重要作用。展开更多
目的检测S期激酶相关蛋白2（S-phase kinase associated protein 2，Skp2）在不同分化程度喉癌组织标本中的表达，并探讨应用RNA干扰技术抑制skp2基因表达对喉癌Hep2细胞生长、凋亡、p27表达以及细胞周期的影响。方法应用免疫组织化学...目的检测S期激酶相关蛋白2（S-phase kinase associated protein 2，Skp2）在不同分化程度喉癌组织标本中的表达，并探讨应用RNA干扰技术抑制skp2基因表达对喉癌Hep2细胞生长、凋亡、p27表达以及细胞周期的影响。方法应用免疫组织化学方法检测Skp2蛋白在不同分化程度喉癌组织标本中的表达，根据设计siRNA的原则，针对人Skp2的mRNA序列，设计并合成编码siRNA的两条寡核苷酸序列，构建重组质粒pGPU6Skp2，转染重组质粒至Hep-2细胞中，应用流式细胞术检测skp2蛋白的表达。采用四甲基偶氮唑蓝法（MrIT）检测细胞增殖变化。采用流式细胞术检测细胞凋亡、细胞周期和p27蛋白表达的变化。结果52例喉癌组织标本中skp2蛋白均呈阳性表达，高分化喉癌组织标本Skp2蛋白表达低于中、低分化组（X2=7．33，P〈0．05）。经酶切和DNA测序鉴定证实重组质粒上连接序列确实为所设计序列。pGPU6-Skp2转染组skp2蛋白表达明显低于空质粒对照组（f=19．42，P〈0．01）；pGPU6-Skp2转染组细胞增殖抑制率为26．93％，明显高于空质粒对照组2．47％（t=15．23，P〈0．01）；pGPU6-Skp2转染组细胞凋亡率为11．71％，明显高于空质粒对照组1．93％（t=17．92，P〈0．01）；pGPU6-Skp2转染组s期细胞所占比例明显高于空质粒对照组（t=7．73，P〈0．05）；pGPU6-Skp2转染组p27蛋白表达明显高于空质粒对照组（t=2．86，P〈0．05）。结论skp2蛋白在喉癌中的表达与癌组织的分化程度有关。抑制喉癌细胞系Hep-2细胞skp2的表达可以抑制细胞增殖，并促进细胞凋亡p27蛋白表达提高以及细胞s期阻滞可能是其作用机制之一。展开更多
文摘目的:探讨S期激酶相关蛋白2(S-phase kinase-interacing protein 2,SKP2)在食管癌组织中的扩增、表达状态及其临床意义。方法:应用荧光原位杂交、RT-PCR、Western印迹和免疫组织化学方法检测SKP2在食管癌组织中的扩增和表达水平,结合临床病理资料进行统计学分析。结果:食管癌组织中SKP2的扩增频率为46.0%,SKP2扩增与肿瘤淋巴结转移和临床分期具有显著相关性(P<0.05)。在SKP2扩增的食管癌组织中SKP2 mRNA和蛋白的表达水平均明显升高。免疫组织化学检测结果表明,食管癌组织中SKP2蛋白的过表达与肿瘤淋巴结转移和肿瘤分期有显著相关性(P<0.05),与预后无相关性(P>0.05)。结论:SKP2可能具有癌基因的潜能,在食管癌的发生、发展和淋巴结转移中发挥一定作用。
文摘目的探讨细胞S相激酶相关蛋白(S-phasekinase associated protein 2,Skp2)、p27蛋白与喉鳞状细胞癌(简称喉癌)各临床因素及预后的相关性。方法采用免疫组化SP法检测79例喉癌患者肿瘤组织的Skp2、p27表达。结果喉癌中Skp2高表达率(53.16%)显著高于正常喉组织(0%,P<0.05);喉癌Skp2蛋白低表达组的5年生存率(72.18%)显著高于高表达组(44.17%,P<0.01)。p27蛋白在喉癌和癌旁喉组织中的高表达率分别为30.38%和90%,差异具有显著性(P<0.05);喉癌p27蛋白高表达组的5年生存率(72.98%)显著高于低表达组(51.13%,P<0.01)。将Skp2和p27结合分析,Skp2高表达并p27低表达组的5年生存率最低,与另一组相比具有显著性差异(P=0.001)。结论Skp2蛋白通过降解靶蛋白p27可能在喉癌发生、发展中发挥重要作用。
文摘目的检测S期激酶相关蛋白2（S-phase kinase associated protein 2，Skp2）在不同分化程度喉癌组织标本中的表达，并探讨应用RNA干扰技术抑制skp2基因表达对喉癌Hep2细胞生长、凋亡、p27表达以及细胞周期的影响。方法应用免疫组织化学方法检测Skp2蛋白在不同分化程度喉癌组织标本中的表达，根据设计siRNA的原则，针对人Skp2的mRNA序列，设计并合成编码siRNA的两条寡核苷酸序列，构建重组质粒pGPU6Skp2，转染重组质粒至Hep-2细胞中，应用流式细胞术检测skp2蛋白的表达。采用四甲基偶氮唑蓝法（MrIT）检测细胞增殖变化。采用流式细胞术检测细胞凋亡、细胞周期和p27蛋白表达的变化。结果52例喉癌组织标本中skp2蛋白均呈阳性表达，高分化喉癌组织标本Skp2蛋白表达低于中、低分化组（X2=7．33，P〈0．05）。经酶切和DNA测序鉴定证实重组质粒上连接序列确实为所设计序列。pGPU6-Skp2转染组skp2蛋白表达明显低于空质粒对照组（f=19．42，P〈0．01）；pGPU6-Skp2转染组细胞增殖抑制率为26．93％，明显高于空质粒对照组2．47％（t=15．23，P〈0．01）；pGPU6-Skp2转染组细胞凋亡率为11．71％，明显高于空质粒对照组1．93％（t=17．92，P〈0．01）；pGPU6-Skp2转染组s期细胞所占比例明显高于空质粒对照组（t=7．73，P〈0．05）；pGPU6-Skp2转染组p27蛋白表达明显高于空质粒对照组（t=2．86，P〈0．05）。结论skp2蛋白在喉癌中的表达与癌组织的分化程度有关。抑制喉癌细胞系Hep-2细胞skp2的表达可以抑制细胞增殖，并促进细胞凋亡p27蛋白表达提高以及细胞s期阻滞可能是其作用机制之一。
