一种DNA标记配体S-Acetyl-NHS-MAG3的合成研究

报导了S 乙酰基 巯基乙酸N 羟基丁二酰亚胺酯 (SATA) ,S 乙酰基 巯基乙酸三甘氨酸 (S Acetyl MAG3) ,S 乙酰基 巯基乙酸三甘氨酸N 羟基丁二酰亚胺酯 (S Acetyl NHS MAG3)的合成方法 ,用IR和1HNMR对其结构进行了表征 .室验表明 :S 乙酰基 巯基乙酸三甘氨酸与N 羟基丁二酰亚胺在二环己基碳二亚胺 (DCC)的二氯甲烷溶液中 ,在 40～ 5 0℃下反应 2 4h得到S 乙酰基 巯基乙酸三甘氨酸N 羟基丁二酰亚胺酯 (S Acetyl NHS MAG3)的产率较高 ,副产物较少 。

丙酮酸激酶翻译后修饰影响肉品质研究进展

畜禽宰后肌肉向肉的转变过程会经历一系列生化反应,其中蛋白质翻译后修饰是影响肉品质的关键因素。糖酵解是宰后肌肉的主要供能途径,丙酮酸激酶作为糖酵解限速酶,蛋白质翻译后修饰通过改变其功能和结构而影响肉品质。本文以丙酮酸激酶的结构和功能为切入点,综述丙酮酸激酶翻译后修饰对其功能结构的影响和丙酮酸激酶磷酸化、乙酰化及S-亚硝基化影响肉品质的研究进展。

人端粒酶催化亚单位(hTERT)反义分子探针的制备与理化性质初步研究

制备放射性核素99Tcm标记的针对人端粒酶催化亚单位(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)mRNA的反义分子探针,探讨其在体外的稳定性和相关理化性质。针对hTERT mRNA(GEN-BANK号为AF015950)的第2331~2348位核苷酸(含18个碱基),即5′-TCAAGAGCCACGTCTCTA-3′(hTERT SON),设计反义寡核苷酸序列(hTERT ASON)为5′-TAGAGACGTGGCTCTTGA-3′;对hTERTASON进行适当修饰。通过双功能螯合剂S-Acetyl NHS-MAG3进行放射性核素99Tcm标记。针对影响标记的主要因素(SnCl2用量、反应体积、反应时间等)进行条件摸索,建立最优化标记方案。纸层析法测定反义分子探针(99Tcm-hTERT ASON)的标记率和放射化学纯度,计算比活度。检测99Tcm-hTERT ASON的放射稳定性与序列稳定性,以及血清蛋白结合率。所有结果通过统计学软件SPSS12.0进行分析。室温下反应15~30 min后,99Tcm-hTERT ASON的标记率为76%±5%(n=5);在相同条件下,无双功能螯合剂作用,ASON的标记率仅为5.0%±1.6%(n=5);二者比较有显著差异(P<0.05)。99Tcm-hTERT ASON放射化学纯度达到96%以上,比活度为1 850 GBq/g。在不同条件下,99Tcm-hTERT ASON的放射化学纯度在24 h内均达到93%以上。PAGE凝胶电泳显示99Tcm-hTERT ASON在与人新鲜血清37℃孵育6 h内未发生任何降解。与人新鲜血清37℃孵育1、3和6 h后,99Tcm-hTERT ASON的血清蛋白结合率分别为15.0%±1.6%、18.0%±1.9%和20.0%±2.4%。99Tcm-hTERT ASON具有较高标记率、放射化学纯度和比活度;其放射稳定性和序列稳定性均良好,与血清蛋白结合率较低,适合作为反义显像剂用于进一步研究。

TiO_2悬浮体系光催化降解反应动力学模型的建立

以纳米材料TiO2 作为光催化剂 ,乙酰甲胺磷 (DMAPT)作为目标化合物 ,在DGF 1型多功能光化学反应仪上研究了悬浮体系TiO2 光催化降解反应的动力学模型 .模型中的主要参数有 :TiO2 用量、入射光强、反应器的几何半径、反应器的经验参数、反应物初始浓度、羟基自由基二级速率常数及已知化合物的物理性质 (分子的摩尔体积和溶解度 ) .模型较好地预测了其他化合物 (如三氯乙烯 (TCE)、四氯乙烯 (PCE)、对 二氯苯 (DCB)和四氯化碳(CTC) )的光催化降解 .对C0 (TCE) =2 2 .1mg/L ,C0 (PCE) =2 0mg/L和C0 (DEB) =40mg/L的反应物 ,完全降解所需的时间分别为 3,4和 5min .入射光强在 1.38～ 6 .0 5W /cm2 范围时 ,反应速率与光强的 0 .5次方成正比 ,催化剂最佳用量随着入射光的增强而增加 .

TiO_2光催化降解乙酰甲胺磷

在TiO2悬浮体系中,利用光催化技术消除乙酰甲胺磷(DMAPT).探索了催化剂用量和目标物浓度对消除速率的影响.结果表明,催化剂的最佳用量为4g·l-1,DMAPT的光催化降解规律符合L-H模型,吸附常数和反应速率参数分别为2mmol-1·l和0.6mmol·l-1·min-1.反应中主要的活性物种为·OH.反应的主要中间产物和矿化产物有O,S-二甲基硫代磷酰胺酯,O,O',S-三甲基硫代磷酸酯和磷酸甲酯等.DMAPT的降解从C—N键的断裂开始,随后经过P—N,P—S,P—C键的氧化分解,生成低毒和无毒的中间产物,并随着反应的继续最终达到彻底矿化,最终产物为SO42-,NO3-,PO34-和CO2.

荷乳腺癌小鼠c-myc mRNA反义寡核苷酸显像研究

目的建立99mTc标记寡核苷酸的方法并用于荷乳腺癌小鼠反义寡核苷酸显像研究。方法利用双功能螯合剂N-羟基琥珀酰亚胺-巯乙苷肽(S-Acetyl-NHS-MAG3)对一段15碱基c-mycmRNA反义寡核苷酸片段进行99mTc标记;对荷乳腺癌昆明种小鼠进行标记反义寡核苷酸生物学分布与显像研究。结果生物学分布结果表明,相对于正义核酸而言,反义核酸在肿瘤组织中的摄取明显增高(P<0.05)。在反义寡核苷酸显像组,肿瘤组织显像剂摄取活跃,肿瘤/肌肉比值最高可达5.5。在正义寡核苷酸显像组及阻断组,肿瘤组织均未出现明显的显像剂浓聚。结论99mTc标记反义寡核苷酸有望成为一种新的显像剂,在分子水平上用于恶性肿瘤的早期、特异和无创性诊断。

辛硫磷亚致死剂量对桑粉虱解毒酶活性的影响

【目的】研究辛硫磷对桑粉虱成虫的毒力及其亚致死剂量作用下桑粉虱成虫谷胱甘肽S-转移酶(GST)、羧酸酯酶(CarE)、乙酰胆碱酯酶(AchE)的活性变化,为桑粉虱抗药性研究及杀虫剂合理使用提供依据。【方法】采用闪烁管药膜法测定辛硫磷对桑粉虱亚致死剂量LC10、LC30、LC50,玻璃均浆器冰浴提取经过处理的桑粉虱酶液,用BIO-RAD全波长微孔板酶标读数仪测定GST、CarE、AchE。【结果】辛硫磷对桑粉虱成虫亚致死剂量LC10、LC30、LC50分别为0.0090、0.0899、0.4427μg/mL,随着辛硫磷亚致死剂量浓度增大,桑粉虱成虫GST活性显著增大、CarE及AchE活性显著下降。【结论】GST在桑粉虱对辛硫磷的解毒代谢中发挥作用。

S-乙酰基-NHS-MAG_3在反义显像研究中的应用及进展

随着反义显像研究的深入,一种新的双功能螯合剂巯基乙酰三甘氨酰-N-羟基丁二酰亚胺酯(S-乙酰基-NHS-MAG3)受到广泛重视。利用反义寡核苷酸的NHS-MAG3进行S-乙酰基-NHS-MAG3放射性核素标记,得到的标记产物具有较高的标记率、比活度和放化纯度,且体内外稳定性好,与血清蛋白的非特异性结合低;S-乙酰基-NHS-MAG3不会影响反义寡核苷酸的杂交特异性,并能增加标记的反义寡核苷酸在细胞内的积聚,因此,S-乙酰基-NHS-MAG3在反义显像研究中具有重要的应用价值。

S-亚硝基-N-乙酰基-D,L-青霉胺二肽分子中S—NO键断裂能的测定

利用滴定量热技术并结合适当的热力学循环测定了乙腈溶液中7个S-亚硝基-N-乙酰基-D，L-青霉胺二肽化合物中S—NO键的异裂能和均裂能，其能量范围分别为234．5～246．2kJ／mol和101．6～122．1kJ/mol. 结果表明，所研究的亚硝基硫醇化合物更容易通过S—NO键的均裂释放NO自由基（NO）．通过热力学循环对7个亚硝基硫醇化合物自由基负离子中S—NO键的异裂能和均裂能进行估算，能量范围分别为19．2～35．5kJ／mol和～4．2～22．6kJ／mol，表明这些自由基负离子在室温下不稳定，容易通过S—NO键的异裂释放出NO^-．

离子色谱-积分脉冲安培法测定燕窝中N-乙酰神经氨酸的含量

目的建立一种离子色谱-积分脉冲安培法测定燕窝、速食燕窝及银耳、海藻酸钠、鱼胶等常见伪品燕窝中N-乙酰神经氨酸的含量。方法采用DionexICS-5000离子色谱仪、DionexASRSRR5004-mm抑制器、电导检测器测定，色谱柱为CarbonPacPAI柱，柱温为30℃．流动相为100mmol／LNaOH＋50mmol／LNaAc，流速为1．0mL／min，进样量为10μL，分别测定燕窝、速食燕窝及伪品中N-乙酰神经氨酸的含量。结果N-乙酰神经氨酸在0．25～5．00μg/mL范围内线性良好，r=0．9999；在燕窝中的平均回收率为99．7％，RSD为0．82％（n=6）。结论本方法灵敏度高、重复性好，可准确测定燕窝中^L乙酰神经氨酸的含量，为燕窝的质量控制提供了一种检测方法。

Michael加成在代谢物合成中的应用

许多化学物质在人体内的代谢过程都是化学物质首先与谷胱甘肽（ＧＳＨ）中半胱氨酸结合，然后降解，以乙酰半胱氨酸的衍生物形式排出体外。这些代谢物常用Ｍｉｃｈａｅｌ加成的方法制备。乙酰半胱氨酸是Ｍｉｃｈａｅｌ供电体，化学物质如丙烯腈，丙烯酰胺为Ｍｉｃｈａｅｌ受电体。利用这一反应合成了Ｎ－乙酰基－Ｓ－丙酰胺基－Ｌ－半胱氨酸（１）和Ｎ－乙酰基－Ｓ－腈乙基－Ｌ－半胱氨酸（２）。

在线固相萃取-高效液相色谱法测定人体尿液中的N-乙酰-S-(N-甲基甲氨酰)半胱氨酸

建立了在线固相萃取-高效液相色谱法测定人体尿液中的N-乙酰-S-（ N-甲基甲氨酰）半胱氨酸（ AM-CC）的分析方法。左泵以AminoPac PA柱作为在线固相萃取柱、5 mmol/L KH2 PO4溶液为流动相,将AMCC与样品基质分离；然后通过控制阀切换时间仅将含AMCC的部分样品溶液在线洗脱至Acclaim PAⅡ C18分析柱上,右泵以0.1％ H3 PO4溶液（含5％乙腈）和乙腈为流动相对AMCC进行梯度洗脱分离和分析测定。结果表明,AMCC在1.0～100 mg/L范围内线性关系良好,相关系数r〉0.999；上样量为10μL时,方法定量限为0.2 mg/L；回收率在85.9％～82.9％之间；相对标准偏差（n=6）分别为0.2％（保留时间）和4.0％（峰面积）。与传统的离线固相萃取-高效液相色谱法相比,本方法更为简便环保、高效稳定。用本方法测定了7份人体尿液,结果满意。

寄主对豆野螟的药剂敏感性和体内解毒酶活性的影响

比较取食不同寄主植物的豆野螟MarucatestulalisGeyer幼虫对3种药剂敏感性的差异,及其体内4种解毒酶活性之间的差异。结果表明:取食不同寄主植物的豆野螟对高效顺反氯氰菊酯和灭多威的敏感性差异显著,豇豆>四季豆>扁豆;对茚虫威的敏感性差异不显著。取食不同寄主植物的豆野螟体内4种酶活性都发生了变化,乙酰胆碱酯酶(AChE)羧酸酯酶(CarE)和多功能氧化酶(MFO)活性之间存在显著差异,豇豆>四季豆>扁豆;但谷胱甘肽-S转移酶(GST)活性之间不具有显著差异。推测:取食扁豆的豆野螟体内产生对高效顺反氯氰菊酯和灭多威具有一定解毒作用的物质;而取食豇豆的豆野螟产生的某种物质对茚虫威具有一定的解毒作用,4种酶在其对茚虫威的解毒过程中起一定的作用。

接触环氧乙烷医务人员尿液中N-乙酰基-S-(2-羟乙基)-L-半胱氨酸水平测定方法研究

目的探讨接触环氧乙烷(EO)医务人员尿液中N-乙酰基-S-(2-羟乙基)-L-半胱氨酸(HEMA)的测定方法,尝试评估该群体EO内暴露水平。方法选取江苏省中医院日常工作中接触、使用EO消毒医疗用品的12名手术室器械护士作为试验组,另选取同期未接触EO消毒医疗用品的12名放射科医护志愿者作为对照组,收集两组研究对象工作日24 h尿液,尿样在酸化、离心、过滤、稀释后,经超高效液相色谱仪(UPLC)C18色谱柱分离,以乙酸水溶液、乙腈为流动相进行梯度淋洗,再经三重四极杆串联质谱多反应监测模式定性、定量,比较两组HEMA水平。结果HEMA的线性范围为0.1~100.0μg/mL,相关系数为0.9991,检出限为0.03μg/mL,定量限为0.1μg/mL;当加标水平为5.0、20.0、80.0μg/mL时,测得加标回收率为91.6%~94.7%,批内精密度为4.7%~7.2%,连续测定3 d的批间精密度为4.5%~8.1%;试验组和对照组HEMA水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论本研究所使用方法的主要性能指标均满足《职业卫生标准制定指南第5部分:生物材料中化学物质测定方法》的要求,适用于接触EO医务人员尿液中HEMA水平的测定,所需仪器设备均较常见,便于推广。

芪归健脑方对阿尔茨海默病病人血浆胆碱酯酶活性和认知能力的影响

目的观察芪归健脑方对阿尔茨海默病(AD)病人血浆中乙酰胆碱酯酶(AChE)活性和认知能力的影响。方法选取AD病人60例,随机分为两组:芪归健脑方组和西药治疗组,各30例。芪归健脑方组口服芪归健脑方,每次100g,每日2次。西药治疗组口服吡拉西坦(脑复康),每次0.8g,每日3次。两组均连续治疗6个月,治疗前后分别测定血浆中AChE活性,并应用简易智力状态量表评估智力障碍程度。结果两组治疗后AChE活性和简易智力状态量表积分较治疗前均明显增加(P<0.05),但两组间治疗后比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论芪归健脑方能提高AD病人血浆中AChE的活性,并且能明显改善其认知能力。

1－N－（苯并咪唑－1－乙酰基）－4－苯基－3－氨基硫脲金属配合物的合成及结构表征

合成了新配体１－Ｎ－（苯并咪唑－１－乙酰基）－４－苯基－３－氨基硫脲（ＢＰＭＳ），将其与Ｍｎ（Ⅱ）、Ｃｏ（Ⅱ）、Ｎｉ（Ⅱ）、Ｃｕ（Ⅱ）、Ｃｄ（Ⅱ）、Ｚｎ（Ⅱ）、ＵＯ２（Ⅱ）等金属的醋酸盐反应，合成了７个新配合物。所有化合物均经元素分析、ＩＲ、１ＨＮＭＲ和热重分析等表征。红外光谱表明，配体以四齿方式通过烯醇式羰基氧原子。

1-苯偶氮基-1-[1,3-二硫戊环/二噻烷-2-亚甲基]-4-苯基-3-丁烯酮的合成方法研究

以α-乙酰基二硫缩烯酮为原料,研究了其与芳基重氮盐的亲电取代反应,同时,在碱性条件下,实现了产物与苯甲醛的缩合反应,以较高产率获得了1-苯偶氮基-1-[1,3-二硫戊环/二噻烷-2-亚甲基]-4-苯基-3-丁烯酮化合物,该反应条件温和,操作方法简单,同时对其反应机理进行了初步探讨.

用多项生物标志物评价家用洗涤剂对小鼠的早期影响

将小鼠暴露于不同浓度的家用洗涤剂后,对肝ATP酶、谷胱甘肽转硫酶(GST)、总氧自由基清除能力(TOSC)和脑乙酰胆碱酯酶(AChE)进行测定.结果显示,4周龄的小鼠暴露于家用洗涤剂时,在4~12d时间里即可使AChE、GST、TOSC等生物标志物受到影响,但ATP酶活力改变不明显,这些生物标志物的改变证明了家用洗涤剂对小鼠的早期影响.

3-氨基-5-取代苯胺基-6-甲基-1,2,4-三嗪的合成

本文合成了一系列新的３－氨基－５，６－二取代－１，２，４－三嗪化合物，其结构经元素分析、ＩＲ、＾１ＨＮＭＲ和ＭＳ等确证。

S-3-奎宁醇的合成研究

探讨S-3-奎宁醇的合成新工艺。通过构型转化的方法,以3-奎宁酮为原料,经硼氢化钾还原、与乙酰氯成酯、水解得S-3-奎宁醇。其结构经1H NMR等表征证实,总收率可达到88.96%。该合成路线操作步骤简单、收率高,具有工业应用价值。