癌组织中S100A2基因的表达及其临床病理学意义

目的检测胃癌组织中S100A2基因的mRNA和蛋白表达水平,分析S100A2基因在胃癌发生、发展过程中的作用机制。方法应用免疫组化、Western Blotting技术、RT-PCR技术检测胃癌组织中S100A2mRNA、蛋白表达水平的改变。结果 S100A2蛋白定位于胃黏膜上皮细胞的胞浆及胞核,胃癌组织中S100A2mRNA、蛋白表达下调,低分化胃癌与淋巴结转移胃癌S100A2表达降低最明显。结论胃癌组织S100A2蛋白、mRNA表达降低,且其表达与胃癌分化程度和淋巴结转移相关。

胃癌组织中E-cadherin、S100A2基因启动子区甲基化的临床意义

目的探讨胃癌组织中E-cadherin、S100A2基因启动子区甲基化的临床意义。方法采用甲基化特异性PCR方法,检测64例胃癌患者(胃癌组)病变组织及15例胃溃疡患者(对照组)正常胃组织中的E-cadherin、S100A2基因启动子区甲基化,分析二者与胃癌生物学特征的关系。结果胃癌组E-cadherin基因启动子区甲基化38例(59.38%),S100A2基因启动子区甲基化36例(56.25%);对照组分别为2、2例(13.3%、13.3%)。在胃癌不同大体分型、分化程度及淋巴结转移患者中,E-cadherin、S100A2基因启动子区甲基化率均有统计学差异(P<0.05或<0.01)。结论胃癌组织中的E-cadherin、S100A2基因启动子区呈高甲基化状态,甲基化状态与胃癌的分化、转移、侵袭有关。

胃癌组织中S100A2基因的突变及杂合性缺失研究

目的检测胃癌组织中S100A2基因的突变及杂合性缺失,从DNA水平探讨S100A2基因在胃癌发生发展过程中的作用。方法采用PCR-SSCP和微卫星结合PCR-变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,分析胃癌组织中S100A2基因的突变及缺失情况。结果 40例胃癌标本中,未发现S100A2基因缺失,亦未检测到S100A2基因第二外显子和第三外显子的突变。结论 S100A2基因在胃癌中的表达下调可能不是由S100A2基因杂合性缺失与突变所致。

S100A2基因在结直肠癌组织中的表达、突变及杂合性缺失

目的:探讨S100A2基因在结直肠癌发生及演进过程中的作用.方法:对66例结直肠癌组织标本进行DNA、mRNA及蛋白提取.采用PCR-SSCP和微卫星结合PCR-变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术检测S100A2基因DNA突变及缺失;分别以RT-PCR技术、Western blot检测S100A2 mRNA及蛋白表达水平.结果:66例结直肠癌组织标本中,未发现S100A2基因存在杂合性缺失(LOH)及第二外显子和第三外显子突变;S100A2 mRNA及蛋白表达水平在结直肠癌中明显低于正常结直肠组织(0.499±0.307vs1.187±0.264;0.542±0.193vs1.301±0.233,均P<0.05).结论:S100A2蛋白表达下调可能与结直肠癌的发生发展有关.S100A2基因在结直肠癌中表达下调可能不是杂合性缺失或突变所致.

S100 A2基因cDNA克隆及其在肝癌细胞中的表达

目的 克隆S10 0A2cDNA、构建S10 0A2重组表达载体并在肝癌细胞QGY770 1中进行表达 .方法 应用RT-PCR和DNA重组技术构建绿色荧光蛋白 (EGFP) -S10 0A2融合蛋白表达载体 ,经脂质体导入QGY770 1细胞中进行表达 .应用荧光显微镜直接观察EGFP -S10 0A2融合蛋白的表达情况 ,G4 18筛选阳性细胞克隆 .结果 构建了带有EGFP的S10 0A2重组表达载体命名为EGFP -C2 -A2 ,并在肝癌细胞QGY770 1中获得了表达 .荧光显微镜下可见EGFP-S10 0A2融合蛋白定位于胞浆及胞核 ,而pEGFP载体对照之EGFP只定位在胞浆中 .结论 EGFP -S10 0A2融合蛋白能够在肝癌细胞QGY770 1中获得表达 ,各自在细胞中的定位互不受影响 ,推断此融合蛋白具有各自的生物学活性 .