食管癌组织中S期激酶相关蛋白2mRNA的表达意义

目的探讨S期激酶相关蛋白2mRNA在食管癌及其癌旁组织中的表达及其与食管癌临床病理特征的关系.方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测S期激酶相关蛋白2mRNA在45例手术切除的食管癌组织及癌旁组织中的表达.结果S期激酶相关蛋白2mRNA表达率在食管癌中为66.6%(30/45),而癌旁组织中为24.4%(11/45),差异有显著性(P<0.05).S期激酶相关蛋白2mRNA阳性表达率与患者年龄、性别、肿瘤大小、及有无淋巴结转移无关,与肿瘤分化程度及TNM分期有关(P<0.05).结论S期激酶相关蛋白2的高水平表达促进了食管癌的发生发展.并将可能为食管癌的早期诊断和治疗提供新的手段.

Skp2和p27kip1在乳腺癌组织中的表达及其相关性的研究

目的:检测乳腺癌组织中Skp2和p27kip1 mRNA的表达,探讨其在乳腺癌发生、发展中的作用及其相关性。方法:采用半定量逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测40例乳腺癌组织,20例乳腺纤维腺瘤组织和20例正常乳腺组织中Skp2 mRNA和p27kip1 mRNA的表达,并分析其在乳腺癌组织中的表达水平与临床病理因素的关系。结果:乳腺癌组织中Skp2 mRNA表达较乳腺纤维腺瘤组织及正常乳腺组织明显增高(P<0.05),在正常乳腺组织和乳腺纤维腺瘤组织中差异无统计学意义(P>0.05);而p27kip1 mRNA表达较乳腺纤维腺瘤组织及正常乳腺组织明显降低(P<0.05),在正常乳腺组织和乳腺纤维腺瘤组织中表达差异无统计学意义(P>0.05)。乳腺癌组织中Skp2 mRNA表达水平与组织学分级、淋巴结转移程度呈正相关;p27kip1 mRNA表达水平与组织学分级、淋巴结转移程度呈负相关。2种基因表达均与患者年龄、绝经状况、肿瘤大小及病理学分期无关(P>0.05)。乳腺癌组织中Skp2 mRNA与p27kip1 mRNA表达呈负相关。结论:乳腺癌组织Skp2和p27kip1参与了乳腺癌的发生、发展过程,两指标的联合检测可能有助于预测乳腺癌预后。

RNA干扰对SKOV3卵巢癌细胞株Skp2表达的抑制作用

目的:探讨RNA干扰(RNAi)技术对SKOV3卵巢癌细胞株Skp2表达的抑制作用。方法:设计合成针对Skp2的小干涉RNA(siRNA)并进行转染。实验分为空白对照组、转染组1、转染组2、转染对照组及阴性对照组。采用Real time PCR和Western blotting技术检测各组Skp2mRNA和蛋白水平的变化,通过细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测各组卵巢癌细胞增殖情况。结果:应用Skp2-siRNA干扰SKOV3卵巢癌细胞株后,转染组1、转染组2的Skp2mRNA和蛋白表达水平明显降低,细胞增殖明显受限,与空白对照组相比较,差异有统计学意义(P<0.05),转染组1与转染组2之间差异无统计学意义(P>0.05)。转染组1与转染组2基因沉默效率分别为75.31%和76.86%,蛋白抑制率分别为62.10%和63.11%,细胞增殖抑制率分别为52.75%和53.06%。结论:RNAi技术能够抑制SKOV3卵巢癌细胞株Skp2的表达,从而抑制卵巢癌细胞的增殖。

Wnt抑制分子Dkk3、SFRP1和SFRP4在子宫内膜癌中的表达分析

目的研究Dickkopf相关蛋白3(Dickkopf-related protein 3,Dkk3)、分泌型卷曲相关蛋白1(secreted frizzled-related protein 1,SFRP1)和SFRP4在子宫内膜癌(endometrial carcinoma,EC)发生、发展中的作用及病理相关性。方法收集EC标本58例,子宫内膜正常组织30例。用RT-PCR、Western blot法检测组织中Dkk3、SFRP1和SFRP4的表达变化。结果Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期子宫内膜癌组织和正常组织比较,Dkk3、SFRP1和SFPRP4的mRNA及蛋白表达水平降低,并随着组织分期程度的升高而降低(均P<0.05)。结论 Dkk3、SFRP1和SFRP4与EC的分期呈负相关,可考虑作为EC的分期标志。

子宫平滑肌组织中RhoA及Rho激酶的表达与分娩发动的关系

目的探讨子宫平滑肌组织中RhoA及Rho激酶的表达变化及其在分娩发动中的作用。方法选择2007年2至12月在中南大学湘雅二医院妇产科住院分娩的足月临产产妇20例（临产组），足月未临产产妇20例（未临产组）；同期因宫颈上皮内瘤变行子宫切除术的患者20例为对照组。应用实时荧光定量RT—PCR技术和蛋白印迹法检测3组妇女子宫平滑肌组织中RhoA和Rho激酶亚型ROCKlmRNA及其蛋白的表达水平，并对子宫平滑肌组织中RhoAmRNA及蛋白与ROCKImRNA及蛋白的表达水平行相关性分析。结果（1）3组妇女子宫平滑肌组织中RhoAmRNA和ROCKImRNA的表达水平，临产组分别为（3．51±0．56）×10^-3和（4．07±0．66）×10^-3；未临产组分别为（2．754-0．52）×10^-3和（2．71±0．52）×10^-3；对照组分别为（2．11±0．54）×10^-3和（2．014-0．23）×10^-3。临产组产妇子宫平滑肌组织中RhoAmRNA和ROCKImRNA的表达水平均高于未临产组和对照组，差异有统计学意义（P〈0．01）；3组间分别比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）。（2）3组妇女子宫平滑肌组织中RhoA蛋白和ROCKI蛋白的表达水平，临产组分别为0．72±0．23和0．56±0．14；未临产组分别为0．64±0．17和0．42±0．16；对照组分别为0．46±0．15和0．29±0．08。RhoA蛋自在3组中的表达两两比较，差异均无统计学意义（P〉0．05）。临产组和未临产组产妇子宫平滑肌组织中ROCKI蛋白表达水平均高于对照组，差异均有统计学意义（P〈0．01）。（3）3组妇女子宫平滑肌组织中RhoAmRNA表达与ROCKImRNA的表达水平呈正相关关系（r=0．73，P〈0．01）；3组妇女子宫平滑肌组织中RhoA蛋白表达与ROCKI蛋白表达水平也呈正相关关系（r=0．37，P〈0．01）。结论子宫平滑肌组织中RhoA及Rho激酶水平升高与产妇分娩发动密切相关。