大肠杆菌表达腺苷蛋氨酸合酶及产酶条件优化

腺苷蛋氨酸(adenosymethionine,SAM)是人体中重要的代谢中间体,在医疗上被广泛应用于治疗肝炎,抑郁症以及关节炎等疾病。酶法进行腺苷蛋氨酸的生产具有良好的工业前景。将来源于酿酒酵母BY4741中的腺苷蛋氨酸合酶基因(sam2)进行密码子优化后,与p ET-28a(+)和p ET-3b(+)进行连接获得重组质粒p ET-28a(+)-sam2和p ET-3b(+)-sam2,分别实现其在E. coli BL21(DE3)和E. coli Rosetta(DE3)中的异源表达,结果表明,重组菌E. coli BL21/p ET-28a(+)-sam2的SAM酶活较高,达到0. 184 U/m L。对该重组菌株进行发酵条件优化,在最优条件下,SAM合酶最高酶活为0. 245 U/m L,比优化前提高34%。