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宋内氏痢疾杆菌O-SP-TT结合疫苗的制备及其免疫学特性的研究 被引量:3
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作者 王燕 杜琳 +1 位作者 田玉珍 谢贵林 《微生物学免疫学进展》 2002年第2期1-6,共6页
宋内氏痢疾杆菌 (S .Sonnei)的一个重要保护性抗原是菌体抗原 (O抗原 )即细菌细胞壁中的脂多糖 (LPS)成分 ,已证实血清中足够水平的抗LPSIgG抗体即能对该菌提供免疫保护作用。本文选用Westphal热酚法提纯宋内氏痢疾菌LPS ,经酸水解法进... 宋内氏痢疾杆菌 (S .Sonnei)的一个重要保护性抗原是菌体抗原 (O抗原 )即细菌细胞壁中的脂多糖 (LPS)成分 ,已证实血清中足够水平的抗LPSIgG抗体即能对该菌提供免疫保护作用。本文选用Westphal热酚法提纯宋内氏痢疾菌LPS ,经酸水解法进一步脱毒处理后得到无毒但却具弱免疫原性的O 特异性多糖 (O SP) ,然后采用化学方法即通过连接剂己二酸二肼 (ADH)将其共价结合到破伤风类毒素 (TT)上 ,共制备得到了三批宋内氏痢疾杆菌O SP TT结合疫苗。经生化和免疫学方法检测证实我们提纯的LPS、OSP及其合成的O SP AH衍生物、O SP TT结合物均具有宋内氏痢疾杆菌O抗原特异性 ,同时其核酸和杂蛋白质含量低 (≤ 2 % ) ,表明纯度较高。同时经小鼠免疫原性试验证实三批结合物免疫小鼠后产生的抗LPSIgG抗体滴度均比单一O SP免疫后产生的要高出 10倍以上 ,且结合物再次注射后存在加强应答。补体介导的体外杀菌力试验表明结合物免疫小鼠后诱导产生的血清抗LPSIgG抗体对宋内氏痢疾杆菌具特异性杀菌活性。本文结果表明宋内氏痢疾杆菌O SP TT结合疫苗可望作为一种有效的侯选痢疾疫苗做进一步的大规模人体观察。 展开更多
关键词 宋内氏痢疾杆菌 O-特异性多糖 破伤风类毒素 结合疫苗 免疫学特怀
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痢疾结合疫苗LPS制备条件的优化研究
2
作者 宣俊文 董勇前 +3 位作者 王晶 赵庆萱 赵志强 谢贵林 《微生物学免疫学进展》 2010年第4期17-22,共6页
通过对痢疾杆菌LPS提取过程中主要制备环节的优化和改进,确立最佳提取条件和纯化过程,并应用优化后的工艺路线分别制备八批次福氏2 a痢疾杆菌和宋内氏痢疾杆菌LPS;福氏2 a痢疾杆菌LPS批平均产量为1.633g,宋内氏痢疾杆菌LPS批产量平均为1... 通过对痢疾杆菌LPS提取过程中主要制备环节的优化和改进,确立最佳提取条件和纯化过程,并应用优化后的工艺路线分别制备八批次福氏2 a痢疾杆菌和宋内氏痢疾杆菌LPS;福氏2 a痢疾杆菌LPS批平均产量为1.633g,宋内氏痢疾杆菌LPS批产量平均为1.251g,批产量相对稳定,平均产量比优化改进前提高20%以上。LPS经过酸水解、柱层析纯化获得目标O-SP,福氏2 a痢疾杆菌和宋内氏痢疾杆菌O-SP的得率分别为20%和28%。检测结果证明,LPS和O-SP各项指标均符合规程(草案)相关要求。实验为今后痢疾结合疫苗大规模制备工艺的改进和提高打下了基础。 展开更多
关键词 结合疫苗 福氏2A痢疾杆菌 宋内氏痢疾杆菌 LPs纯化
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不同蛋白载体的痢疾多糖结合疫苗小鼠免疫原性对比试验 被引量:2
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作者 雍元 杜琳 +3 位作者 邱晓玲 王燕 何向东 谢贵林 《微生物学免疫学进展》 2003年第4期13-18,共6页
试验中以小鼠为动物模型 ,对不同蛋白载体的痢疾多糖结合疫苗进行免疫效果观察。 3种福氏 2a痢疾结合疫苗和 3种宋内氏痢疾结合疫苗分别皮下免疫NIH小鼠 ,同时设置O SP(O 特异性多糖 )对照组 ,免疫 3针 ,在不同免疫针次间采血 ,用ELlSA... 试验中以小鼠为动物模型 ,对不同蛋白载体的痢疾多糖结合疫苗进行免疫效果观察。 3种福氏 2a痢疾结合疫苗和 3种宋内氏痢疾结合疫苗分别皮下免疫NIH小鼠 ,同时设置O SP(O 特异性多糖 )对照组 ,免疫 3针 ,在不同免疫针次间采血 ,用ELlSA测定抗体滴度。单独使用福氏 2aO SP和宋内氏O SP免疫后 ,小鼠血清中几乎没有抗LPSIgG抗体产生 ,而用结合疫苗免疫后 ,小鼠血清中产生了抗LPSIgG抗体 ,且第二次、第三次免疫后 ,小鼠血清中抗LPSIgG抗体水平有显著升高 ,表明结合疫苗具有加强免疫应答效应。三种不同的痢疾结合疫苗相比较 ,F 2a O SP rEPA结合疫苗较F 2a O SP TT结合疫苗和F 2a 0 SP DT结合疫苗的小鼠抗LPSIgG抗体水平高 ,S O SP rEPA结合疫苗较S O SP TT结合疫苗和S O SP CRM 9,结合疫苗的小鼠抗LPSIgG抗体水平高。以rEPA作为载体的痢疾结合疫苗比DT 。 展开更多
关键词 福氏2a痢疾结合疫苗 宋内氏痢疾结合疫苗 免疫原性 蛋白载体 免疫效果 小鼠 对比试验
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类志贺邻单胞菌7-63-5株及其多糖的研究 被引量:1
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作者 杜琳 蒋奕 +2 位作者 谭小梅 马国荣 谢贵林 《微生物学免疫学进展》 2006年第3期1-4,共4页
类志贺邻单胞菌O17血清型与宋内氏痢疾志贺氏菌的脂多糖结构一致,类志贺邻单胞菌7-63-5株属于O17血清型。实验中通过对该菌株培养特性、生化特征、免疫学特性的研究,证明其完全符合类志贺邻单胞菌特性。多糖的研究证明,类志贺邻单胞菌7-... 类志贺邻单胞菌O17血清型与宋内氏痢疾志贺氏菌的脂多糖结构一致,类志贺邻单胞菌7-63-5株属于O17血清型。实验中通过对该菌株培养特性、生化特征、免疫学特性的研究,证明其完全符合类志贺邻单胞菌特性。多糖的研究证明,类志贺邻单胞菌7-63-5株的O-特异性多糖无论从化学结构,还是免疫学特性上,都与宋内氏I相菌的一致。因此,类志贺邻单胞菌7-63-5株可以用以研究宋内氏痢疾多糖蛋白质结合疫苗。 展开更多
关键词 类志贺邻单胞菌 多糖 宋内氏痢疾结合疫苗
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宋氏I相/福氏1b痢疾双价抗原菌株的构建 被引量:1
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作者 包幼迪 詹丽钦 +5 位作者 林应锵 郑铃 王薇媛 纪绍梅 蒋志兵 辜清吾 《福建医学院学报》 1991年第2期91-94,共4页
以菌体内重组方法将脱失了部分毒力基因片段的宋氏痢菌Ⅰ相抗原质粒诱动到已脱失140Md毒力质粒的福氏痢菌1b中,构建成兼具福氏及宋氏“O”抗原的二价菌株。该菌株不含编码卡那霉素抗性基因的Tn5;连续传25代仍对宋氏及福氏1b痢菌O抗血清... 以菌体内重组方法将脱失了部分毒力基因片段的宋氏痢菌Ⅰ相抗原质粒诱动到已脱失140Md毒力质粒的福氏痢菌1b中,构建成兼具福氏及宋氏“O”抗原的二价菌株。该菌株不含编码卡那霉素抗性基因的Tn5;连续传25代仍对宋氏及福氏1b痢菌O抗血清呈凝集反应;质粒电泳图显示该二价菌株拥有供体菌赋予的75Md的质粒带。 展开更多
关键词 细菌性 痢疾 痢菌杆菌 二价菌株
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甲型副伤寒多糖-破伤风类毒素结合疫苗的制备及安全性和免疫原性 被引量:2
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作者 秦敏 杨国友 +3 位作者 涂小萍 杨蒲 林丽 黄锴 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2006年第6期594-596,共3页
目的 制备甲型副伤寒多糖-破伤风类毒素结合疫苗,并检测其安全性与免疫原性。方法 副甲O-SP溶液加入CDAP活化,己二酰肼(ADH)衍化,在碳二亚胺(EDAC)作用下与破伤风类毒素(TT)偶联,反应物经柱层析纯化,制得多糖蛋白结合物,经... 目的 制备甲型副伤寒多糖-破伤风类毒素结合疫苗,并检测其安全性与免疫原性。方法 副甲O-SP溶液加入CDAP活化,己二酰肼(ADH)衍化,在碳二亚胺(EDAC)作用下与破伤风类毒素(TT)偶联,反应物经柱层析纯化,制得多糖蛋白结合物,经质量检测后,进行安全性及免疫原性试验。结果 所制备的结合物多糖蛋白比稳定在0.6~0.8之间,CL-4B检测Kd≤0.2时的回收率大于75%,高相对分子质量结合物含量不低于90%。免疫双扩散试验显示结合物与副甲家兔超免血清和TT抗血清均产生可见沉淀线。动物安全试验均合格。结合物免疫小鼠后,其血清副甲LPS抗体滴度显著增长。阳转率达到100%。结论 用CDAP活化多糖制备的甲型副伤寒-破伤风类毒素结合疫苗质量稳定,安全可靠,且具有良好的免疫原性。 展开更多
关键词 甲型副伤寒 破伤风类毒素 结合疫苗 安全性 免疫原性
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痢疾多糖-蛋白结合疫苗小鼠母子抗体传递试验
7
作者 雍元 杜琳 +3 位作者 杜送田 王燕 陈志宏 谢贵林 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第8期658-661,共4页
目的 以小鼠为试验动物模型 ,用不同的痢疾多糖 蛋白结合疫苗免疫母鼠 ,观察IgG抗体的母婴传递情况。方法 用福氏 2a痢疾多糖 重组铜绿假单胞菌外毒素A(rEPA)结合疫苗 (F2a O SP rEPA)和宋内痢疾多糖 重组铜绿假单胞菌外毒素A结合疫... 目的 以小鼠为试验动物模型 ,用不同的痢疾多糖 蛋白结合疫苗免疫母鼠 ,观察IgG抗体的母婴传递情况。方法 用福氏 2a痢疾多糖 重组铜绿假单胞菌外毒素A(rEPA)结合疫苗 (F2a O SP rEPA)和宋内痢疾多糖 重组铜绿假单胞菌外毒素A结合疫苗 (S O SP rEPA)分别皮下免疫母鼠 ,待其怀孕、分娩 ,用ELISA分别检测母体、子体小鼠的IgG抗体滴度。结果 子体小鼠出生第 2周的IgG抗体水平较高 ,随着小鼠周龄的增加 ,抗体水平逐渐下降。结论 痢疾多糖 蛋白结合疫苗免疫母体后 ,诱导的特异性抗体可经母体传递给子体 ,抗体滴度随时间的推移而逐渐降低。 展开更多
关键词 痢疾多糖-蛋白 疫苗 小鼠 抗体传递试验 母体免疫 免疫接种
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