鼠伤寒沙门氏菌S.Typhimurium感染C57BL/6小鼠肠道模型的建立及表型分析

目的建立鼠伤寒沙门氏菌S.Typhimurium感染C57BL/6小鼠肠道模型。方法先用5%NaHCO_3溶液灌胃,中和部分胃酸,提高鼠伤寒沙门氏菌S.Typhimurium的感染能力,随后进行鼠伤寒沙门氏菌S.Typhimurium灌胃攻毒。观察小鼠的临床症状,对小鼠的生存情况及体重进行统计学分析,并通过组织病理切片分析小鼠肠道组织病理变化等。结果鼠伤寒沙门氏菌S.Typhimurium攻毒后C57BL/6小鼠出现体重下降、萎靡不振、寒颤及死亡等表型,解剖学水平显示小鼠肠道充血膨胀。病理分析结果显示小鼠小肠绒毛间质水肿、肠粘膜层坏死及炎性细胞浸润等。结论成功建立鼠伤寒沙门氏菌S.Typhimurium感染C57BL/6小鼠肠道模型,该模型在研究相关免疫分子或细胞因子在S.Typhimurium引发肠炎过程中的生物学功能及治疗等方面具有重要的科学意义。

清营汤联合恩诺沙星干预S.Typhimurium复发性感染的C57BL/6小鼠模型研究

目的评价清营汤联合恩诺沙星对鼠伤寒沙门氏菌复发性感染的干预作用。方法通过建立鼠伤寒沙门氏菌C57BL/6小鼠感染模型,并采用清营汤联合恩诺沙星干预7d,停药后观测小鼠生存率、肠系膜淋巴结(MLN)载菌量、粪便排菌量等指标。结果清营汤联合恩诺沙星组小鼠生存率高于恩诺沙星组(P<0.05);停药后,清营汤联合恩诺沙星组小鼠MLN组织再次带菌时间晚于恩诺沙星组(P<0.05),带菌百分比低于恩诺沙星组(P<0.05),粪便再次排菌时间晚于恩诺沙星组(P<0.05),粪便排菌百分比低于恩诺沙星组(P<0.05)。结论清营汤联合恩诺沙星对鼠伤寒沙门氏菌复发性感染具有较好的干预作用,可提高细菌对抗生素的敏感性,增强抗生素的杀菌作用,以期缩短抗生素疗程。

鼠伤寒沙门菌外膜蛋白与耐药性关系的分析

目的分析鼠伤寒沙门菌外膜蛋白(OMP)与耐药性的关系。方法用消除剂丫啶橙消除耐药性,盲传测其遗传稳定性,采用超声波物理裂解法制备鼠伤寒沙门菌外膜蛋白标本,用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDA-PAGE)检测外膜蛋白,用紫外分光光度计测其吸光值,计算浓度。结果抗性消除表型能稳定遗传,耐药鼠伤寒沙门菌与敏感鼠伤寒沙门菌都含有6条主要的外膜蛋白条带,两者相比,发现耐药菌的外膜蛋白在约57、53、30 kDa处减弱或缺失,总的蛋白浓度也低于后者。结论鼠伤寒沙门菌耐药性与外膜蛋白的减弱或缺失有关。

食品中铝残留量干法消化铬天青S分光光度法测定方法探讨

目的:探讨食品中铝残留量检测方法;方法:采用干法消化样品,用铬天青S分光光度法测定食品中铝残留量;结果:铝在10.0μg/mL以内,其线性关系良好,回归方程Y=0.0917X+0.017,r=0.99936,平均回收率为97.55%,RSD1.79%;结论:本方法用于实际样品的测定,结果较为满意。

低聚糖的非发酵组分的微生物鉴定分析

试验采用埃希氏大肠杆菌 (E coli)和鼠伤寒沙门氏菌 (S typhimurium ) ,接种于含 0 5 %单糖和低聚糖的糖发酵培养基内 ,置于 36℃培养箱内发酵 6h ,转入 2 5℃室温下继续发酵 ,分别用 0 0 4 5 5mol/LNaOH溶液滴定产酸量 ,用倒置产气管测量产气量作为参比试验 ,计算产酸量和产气量的相对比值 ,估算非发酵糖的相对含量。试验结果表明 :几种低聚糖用埃希氏大肠杆菌和鼠伤寒沙门氏菌测得的非发酵糖含量分别为 :低聚果糖 (FOS) 5 2 %～ 5 4 % ;低聚异麦芽糖 (IMO - 5 0 0 ) 86 %～ 89% ;低聚异麦芽糖 (IMO - 90 0 ) 92 %～ 94 % ;甘露糖蛋白 (MOS -Pr) 92 %～ 93%。

细粒棘球蚴重组St-Eg 95-Eg.ferritin疫苗构建及生物学特性检测

构建表达细粒棘球蚴Eg95-Eg.ferritin融合蛋白的重组口服减毒鼠伤寒沙门菌活载体疫苗株并评价其生物学特性。将细粒棘球蚴Eg95-Eg.ferritin融合基因插入到表达载体pYA3341中,构建重组质粒pYA3341-Eg95-Eg.ferritin,将重组质粒分别电转入减毒鼠伤寒沙门菌X3770和X4550,获得重组疫苗菌株St-Eg95-Eg.ferritin,对重组菌的稳定性、生长状态及安全性进行分析。结果表明,经PCR和酶切鉴定成功构建重组质粒pYA3341-Eg95-Eg.ferritin,Western blot检测Eg95-Eg.ferritin蛋白在重组菌中获得表达;生物学特性研究结果表明,重组质粒可稳定存在,且不影响重组菌的生长状态,小鼠口服试验证实,重组菌安全无毒性。成功构建能稳定表达细粒棘球蚴Eg95-Eg.ferritin融合蛋白的口服减毒鼠伤寒沙门菌活载体疫苗株,将为研究包虫病口服基因工程疫苗奠定基础。

快速测铝试剂盒的研制

对目视比色法快速测定水中微量Al3+进行了研究,并在此基础上研制出了适用于现场快速检测微量Al3+的试剂盒。对不同实验条件进行了优化。实验结果表明,Al3+、铬天青S(CAS)和十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)在pH=5.5的缓冲体系中形成稳定的蓝色三元配合物,其颜色深浅与Al3+含量呈正比,目视极易区分。所研制的试剂盒使用方便,只需加入两种试剂,在室温下显色20min后,通过与标准色阶对照即可得出水中Al3+的含量。方法测定范围是0.01～0.50mg·mL-1,测定结果与国标法及电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP-AES)对照无显著性差异,回收率在87.5%～116.7%之间。

减毒沙门氏菌递呈的TGEVS／N融合基因疫苗的口服免疫原性

目的研究携带猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S/N融合基因的重组减毒沙门氏菌的口服免疫原性。方法将真核质粒pVAX-S/N电转化鼠伤寒减毒沙门氏菌SL7207,筛选获得疫苗菌株SL7207(pVAX-S/N)。将菌株SL7207(pVAX-S/N)及对照组SL7207(pVAX-S)以1×109 CFU/只灌胃免疫小鼠,测定免疫小鼠诱导的抗TGEV(和抗沙门氏菌均SL7207)的血清IgG及肠道粘膜IgA抗体动态水平,同时测定42d免疫小鼠的干扰素水平。结果菌株SL7207(pVAX-S/N)构建成功,首免后2～6周可诱导产生抗TGEV(和抗沙门氏菌SL7207)的血清IgG,第4～6周可诱导产生抗TGEV(和抗沙门氏菌均SL7207)的肠道粘膜IgA,SL7207(pVAX-S/N)诱导的IgG和IgA抗体最高滴度均略高于SL7207(pVAX-S),但差异不明显(P>0.05)。SL7207(pVAX-S/N)免疫42d小鼠诱导的干扰素浓度为659.45pg/mL,低于SL7207(pVAXD-S)组。结论 S/N融合基因疫苗SL7207(pVAX-S/N)具有良好的口服免疫原性,但与SL7207(pVAX-S)无明显差异。

减毒沙门氏菌投递的TGEVS基因疫苗口服免疫猪的动态规律

目的研究TGEV S基因疫苗SL7207(PVAXD-TS)口服免疫仔猪后的动态免疫诱导规律。方法将口服疫苗SL7207(PVAXD-TS)、空载体菌株SL7207(PVAXD)以1.6×1011 CFU/头的剂量口服接种20日龄仔猪,以PBS为空白对照,2周后以2.0×1011 CFU的剂量加强免疫。分别测定0、2、4、6和8周的血清IgG、IgA、TGEV中和抗体、细胞免疫反应IL-4、IFN-γ、外周血淋巴细胞增殖情况。结果仔猪口服免疫后第4周即可检测抗TGEV的特异性IgG和粪黏液IgA抗体;在免疫后第6周IgA、IgG、IL-4、IFN-γ抗体和外周血T淋巴细胞增殖与SL7207(PVAXD)、PBS间均存在统计学差异(P<0.01),并在第6周达到最高值;中和实验显示该疫苗诱导的血清IgG具有中和活性。结论证实以减毒沙门菌为载体的TGEV S基因疫苗口服免疫仔猪有较好的免疫原性。

应用糖基化碳量子点研究甘露糖与致病菌之间的相互作用

以柠檬酸为碳源,通过水热法制备得到荧光碳量子点(CQDs),基于其表面的—COOH,将4-氨基苯基-α-D-吡喃甘露糖苷以共价键的方式固定在CQDs表面,得到甘露糖基化碳量子点(Man-CQDs),并通过荧光竞争法,结合Scatchard方程计算了Man-CQDs与大肠杆菌JM109、大肠杆菌DH5a和沙门氏菌S.123443的结合常数Ka。实验得到CQDs的粒径为26 nm,最大发射波长为445 nm,荧光产率相较于54%硫酸奎宁为76%,Man-CQDs荧光强度与CQDs相比基本保持不变,通过苯酚-硫酸法计算得到Man-CQDs浓度为2.832 mmol/L,Man-CQDs纳米颗粒中甘露糖含量约为40%。根据Man-CQDs、D-Mannose与致病菌竞争结合实验,结合Scatchard模型方程,计算得到Man-CQDs与大肠杆菌JM109的结合常数Ka=2.39×103L/mol,Man-CQDs与沙门氏菌S.123443的结合常数Ka=1.17×105L/mol,Man-CQDs与大肠杆菌DH5a无有效结合。研究结果显示,该方法可用于甘露糖与致病菌非共价结合的结合常数测定,为研究糖与致病菌相互作用提供了参考。

鼠伤寒沙门菌rmlD缺失株的构建及生物学特性分析

为了研究rml D缺失对鼠伤寒沙门氏菌(S.typhimurium)生物学特性及毒力的影响,利用自杀质粒介导的同源重组技术,构建了rml D缺失株S100Δrml D,并对其生物特性进行了鉴定。结果显示,rml D的缺失不影响鼠伤寒沙门氏菌的生长特性及对多黏菌素B、胆酸盐的敏感性,但黏附和入侵人肠黏膜细胞INT407能力显著增加。同时,rml D缺失株毒力比野生株降低了约2000倍。以上结果表明,rml D的缺失不影响鼠伤寒沙门氏菌的体外生长及对宿主抗菌活性物质的敏感性,但能显著降低菌株毒力。因此,rml D的缺失可以作为一条有效的减毒途径。

S-CIELAB及颜色分级应用

根据人眼视觉特性 ,给出了Spatial CIELAB系统分析方法 .该方法首先利用由人类视觉空间响应特性确定的卷积核进行空间滤波 ,然后进行CIELAB处理 .实验结果表明 。

紫外分光光度法测定阿奇霉素干混悬剂的含量

目的建立紫外分光光度法测定阿奇霉素干混悬剂的含量。方法依据阿奇霉素与硫酸溶液(75→100)在pH值6.0的磷酸盐缓冲液中反应生成的络合物的光谱特征,选择482nm作为测定波长。结果阿奇霉素浓度在16～96μg/ml之间与吸收度呈良好线性关系(r=0.9997),平均回收率为99.3%(n=5),RSD为0.7%。结论本方法快速、简便,结果准确。

医院内鼠伤寒沙门菌病暴发流行菌株的研究

苏州市儿童医院1989年发生一起鼠伤寒沙门菌病暴发流行。流行菌株为多重耐药菌,耐药种类达11～13种。质粒检测结果表明流行菌株均含四个质粒,最大质粒为122.6或103.3kb,其余三个为93.5、13.9和4.1kb。103.3kb质粒编码庆大霉素、卡那霉素和妥布霉素的耐药性。122.6kb质粒除编码上述三种药物的耐药性外,还编码对氯霉素、四环素及复方新诺明的耐药性。根据药敏试验、质粒检测和限制性内切酶分析,证实此次暴发流行是由两株不同的鼠伤寒沙门菌引起的。

比色法定量分析涤棉织物混纺比的效果研究

探讨比色法用于定量测定涤棉织物混纺比的可行性。通过对经梳棉机梳理获得的不同混和比例的涤棉纤维网进行染色,采用电脑测色技术进行比色,分析了K/S值与纤维混和比的关系。试验结果表明:涤棉纤维网染色前后的K/S积分值变化量与棉含量之间存在良好的线性关系,相关系数达0.98以上。认为比色法定量测定涤棉织物混纺比具有较好的准确性,通过进一步优化后可以用于涤棉织物混纺比的定量测量。利用电脑比色技术的比色法可用于织物的无损伤定量分析。

纳氏试剂光度法测定水中氨氮的质量控制

纳氏试剂光度法是测定水中氨氮的国家标准法,该法具有操作简单、灵敏的优点。但在实际工作中有许多因素影响纳氏试剂光度法对水中氨氮的测定结果,根据多年的实际工作经验,文章从实验室环境、反应条件、水体中的主要干扰物到数据处理与结果报出等可能影响氨氮测定结果的有关因素及注意事项进行了研究和探讨,并提出了相应的解决方法,只要切实做好监测过程中的每一个环节,严格按照质控程序进行,就能保证纳氏试剂光度法测定水中氨氮分析结果的准确性。

表达大肠杆菌LT-B/ST融合抗原的减毒鼠伤寒沙门氏菌株的构建

编码LT-B/ST融合抗原的基因插入pYA248载体中,构建了重组质粒pXZL66。该重组质粒转入无毒鼠伤寒沙门氏菌SR-11,ΔCya,Δcrp,Δasd菌株X4072。此无抗药性的杂合菌株X4072(pXZL66)表达的LT-B/ST融合抗原具有LT和ST抗原性而没有生物毒性,可望成为预防ETEC腹泻和相应的沙门氏菌病双价口服活疫苗候选株。

食品中蛋白质含量测定方法的探讨

目的:建立一种纳氏比色法测定食品中蛋白含量的检测方法。方法:样品经前处理后,在420nm波长处用纳氏比色法进行蛋白质含量测定。结果:本方法在氮含量为0.1～2.0mg/L范围内线性良好。样品蛋白质含量在2.80%～66.3%之间的相对标准偏差为0.96%～3.13%。该法与凯氏定氮法对不同样品进行蛋白质含量检测,无显著统计学差异。结论:该方法操作简便、快速、准确。

河南省临床鼠伤寒沙门氏菌的耐药性分析

目的调查分析河南省147株临床鼠伤寒沙门氏菌的耐药性。方法通过微量肉汤稀释法测定最小抑菌浓度,药物敏感性结果根据临床实验室标准协会来确定。结果 147株临床鼠伤寒沙门氏菌对传统药物产生较高的耐药性。对氨苄西林、四环素、磺胺异恶唑的耐药率较高均为89. 80%,此外对5种一线治疗药物中的至少一种表现出较高的耐药性,即环丙沙星(29. 25%),头孢噻呋(17. 00%),头孢曲松(16. 33%),阿奇霉素(10. 20%)和头孢西丁(6. 12%)。147株中91. 15%为多重耐药菌株,4. 08%的菌株对所有抗生素耐药。结论河南省临床分离的鼠伤寒沙门氏菌的多重耐药性比较严重,因此持续监测抗生素耐药性的变化是非常有必要的。

108例鼠伤寒沙门氏菌医院内感染临床分析

1988年8月至1991年6月在我院婴儿室及儿科病房发生和收治鼠伤寒沙门氏菌病153例,其中108例占64.1％为医院内感染。发病率龄以12个月以内婴幼儿为主占85.6％。连续两年于8月份在婴儿室呈爆发流行共48例占44.4％。本病全年均可发病,以8～10月为发病高峰。医院内感染的主要传染源为院外感染的散发病例收住院的患者及陪住家属的带菌者。消毒隔离制度不严格是引起传播的重要因素。该病原菌耐药性强,尤其院内感染菌株。院内感染延长住院时间,增加病人痛苦及经济负担,因此医院内感染必须引起重视,急待控制。