营养状况影响草鱼鳃软骨吸收^(35)S-Na_2SO_4

饥饿能降低草鱼鱼种鳃软骨对３５Ｓ－Ｎａ２ＳＯ４的吸收．饥饿处理１５ｄ后，草鱼鱼种鳃软骨对３５Ｓ－Ｎａ２ＳＯ４的吸收显著低于正常投喂对照组．饥饿１５ｄ后再恢复正常投喂，草鱼鱼种鳃软骨对３５Ｓ－Ｎａ２ＳＯ４的吸收恢复到正常水平．结果表明：营养状况明显影响草鱼鱼种鳃软骨的生成活性．

^(35)S-杀虫双农药在模拟陆—水生态系统中的迁移和分配

本文应用模拟生态实验装置和放射性同位素示踪技术,研究^(35)S—杀虫双农药在模拟陆—水生态系统中的迁移和分配。为期58d的追踪试验结果表明,^(35)S—杀虫双主要随灌溉水而迁移,由土壤渗漏水回收量占施药总量的51.39％;经水稻根系吸收而残留于植株中的为5.94％,其中,茎、叶残留水平为0.32mg/kg,根系为1.15mg/kg;留存于土壤中的约为18.48％,残留水平为0.01mg/kg。由土壤渗漏水构成的水域放养水生生物模拟水—芜萍(Wolffia arrhiza Wimm)—鱼(草鱼Ctenopharyngodon idellus)—螺生态系统中,为期29d的试验,芜萍对^(35)S—杀虫双积聚率(17.67)>螺(肉10.47)>鱼(全量混合样的积聚率4.29);鱼体中内脏积聚率(6.67)>鳃(1.24)>骨(1.07)>肉(0.56),无生物浓缩。

葡萄球菌S-35对小鼠的毒性作用

[目的]对葡萄球菌S-35进行动物安全性评价。[方法]采用Ames体外试验、小鼠急性毒性试验、小鼠精子畸形试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验及小鼠30 d喂养慢性毒性检测等方法,测定了该菌株对小鼠的毒性、血液生化指标、血项指标及脏器的影响,并做组织切片观察。[结果]在1.6×10^10~2×10^12 cfu/皿剂量范围内,葡萄球菌S-35 Ames体外试验结果为阴性;葡萄球菌S-35对小鼠的急性经口毒性为“低毒”级(LD50>4640 mg/kg);S-35在0.78~12.5 mg/L试验剂量范围内,小鼠精子畸形和骨髓细胞微核试验结果为阴性。小鼠30 d喂养试验,葡萄球菌S-35在125 mg/L的剂量下,小鼠血液生化和血项各项指标均无异常。[结论]葡萄球菌S-35对动物机体安全,该菌株有进一步研究开发为生防菌的价值。

^(35)S-多噻烷的制备

(35)~S-多噻烷,即(35)~S-7-二甲氨基-1,2,3,4,5-五硫环辛烷,是由Na_2^(35)SO_4制备Na_2^(35)S,进而制备Na_2^(35)SS_x,再与氯化物缩合而成,放化收率33.6％,放化纯度97％。

心肌保护药物^(35)S-SPRC的制备及其生物分布定量研究

目的制备心肌保护药物35S-炔丙基半胱氨酸(35S-propargyl-cysteine,35S-SPRC)并以其为示踪剂研究SPRC在SD大鼠体内的生物学分布。方法以半胱氨酸为起始原料合成非标记的SPRC,通过冷试验确定合成路线、反应条件及分析鉴定方法。在此基础上,以35 S-L-半胱氨酸为原料合成35 S-SPRC,35 S-SPRC的鉴定采用TLC法及放射自显影法。按实验要求,将35S-SPRC配制成一定比活度的放射性溶液。取SD大鼠18只,随机分成3组,按15mg/kg的剂量通过灌胃给药35S-SPRC。在不同时相将大鼠处死,取各脏器,称重、匀浆、消化,用液体闪烁计数器测定各样本的放射性活度。结果最终产物35S-SPRC的TLC结果与SPRC完全一致,35S-SPRC的放化纯度大于95%。大鼠体内的生物学分布表明,35S-SPRC在大部分器官内0.5h达到峰值。结论运用35S-SPRC能准确地测定SPRC在大鼠体内的生物分布。

人视网膜S-AgP35诱发EAU动物模型的建立

目的采用合成的人视网膜S-Ag多肽片断第35段抗原决定簇(HS-AgP35)在Lewis大鼠建立实验性葡萄膜炎(EAU)模型。方法雌性Lewis大鼠30只,随机分成3组,每组10只。两实验组中HS-AgP35和BS-Ag分别与CFA混合,致敏Lewis大鼠,正常对照组不做处理。观察大鼠眼部体征和组织病理学改变;ELISA方法检测大鼠血清中抗HS-AgP35/BS-Ag抗体水平;RT-PCR方法检测大鼠脾组织内IL-4和IFN-γ mRNA表达水平。结果两种抗原均能致Lewis大鼠发生EAU,HS-AgP35组100%发病,BS-Ag组60%发病,两者比较差异无统计学意义(P>0.05);HS-AgP35组大鼠发病早(P<0.01),眼部体征和组织病理学改变严重(P<0.01),持续时间长(P<0.01)。两实验组大鼠血清中抗BS-Ag/HS-AgP35抗体水平均高于正常对照组(P<0.01),HS-AgP35组高于BS-Ag组(P<0.05)。两实验组大鼠脾组织中IFN-γ mRNA表达水平均高于正常对照组(P<0.01);HS-AgP35组IL-4 mRNA表达较高(P<0.01),BS-Ag组无明显变化(P>0.05)。结论抗原特异性高的HS-AgP35能诱导Lewis大鼠发生EAU,可建立具有典型眼部表现和组织病理学改变的动物模型。

^(35)S-代森锰锌杀菌剂的合成

用同位素交换法标记合成了有机硫杀菌剂^(35)S-代森锰锌。其步骤包括:乙二胺、二硫化碳在氢氧化钠水溶液中反应,生成代森钠;后者与^(35)S-苯溶液发生同位素交换,生成^(35)S-代森钠;此产品再与氯化锰反应,生成^(35)S-代森锰;最后往此溶液中滴加硝酸锌水溶液,得到^(35)S-代森锰锌。总放化收率37%。

葛根素对Aβ(25-35)诱导PC12细胞凋亡的影响

目的:应用Aβ25-35孵育PC12细胞株制作细胞损伤模型,以研究葛根素对模型细胞凋亡的影响。方法:用Aβ25-35和葛根素对PC12细胞进行处理,MTT法检测干预后不同时间点的细胞活性,电镜观察细胞形态的改变,异硫氰酸荧光素(FITC)标记的AnnexinⅤ及碘化丙锭(PI)双染流式细胞技术检测各组细胞的凋亡率,以确认药物的保护作用。结果:PC12细胞经过Aβ25-35处理后,细胞生存率下降,且呈现时间依赖性。电镜观察显示Aβ25-35可导致PC12细胞凋亡,使用葛根素后,模型细胞凋亡情况明显改善。流式细胞技术显示Aβ25-35损伤模型组凋亡率明显升高,使用葛根素后,细胞凋亡率下降,具有显著性差异(P<0.05)。结论:葛根素可拮抗Aβ25-35诱导的PC12细胞凋亡,具有一定的神经细胞保护功能。

黑逍遥散对Aβ2535诱导AD模型大鼠脑组织神经递质及海马病理改变的影响

目的观察黑逍遥散对Aβ25~35诱导阿尔茨海默病(AD)模型大鼠学习记忆能力改善作用、脑组织乙酰胆碱酯酶(AchE)、胆碱乙酰转移酶和(ChAT)、单胺氧化酶(MAO)及海马病理改变的影响,探讨黑逍遥散防治AD的作用及其机制。方法 110只SD大鼠先随机挑选16只为假手术组,余下作为造模组,经过7 d的水迷宫实验,剔除记忆力异常的大鼠。造模组再按随机数字表分为模型组、阳性对照组及黑逍遥散高、中、低剂量组。采用Aβ25~35海马区注射诱发大鼠AD模型;高、中、低剂量组分别按4.25、8.50和17.0 g·kg-1·d-1灌胃给药,阳性对照组给予哈伯因(0.02 mg·kg-1·d-1)灌胃,每组14只,给药时间持续28 d。Morris水迷宫检测各组大鼠学习记忆能力的变化,最后一次水迷宫后,处死大鼠,收集大鼠海马及血液样本。ELISA法测大鼠脑匀浆AchE、ChAT、MAO活性;HE染色法观察海马病理损伤;电镜观察各组大鼠海马组织超微结构的变化。结果黑逍遥散能改善Aβ25~35所致AD模型大鼠行为学功能,提高学习和记忆能力;降低AD大鼠脑组织AchE和MAO活性、升高ChAT活性(P<0.05);改善Aβ25~35所致AD模型大鼠AD大鼠海马病理损伤。结论黑逍遥散改善AD大鼠学习记忆力、保护AD模型大鼠脑组织结构和功能,这可能与其调节胆碱能和单胺类神经元神经递质有关。

人参皂苷Rg_1对β-淀粉样肽(25-35)侧脑室注射所致小鼠学习记忆障碍的改善作用及其机制

目的 观察人参皂苷Rg1对 β 淀粉样肽 [β AP ,(2 5 - 35 ) ]所致小鼠拟阿尔茨海默 (AD)学习记忆功能障碍的改善作用及其作用机制。方法 小鼠侧脑室注射凝聚态 β AP 4nmol,次日 ,ipRg15和 10mg·kg-1,10d后 ,测试各组被动回避、空间学习记忆能力 ,及皮层、海马组织胆碱乙酰转移酶 (ChAT)和乙酰胆碱酯酶 (AchE)活性变化。结果人参皂苷Rg1可明显改善 β AP所致小鼠被动回避、空间学习记忆能力及皮层海马组织ChAT活性的下降。β AP对小鼠AchE活性无显著性影响 ,但与对照、模型组相比 ,Rg1明显抑制AchE活性。结论 Rg1对 β AP(2 5 - 35 )所致的小鼠学习记忆障碍有显著改善作用 ,其对胆碱能系统的影响是Rg1重要作用机制之一。

电针对Aβ_(25～35)所致AD模型大鼠海马cAMP的影响

目的观察电针对β淀粉样蛋白25～35片段(Aβ25～35)所致阿尔茨海默病(Alzheimer's diseases,AD)模型大鼠环磷酸腺苷(cAMP)的影响。方法 12月龄雄性SD大鼠,按随机数字表分为四组,即正常组、假手术组、模型组、电针组,各10只。采用双侧海马一次性注射凝聚态Aβ25～35制备AD大鼠模型,电针组选取双侧肾俞穴、内关穴和大椎穴,接G6805-Ⅱ型电针治疗仪,2 Hz连续波,强度1 mA,通电20 min,每天1次,每周6次,共治疗2周。采用放射免疫法检测各组大鼠海马cAMP的变化。结果模型组大鼠海马cAMP的含量明显降低,与假手术组比较,差异有统计学意义(P<0.01);电针组大鼠海马cAMP含量与模型组比较有显著提高(P<0.05)。结论电针改善AD大鼠学习记忆能力的机制之一可能是通过提高海马cAMP实现的。

黄精地龙方对体外培养分化的SH-SY5Y细胞Aβ25-35损伤中的保护作用研究

目的探讨黄精地龙方（RPEWM）对体外培养分化的SH-SY5Y细胞Aβ25-35损伤的影响。方法 SH-SY5Y细胞经维甲酸诱导分化,再经Aβ25-35造成细胞老年痴呆（AD）损伤,观察不同浓度RPEWM提取液对损伤后的细胞形态学、细胞增殖情况及培养液中MDA、LDH含量,细胞中SOD、GSH-Px活性和细胞内游离钙含量、Caspase-3酶活性的影响。结果 RPEWM提取液在10-125 mg/L浓度范围内能明显抗细胞AD损伤,促进细胞增殖;RPEWM提取液30,60,90 mg/L均能明显降低MDA、LDH含量及细胞内钙离子、Caspase-3酶活性,升高细胞内SOD、GSH-Px酶活性,且呈剂量依赖性。结论 RPEWM对分化的SHSY5Y细胞Aβ25-35损伤有良好的保护作用,对AD有一定治疗作用。

不同浓度Aβ_(25-35)蛋白模拟阿尔茨海默病模型学习记忆的差异

目的不同浓度的淀粉样蛋白Aβ_(25-35)侧脑室注射后,观察大鼠Morris水迷宫学习记忆能力的变化,探讨制备AD模型大鼠时Aβ_(25-35)注射的最佳浓度。方法雄性SD大鼠随机分为假手术组和模型组,模型组Aβ_(25-35)注射浓度分别为2、4和8μg/μL。参照《大鼠脑立体定位图谱》,选取右侧侧脑室注射聚集态的Aβ_(25-35),制备AD大鼠模型。造模成功后7 d采用Morris水迷宫测试各组大鼠学习记忆能力的变化。结果平均游泳速度比较,各组大鼠间差异无显著性(P>0.05)。逃避潜伏期结果显示,与假手术组比较,模型组大鼠逃避潜伏期时间明显增加,差异有显著性(P<0.05);模型组中,与注射2μg/μL的大鼠比较,注射4μg/μL与8μg/μL后大鼠逃避潜伏期时间明显增加,差异有显著性(P<0.05);4μg/μL与8μg/μL组间比较,差异无显著性(P>0.05)。目标象限的活动时间与路程显示,与假手术组比较,模型组注射不同剂量Aβ_(25-35)的大鼠目标象限活动时间和路程均显著减少,差异有显著性(P<0.05),但模型组不同浓度间比较差异无显著性(P>0.05)。空间探索结果显示,与假手术组比较,模型组注射不同剂量Aβ_(25-35)的大鼠穿越平台次数均显著减少,差异有显著性(P<0.05);模型组中,与注射2μg/μL的大鼠比较,注射4μg/μL和8μg/μL后大鼠穿台次数明显减少,差异有显著性(P<0.05)。4μg/μL与8μg/μL组间比较,差异无显著性(P>0.05)。结论单侧侧脑室注射Aβ_(25-35)蛋白制备大鼠AD模型时,注射Aβ_(25-35)的推荐浓度为4μg/μL。

高灵敏度电化学发光PCR方法检测花椰菜花叶病毒35 S启动子

大多数转基因植物中使用花椰菜花叶病毒(cauliflower mosaic virus,CaMV)35 S作为启动子,因此可通过检测该启动子来判断植物样品中是否含有转基因成分。实验将高灵敏度电化学发光PCR方法用于检测转基因烟草中的CaMV35 S启动子,将该启动子的PCR产物与生物素标记的探针杂交,可以起到特异性筛选产物的作用;与发光标记物——三联吡啶钌标记的探针杂交,从而实现电化学发光检测。两种探针同时与待测样品的PCR产物进行杂交,进一步对样品进行特异性筛选,从而提高了检测的准确性,避免了假阳性结果的产生。实验结果表明:该法可以准确的区分待测样品中是否含有35 S启动子,从而区别转基因烟草和非转基因烟草。电化学发光PCR方法灵敏度高,可靠性强,操作简便,结果准确,有望成为一种高效的转基因植物检测方法。

两歧双歧杆菌F-35对Caco-2细胞中α-葡萄糖苷酶活及葡萄糖转运的影响

本文以Caco-2细胞建立的Transwell模型研究了两歧双歧杆菌F-35的发酵上清和细胞内容物对葡萄糖转运和α-葡萄糖苷酶活性的影响及其对α-葡萄糖苷酶(S-I)、钠-葡萄糖共转运体-1(SGLT-1)、葡萄糖转运蛋白-2(GLUT-2)基因表达的影响。结果表明,两歧双歧杆菌F-35的发酵上清和细胞内容物对α-葡萄糖苷酶活性的抑制率分别为13.3%和21.0%,对葡萄糖的转运抑制率分别为15.0%和29.7%;使S-I基因表达水平分别下调3.3倍和3.7倍,SGLT-1基因表达水平分别下调3.5倍和1.6倍,GLUT-2的基因表达水平分别下调4.4倍和1.3倍,与对照组相比均有显著性差异。研究表明,两歧双歧杆菌F-35可通过对α-葡萄糖苷酶活性和葡萄糖转运的抑制及对S-I、SGLT-1和GLUT-2 mRNA表达量的抑制,来延缓餐后碳水化合物水解和影响葡萄糖吸收,具有潜在的降血糖作用。

脂氧素A4对Aβ_(25-35)所致N2a细胞损伤的保护作用初探

目的:初步探讨脂氧素A4(LXA4)对β-淀粉样蛋白25-35(Aβ_(25-35))损伤N2a细胞的保护作用及其机制。方法:用不同浓度Aβ_(25-35)处理N2a细胞,建立阿尔茨海默病(AD)细胞损伤模型,通过细胞形态学观察、CCK-8法和Hoechst 33258染色来评价细胞模型是否构建成功。细胞分为对照组、模型组(20μmol/L Aβ_(25-35))和LXA4保护组(50、100、200 nmol/L)。采用CCK-8法检测N2a细胞的活性;荧光酶标仪检测N2a细胞内活性氧(ROS)水平;ELISA法检测细胞培养上清中白介素-10(IL-10)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)。结果:20μmol/L Aβ_(25-35)处理N2a细胞24 h可建立细胞损伤模型。LXA4保护组的细胞存活率均较模型组显著升高。与模型组相比,200 nmol/L LXA4保护组细胞内ROS水平显著降低(P<0.01);200 nmol/L LXA4保护组IL-10水平显著高于模型组(P<0.01);200 nmol/L LXA4保护组的TNF-α水平显著低于模型组(P<0.01)。结论:LXA4对Aβ_(25-35)损伤N2a细胞具有保护作用,其机制可能是抑制ROS水平以及调节炎症因子的表达。

Aβ_(25-35)诱导PC12细胞损伤的蛋白质组学研究

目的识别AD细胞模型中蛋白质组改变,在蛋白质水平上揭示Aβ的作用机制。方法利用双向差异凝胶电泳技术(2D-DIGE)和质谱(MS)技术,探索20μmol/L浓度Aβ25-35肽段作用48h后PC12细胞蛋白质组的改变。结果2D-DIGE图像上出现约2000个蛋白点。与对照组比较,Aβ25-35作用下共有29个蛋白的表达有显著差异,其中25个蛋白表达量上调及4个蛋白表达量下调超过30%。质谱鉴定出7个蛋白点,分为3类:(1)具有分子伴侣活性的蛋白:葡萄糖调节蛋白75(glucose-regulated protein75,GRP75)、热休克同源蛋白71(heat shock cognate71kDa protein,HSC71)、calreticulin表达量均上调。(2)细胞骨架蛋白:β-微管蛋白(tubulin beta chain15,TBETA-15)和低分子量神经细丝蛋白(neurofilament light polypeptide,NF-L)表达量亦上调。(3)与能量代谢有关的酶:肌酸激酶B(creatine kinase-B,CKB)和醛缩酶A(aldolaseA)蛋白表达量均下调。结论本实验首次将DIGE和MS方法应用于Aβ25-35神经毒性作用机制研究,在蛋白质组水平上揭示了Aβ25-35毒性作用的早期机制。

左旋黄皮酰胺对冈田酸和β淀粉样肽_(25-35)神经毒性的保护作用

探讨左旋黄皮酰胺对冈田酸(okadaic acid,OA)诱导的人神经瘤细胞(SH-SY5Y)和去卵巢(ovariectomy,OVX)及单侧侧脑室注射Aβ25-35所致神经元损伤的保护作用。通过MTT试验、LDH释放测定试验、Hoechst 33258荧光染色试验以及SH-SY5Y细胞检测,考察左旋黄皮酰胺拮抗冈田酸诱导的细胞毒作用。通过避暗试验、电镜检测、Nissl体染色及HE染色,考察左旋黄皮酰胺对去卵巢及侧脑室注射Aβ25-35大鼠神经元的保护作用。左旋黄皮酰胺可明显拮抗冈田酸诱导的细胞毒作用,提高去卵巢及侧脑室注射Aβ25-35大鼠的学习记忆能力,保护海马及皮层神经元。左旋黄皮酰胺可拮抗冈田酸及Aβ25-35诱导的神经毒性,具有神经保护作用。

^(35)S同位素交换法制备二种含硫农药中间体

一、引言马拉硫磷和杀螟松是含硫的高效低毒有机农药,可防治棉花、果树等多种虫害,在我国已使用多年,现发现按不同配比将它们与其它农药混合使用,可提高药效。为进一步研究它在植物中的代谢过程及其产物,研究它在农作物上的残留动态。

^(35)S 标记抗人肝癌单克隆抗体Hepama-1的制备

采用Ｈ２３５ＳＯ４与苯胺合成３５Ｓ－苯胺硫酸盐，经高温转换成３５Ｓ－对氨基苯磺酸，然后再用碳二亚胺交联到抗人肝癌单克隆抗体Ｈｅｐａｍａ－１上。所得３５Ｓ－ＭＡｂＨｅｐａｍａ－１用Ｅｌｉｓａ方法检测仍保持良好的免疫活性。产品最高比活度可达５１．８ＧＢｑ／ｇ，放化纯度＞９５％，放化产率以Ｈ２３５ＳＯ４投料计算最高可达２７％，以３５Ｓ－对氨基苯磺酸投料计算最高可达４５％，适用于做荷瘤裸鼠动物模型放免治疗研究实验。