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Isolation and Identification of the Pathogens of Bullfrog Streptoccus Disease
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作者 Hang Xiaoying Zhou Dongren +2 位作者 Luo Yizhi Shi Weida Ye Xueping 《Animal Husbandry and Feed Science》 CAS 2015年第1期36-38,共3页
The tested strain from typical clinical cases,and the physio-chemical characteristics,16 S rRNA gene sequence and drug sensitivity challenge property were analyzed.This isolate was determined as Streptococcus agalacti... The tested strain from typical clinical cases,and the physio-chemical characteristics,16 S rRNA gene sequence and drug sensitivity challenge property were analyzed.This isolate was determined as Streptococcus agalactiae,16 S rRNA gene fragment of 1 280 bp in length.Blast analysis showed that this fragment shared a 100% homology with the conservative region of Streptococcus agalactiae isolate(AB023574),Streptococcus dysqalactiae isolate(HM146084.1,AB537922,EU075033),Streptococcus difficilis isolate(AB112407) accessed in Genbank.The isolate was sensitive to ciprofloxacin,neomycin,spectinomycin,furadantin and enoxacin.The results lay foundation for the effective control,rational medication and vaccine preparation for Streptococcus disease on bullfrogs. 展开更多
关键词 Bullfrog Streptococcus agalactiae Pathogen 16S rRNA
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一株梭鲈源无乳链球菌的分离、鉴定及分子分型分析 被引量:5
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作者 赵长臣 江小燕 +5 位作者 刘春花 张德峰 罗霞 曾伟伟 陈总会 黄志斌 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2018年第3期61-67,共7页
为查明梭鲈(Lucioperca lucioperca)凸眼病病原,从患病梭鲈病灶眼、肝、脾和肾分离纯化病原菌,进行了生理生化特性测定及16S rRNA基因序列分析,并开展人工感染试验,测定其血清型及MLST分型,并利用纸片扩散法进行药敏特性分析。结果显示... 为查明梭鲈(Lucioperca lucioperca)凸眼病病原,从患病梭鲈病灶眼、肝、脾和肾分离纯化病原菌,进行了生理生化特性测定及16S rRNA基因序列分析,并开展人工感染试验,测定其血清型及MLST分型,并利用纸片扩散法进行药敏特性分析。结果显示:分离菌株(命名为SL1701株)为本次引发梭鲈病害的致病菌,Ib-ST261型。回归感染实验证实,分离得到的细菌SL1701对健康梭鲈具有非常强的致病性,4.5×105CFU/m L时可使80%受感染梭鲈死亡,并可复制出自然发病鱼的症状。菌株SL1701革兰氏染色为阳性链球菌,γ溶血,生理生化特性与普通无乳链球菌基本一致,16S rRNA基因序列与无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)同源性最高,综合判定分离菌株为无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)。药敏试验结果显示:分离菌株SL1701对氟苯尼考、氟罗沙星等17种抗生素高度敏感,对青霉素、磷霉素等8种抗生素耐药。结果表明,分离菌株SL1701为Ib-ST261型无乳链球菌,养殖时可选用氟苯尼考及氟罗沙星等药物进行防控。 展开更多
关键词 梭鲈(Lucioperca lucioperca) 无乳链球菌(Streptococcus agalactiae) γ溶血 16S RRNA 生理生化 药物敏感性
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阿莫西林纳米粒对奶牛乳房炎主要病原菌的体外PAE 被引量:4
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作者 杨雪峰 欧阳五庆 +1 位作者 孙江才 李向辉 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2009年第6期1-6,共6页
【目的】研究阿莫西林纳米粒(AMX-NP)对奶牛乳房炎主要病原菌金黄色葡萄球菌标准株ATCC25923及其临床分离株、无乳链球菌、大肠杆菌标准株ATCC25922及其临床分离株的体外抗菌后效应(PAE)。【方法】制备AMX-NP,试管二倍稀释法测定其对乳... 【目的】研究阿莫西林纳米粒(AMX-NP)对奶牛乳房炎主要病原菌金黄色葡萄球菌标准株ATCC25923及其临床分离株、无乳链球菌、大肠杆菌标准株ATCC25922及其临床分离株的体外抗菌后效应(PAE)。【方法】制备AMX-NP,试管二倍稀释法测定其对乳房炎主要病原菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。采用细菌显微镜直接计数法,于AMX-NP PAE期的不同时间点分别测定其在0.5×MIC、1×MIC、2×MIC和4×MIC时的体外PAE。【结果】当AMX-NP质量浓度分别为0.5×MIC、1×MIC、2×MIC和4×MIC时,其对乳房炎主要病原菌均产生一定的PAE,PAE值与AMX-NP质量浓度(0.5×MIC^4×MIC)呈剂量依赖性,且该药物对金黄色葡萄球菌和无乳链球菌产生的PAE值均较大肠杆菌长。【结论】临床应用AMX-NP防治奶牛乳房炎时,对于金黄色葡萄球菌性和无乳链球菌性乳房炎,可适当延长给药间隔时间,对于大肠杆菌性乳房炎,宜缩短给药间隔或持续给药。 展开更多
关键词 阿莫西林纳米粒 抗菌后效应 金黄色葡萄球菌 无乳链球菌 大肠杆菌 给药间隔
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PCR-焦磷酸测序技术检测奶牛乳房炎4种主要致病菌方法的建立 被引量:2
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作者 剧慧栋 李月颖 +3 位作者 张乐祎 李秀娟 赵宝华 徐保红 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2012年第6期58-64,共7页
应用PCR-焦磷酸测序技术(pyrosequencing)一种新型快速检测奶牛乳房炎(bovine mastitis)4种主要致病菌无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)、停乳链球菌(S.dysgalactiae)、沙门氏菌(Salmonella sp.)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus a... 应用PCR-焦磷酸测序技术(pyrosequencing)一种新型快速检测奶牛乳房炎(bovine mastitis)4种主要致病菌无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)、停乳链球菌(S.dysgalactiae)、沙门氏菌(Salmonella sp.)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的方法。根据GenBank中无乳链球菌的sip基因、停乳链球菌的isp基因、沙门氏菌的stn基因和金黄色葡萄球菌的clfa基因的序列信息,分别设计各基因保守区段的PCR扩增引物及焦磷酸测序引物。分别以108株无乳链球菌、100株停乳链球菌、136株沙门氏菌、203株金黄色葡萄球菌,以及多株其他参照菌为模板,轮流使用上述各扩增引物进行PCR扩增目的基因片段。随后采用焦磷酸测序技术针对阳性PCR扩增片段进行核苷酸保守区段的测序分析。最终得到预期的PCR扩增和焦磷酸测序结果,且实验结果具有可靠的重复性。PCR-焦磷酸测序技术适用于上述奶牛乳房炎4种主要致病菌的检测鉴定,具有准确、快速等优点。 展开更多
关键词 PCR-焦磷酸测序 奶牛乳房炎 无乳链球菌 停乳链球菌 沙门氏菌 金黄色葡萄球菌
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无乳链球菌感染吉富罗非鱼后体内病原菌的动态分布 被引量:8
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作者 刘溪 敖秋桅 +3 位作者 谭芸 周宇 甘西 朱佳杰 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1715-1719,共5页
【目的】研究吉富罗非鱼感染无乳链球菌后其体内主要器官组织中病原菌的分布及消除规律,为罗非鱼无乳链球菌病的诊断和药物防治提供科学依据。【方法】对吉富罗非鱼进行人工腹腔注射无乳链球菌(HN016菌株),分别在感染后3、6、12、18... 【目的】研究吉富罗非鱼感染无乳链球菌后其体内主要器官组织中病原菌的分布及消除规律,为罗非鱼无乳链球菌病的诊断和药物防治提供科学依据。【方法】对吉富罗非鱼进行人工腹腔注射无乳链球菌(HN016菌株),分别在感染后3、6、12、18、24、48、72、96、120、144、168 h和10、15、20、30 d,随机选取未死亡罗非鱼取样(脑组织、肝脏、前肾和脾脏)划线接种于鸡血培养基上,28℃培养12 h后统计菌落数量。【结果】人工注射感染HN016菌株3 h后,吉富罗非鱼未出现发病症状,但在其脑组织、肝脏、前肾和脾脏均可分离出病原菌;感染18 h后进入发病高峰期,从其肝脏、脾脏分离出的菌落数量明显多于脑组织和前肾,之后各组织的病原菌落数量持续增长并在48~72 h间趋于稳定;感染72 h后各组织分离出的菌落数量逐渐减少;感染10 d后从存活吉富罗非鱼的脑组织已分离不到病原菌,感染20 d后存活鱼体的脑组织、肝脏、前肾和脾脏均未分离出无乳链球菌。【结论】吉富罗非鱼感染无乳链球菌(HN016菌株)的发病死亡高峰期在感染后48~72 h,而无乳链球菌在吉富罗非鱼体内的代谢周期为20 d,因此养殖生产中应注意发病高峰期间的水体消毒及减少饵料投喂。 展开更多
关键词 吉富罗非鱼 无乳链球菌 动态分布 消除规律 平板活菌计数法
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尼罗罗非鱼Xbp1-S基因克隆及表达分析 被引量:2
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作者 王玉红 尹晓雪 +4 位作者 丁明媚 付胜利 陈萌 郭政 叶剑敏 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2018年第1期73-82,共10页
为了了解尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)细胞转录因子Xbp1-S(On Xbp1-S)的基因序列特征及其在无乳链球菌(Streptococcus alactolyticus)应激和在B细胞分化中的作用,应用RACE克隆技术获得的On Xbp1-S基因全长1380 bp,包括开放阅读框... 为了了解尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)细胞转录因子Xbp1-S(On Xbp1-S)的基因序列特征及其在无乳链球菌(Streptococcus alactolyticus)应激和在B细胞分化中的作用,应用RACE克隆技术获得的On Xbp1-S基因全长1380 bp,包括开放阅读框ORF为1155 bp,5?端非编码区(5?UTR)长127 bp,3?端非编码区(3'UTR)长98 bp。On Xbp1-S序列分析推测该基因编码384个氨基酸,分子量为41.32 k Da,理论等电点为4.36。同源性分析显示,On Xbp1-S基因与其他鱼类的聚为一支,其中,与南极鳕(Notothenia coriiceps)相似性最高。荧光定量PCR及Western-blot结果显示,On Xbp1-S在各组织中均有表达,m RNA水平上在肝脏中表达量最高,蛋白水平上在胸腺中表达量最高,而在肌肉中表达量最低。无乳链球菌应激后,On Xbp1-S基因在肝脏和脾脏中的表达趋势相似,均在应激期间出现表达量上调,在192 h出现峰值。另外,免疫组化分析发现,On Xbp1-S因子在不同分化程度B细胞亚类中的表达呈现差异,在成熟B细胞中呈现高表达,而在未成熟B细胞中几乎不表达。研究结果表明,On Xbp1-S参与尼罗罗非鱼对无乳链球菌的免疫防御,和在B细胞分化中起作用。本研究将为进一步研究On Xbp1-S因子应答病原菌侵染的机理及促进B细胞分化机制提供理论依据。 展开更多
关键词 尼罗罗非鱼 Xbp1-S 基因克隆 组织表达 无乳链球菌
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衡阳市女性生殖道无乳链球菌的带菌状况及分子特征 被引量:2
7
作者 柏琴琴 刘芸槾 +3 位作者 王秋平 胡倩 邓仲良 陈丽丽 《中南医学科学杂志》 CAS 2017年第5期459-464,共6页
目的了解衡阳市女性生殖道无乳链球菌的带菌状况及分离株的分子特征。方法收集衡阳市3家教学医院的女性生殖道分泌物棉签拭子样本,对其中的无乳链球菌进行分离、鉴定和药敏分析,并对分离株的耐药基因、血清型、菌毛岛类型进行分析。结... 目的了解衡阳市女性生殖道无乳链球菌的带菌状况及分离株的分子特征。方法收集衡阳市3家教学医院的女性生殖道分泌物棉签拭子样本,对其中的无乳链球菌进行分离、鉴定和药敏分析,并对分离株的耐药基因、血清型、菌毛岛类型进行分析。结果无乳链球菌的检出率为0.88%(3/339)。1株分离株保存失败,另外2株分离株HY66和HY9-2均对四环素和红霉素耐药,并携带ermB和tetO耐药基因。此外,HY9-2对克林霉素、左氧氟沙星、加替沙星耐药,还携带tetM和tetL耐药基因。2株分离株的血清型为Ⅲ型,同时携带PI-1和PI-2a菌毛岛。结论衡阳市女性生殖道无乳链球菌的带菌率低。分离株都对红霉素和四环素耐药,并出现了多重耐药菌株。为防治无乳链球菌的感染,应加强无乳链球菌的流行及耐药情况监测。 展开更多
关键词 无乳链球菌 女性生殖道 耐药 分子特征
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尼罗罗非鱼IgT重链的蛋白表达及表达分析
8
作者 曹琦琦 王玉红 +2 位作者 仲小芳 陈常仪 王安利 《华南师范大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2018年第4期62-67,共6页
IgT(Immunoglobulin T)作为新型免疫球蛋白在粘膜免疫中具有重要作用.文中根据尼罗罗非鱼IgT基因序列构建原核表达载体获得IgT重组蛋白,相对分子量约75 k Da,并制备出效价较高的小鼠抗罗非鱼IgT的多克隆抗体.荧光定量PCR检测证明:健康... IgT(Immunoglobulin T)作为新型免疫球蛋白在粘膜免疫中具有重要作用.文中根据尼罗罗非鱼IgT基因序列构建原核表达载体获得IgT重组蛋白,相对分子量约75 k Da,并制备出效价较高的小鼠抗罗非鱼IgT的多克隆抗体.荧光定量PCR检测证明:健康尼罗罗非鱼中IgT在多种组织中都有表达,其中脾脏、皮肤、肠和鳃中表达量相对较高.无乳链球菌感染后,皮肤和头肾中IgT mRNA的相对表达量分别在12 h和4 d显著上调.免疫组化结果显示:IgT蛋白在头肾和皮肤中均有少量分布,在无乳链球菌刺激后,在皮肤中出现大量分布.以上结果表明:IgT在尼罗罗非鱼皮肤粘膜免疫中具有重要作用. 展开更多
关键词 尼罗罗非鱼 无乳链球菌 IGT 免疫组化 粘膜免疫
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Analysis of Pyelonephritis-Associated Beta Hemolytic Streptococcus in Japan 被引量:1
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作者 Masaaki Minami Hideki Nishiyama +3 位作者 Shinoba Ikegami Takuya Hattori Makoto Kawashima Michio Ohta 《Journal of Biosciences and Medicines》 2018年第12期45-52,共8页
Pyelonephritis is an inflammation of the kidney tissue, calyces, and renal pelvis. It is commonly caused by bacterial infection that has spread up the urinary tract. Common bacteria are Escherichia coli and Enterococc... Pyelonephritis is an inflammation of the kidney tissue, calyces, and renal pelvis. It is commonly caused by bacterial infection that has spread up the urinary tract. Common bacteria are Escherichia coli and Enterococcus faecalis. Beta hemolytic streptococci also cause pyelonephritis. Beta hemolytic streptococcus such as Streptococcus agalactiae, and S. dysgalactiae subsp. equisimilis, when grown on blood-agar, produce complete hemolysis around each colony, usually cause severe infections including many cases of cellulitis, pneumonia, meningitis and sepsis. However the analysis of pyelonephritis causing beta hemolytic streptococcus has seldom been investigated. In this study, we tried to clarify the relationship between beta hemolytic streptococcus and pyelonephritis patient in Japan. We investigated beta hemolytic streptococcus isolated from pyelonephritis patient at two tertiary care hospitals in the central region of Japan by analyzing the background and antimicrobial susceptibility of beta hemolytic streptococcus. We recovered total sixteen beta hemolytic streptococcus in nine years. In pyelonephritis patients, beta hemolytic streptococcus was isolated from 9 S. agalactiae and 7 S. dysgalactiae subsp. equisimilis, respectively. The numbers of streptococci from female patients were more than those from male patients. Bacteria were not isolated from under 30 year patients. All S. dysgalactiae subsp. equisimilis were isolated from 60-year-age patients. About one fifth of beta hemolytic streptococcus had erythromycin and minocycline-resistant ability. Four beta hemolytic streptococci that were all S. agalactiae, had levofloxacin-resistant ability. Only one S. agalactiae had trimethoprim-sulfamethoxazole-resistant ability. Ampicillin was effective against all beta hemolytic streptococci. In our results, beta hemolytic streptococcus caused pyelonephritis in aged people and the quarter of these bacteria had some antibiotics resistance. 展开更多
关键词 Beta HEMOLYTIC STREPTOCOCCUS PYELONEPHRITIS S. AGALACTIAE S. dysgalactiae subsp. equisimilis ANTIMICROBIAL Susceptibility
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PCR Detection of Streptococcus agalactiae in Dairy Cows Suffering from Mastitis
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作者 Yanying ZHANG Guisheng GAO +5 位作者 Zhengben LI Guangping GAO Qiumei SHI Xinhua SHAO Yinju LIANG Huiran LIU 《Agricultural Biotechnology》 CAS 2013年第5期22-24,共3页
[ Objective ] This study aimed to identify Streptococcus agalactiae and lay the foundation for the prevention and control of mastiffs in dairy cows. [ Method] Ten strains were isolated from milk samples produced by di... [ Objective ] This study aimed to identify Streptococcus agalactiae and lay the foundation for the prevention and control of mastiffs in dairy cows. [ Method] Ten strains were isolated from milk samples produced by diseased dairy cows suffering from mastitis for morphologic observation, culture characteristic investigation, biochemical identification and Lancefield grouping. The isolated strains were identified at the molecular level by nested-PCR. [ Result] Among the ten isolates, six strains were 13-hemolytic and Gram-positive on blood agar, belonging to Lancefield group B, which were identified as Streptococcus agalactiae by biochemical identification and nested-PCR. After overnight incubation, the coincidence rate between results of nested-PCR detection and biochemical identification reached 100%. [ Conclusion ] Bacterial incubation, rapid DNA extraction and specific PCR can provide basis for early epidemiological survey of Streptococcus agalactiae infection in cattle. 展开更多
关键词 MASTITIS Streptococcus agalactiae PCR 16S rRNA
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iTRAQ技术分析无乳链球菌牛源株与人源株差异表达蛋白 被引量:5
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作者 郭长明 袁橙 +6 位作者 朱善元 王安平 吴双 王永娟 左伟勇 洪伟鸣 秦枫 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期1119-1125,共7页
为了分析无乳链球菌牛源株ATCC13813与人源株A909差异蛋白质组,提取ATCC13813与A909全菌蛋白,iTRAQ技术标记后,进行液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)鉴定和定量,质谱数据通过Mascot2.2和Proteome discoverer 1.4软件分析,并对差异... 为了分析无乳链球菌牛源株ATCC13813与人源株A909差异蛋白质组,提取ATCC13813与A909全菌蛋白,iTRAQ技术标记后,进行液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)鉴定和定量,质谱数据通过Mascot2.2和Proteome discoverer 1.4软件分析,并对差异蛋白进行GO功能注释和KEGG pathway通路分析。结果显示,共鉴定出差异表达蛋白350个(P〈0.05),与ATCC13813相比,在A909中上调表达蛋白174个(比值〉1.5),下调表达蛋白176个(比值〈0.667)。生物信息学分析预测这些蛋白主要涵盖28个生物学功能,14个通路。本研究为阐明不同宿主来源株无乳链球菌致病性差畀奠定基础。 展开更多
关键词 无乳链球菌 牛源株 人源株 ITRAQ 差异蛋白质组
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三种鱼类链球菌三重实时荧光PCR方法的建立 被引量:1
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作者 李丹丹 徐义刚 +3 位作者 邱索平 王昱 高会江 高慎阳 《食品工业》 CAS 北大核心 2016年第9期268-272,共5页
对3种链球菌基因序列的分析,设计了3条Taq Man探针,并选择3种无相互干扰的荧光基团进行标记。建立了三重实时荧光PCR的检测方法,同时对建立的方法进行了特异性、灵敏度、稳定性和重复性评价,并且与传统培养法进行了比较。结果显示,试验... 对3种链球菌基因序列的分析,设计了3条Taq Man探针,并选择3种无相互干扰的荧光基团进行标记。建立了三重实时荧光PCR的检测方法,同时对建立的方法进行了特异性、灵敏度、稳定性和重复性评价,并且与传统培养法进行了比较。结果显示,试验建立的方法能特异扩增出3种链球菌的标准阳性菌株;3种链球菌之间没有交叉反应;S.agalactiae的检测灵敏度约为1.52×10^1 CFU/mL;S.dysgalactiae的检测灵敏度约为1.33×10^2 CFU/mL;S.milleri的检测灵敏度约为1.76×10^1 CFU/mL;3种链球菌检测反应的CV值均小于5%;对采集的287份样品进行检测,共计检出5份S.agalactiae阳性样品、3份S.dysgalactiae阳性样品和1份S.milleri阳性样品与传统细菌分离鉴定的方法检测结果一致。该检测方法灵敏度高、特异性强,具有良好的实用性。 展开更多
关键词 s.agalactiae s.dysgalactiae S.milleri TAQ Man探针 三重实时荧光PCR
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嗜酸乳杆菌与大肠埃希菌及无乳链球菌和金黄色葡萄球菌交互作用 被引量:5
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作者 李桂军 周建娟 蔡文伟 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第17期4087-4089,共3页
目的对嗜酸乳杆菌与大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌及无乳链球菌间交互作用及pH、乳酸、乙酸、H2O2对其生长影响进行评价,为需氧菌性阴道炎患者经乳杆菌属短期治疗疗效不佳原因提供依据。方法嗜酸乳杆菌与大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、无... 目的对嗜酸乳杆菌与大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌及无乳链球菌间交互作用及pH、乳酸、乙酸、H2O2对其生长影响进行评价,为需氧菌性阴道炎患者经乳杆菌属短期治疗疗效不佳原因提供依据。方法嗜酸乳杆菌与大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、无乳链球菌混合培养;4种细菌经不同pH值培养基培养、不同浓度乳酸、乙酸、H2O2作用,检测其浓度变化。结果嗜酸乳杆菌与3种菌之间存在交互作用;嗜酸乳杆菌抑菌作用时间、浓度依赖性;pH 3. 5-5.0时,嗜酸乳杆菌增殖最快,抑菌作用最强;乙酸、H2O2对4种细菌均具强抑制作用;乳酸对嗜酸乳杆菌无抑制作用,对其他3种细菌均有浓度依赖性抑制作用。结论嗜酸乳杆菌主要是通过代谢产物乳酸等而不是h2o2直接产生抑菌或杀菌作用;需氧菌性阴道炎患者经乳杆菌短期治疗疗效不佳主要与阴道内乳杆菌定植数量不足、产酸能力低及阴道内存在耐酸的病原菌有关。 展开更多
关键词 需氧菌性阴道炎 大肠埃希菌 嗜酸乳杆菌 无乳链球菌 金黄色葡萄球菌
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