外周血CTC、PD-L1及S100A6BP水平对胃癌患者诊断及预后价值

目的 探讨外周血循环肿瘤细胞(CTC)、程序性死亡因子配体-1(PD-L1)、及钙周期素结合蛋白(S100A6BP)水平对胃癌患者诊断及预后价值研究。方法 选取2020年5月至2022年5月南阳市第一人民医院收治的182例胃癌患者为观察组,根据预后情况分为预后良好组(124例)及预后不良组(58例),选取同期90名健康志愿者作为对照组。比较所有受试者外周血CTC、PD-L1、S100A6BP水平,评估CTC、PD-L1、S100A6BP单独及联合检测在胃癌患者诊断及预后中的应用价值。结果 观察组外周血CTC、PD-L1及S100A6BP水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);CTC、PD-L1及S100A6BP三者联合检测对胃癌患者诊断灵敏度、特异度均较单一检测高(P<0.05);预后良好者肿瘤直径、CTC、PD-L1、S100A6BP、TNM(Ⅲ~Ⅳ)、中高分化、淋巴结转移、浸润深度(T3-T4)均较预后不良组低,差异有统计学意义(P<0.05),TNM(Ⅰ~Ⅱ)、低度分化、浸润深度(T1-T2)水平较预后不良组高,差异有统计学意义(P<0.05);多因素Logistic回归分析显示,肿瘤直径、TNM分期、分化程度、浸润深度、淋巴结转移、CTC、PD-L1、S100A6BP是影响胃癌预后不良的独立危险因素(P<0.05);ROC曲线分析显示,CTC、PD-L1、S100A6BP单一及联合检测预测胃癌患者预后AUC分别为0.808、0.845、0.874、0.955(P<0.05)。结论 CTC、PD-L1、S100A6BP在胃癌患者外周血中呈高表达,与患者病理特征及预后有密切关系,三者联合检测对胃癌患者诊断及预后具有较高的预测价值。

miR-361-3p通过靶向S100A6抑制甲状腺癌细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的机制

目的探讨miR-361-3p通过靶向S100A6抑制甲状腺癌细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的机制。方法运用逆转录定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测甲状腺癌组织、细胞中miR-361-3p表达水平;脂质体法将miR-con组(转染miRcon)、miR-361-3p组(转染miR-361-3p)、si-con组(转染si-con)、si-L型氨基酸转运蛋白(S100A6)组(转染si-S100A6)、miR-361-3p+pcDNA组(共转染miR-361-3p和pcDNA)、miR-361-3p+pcDNA-S100A6组(共转染miR-361-3p和pcDNA-S100A6)转染至CAL-62细胞。细胞计数试剂盒(CCK)8、5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EDU)法检测细胞增殖情况;划痕实验、Transwell小室实验检测细胞迁移侵袭能力;Western印迹检测S100A6蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验检测细胞荧光活性。结果与癌旁组织、Nthy-ori 3-1相比,癌组织、癌细胞(TPC-1、SW579、CAL-62)中miR-361-3p表达均显著降低(P<0.05)。过表达miR-361-3p后,细胞增殖显著降低,EDU阳性率显著降低,划痕抑制率显著升高,迁移侵袭能力显著降低(P<0.05)。miR-361-3p显著抑制野生型S100A6细胞的荧光活性,并负向调控S100A6蛋白,二者在癌组织中表达呈显著负相关(r=-0.627,P<0.05)。敲减S100A6具有与过表达miR-361-3p相似的作用,过表达S100A6部分逆转miR-361-3p增殖、迁移侵袭抑制作用。结论miR-361-3p可抑制甲状腺癌细胞的增殖、迁移侵袭,产生这种作用的机制与靶向S100A6有关。

不同病理类型肺癌组织中S100A6的表达情况及其临床意义

探究不同病理类型肺癌组织中S100A6的表达情况及其临床意义。方法 选取2022年12月~2023年12月我院就诊的40例肺癌患者,使用免疫组化检测S100A6表达情况。结果 不同病理类型、临床分期、分化程度的肺癌患者SA100A6表达阳性率存在差异(P<0.05);不同性别、年龄、肿瘤直径、临床疗效和有无吸烟史、淋巴结转移的肺癌患者S100A6表达阳性率未见差异(P>0.05);不同临床分期腺癌、鳞癌患者S100A6表达阳性率存在差异(P<0.05);不同临床疗效、肿瘤直径、分化程度、年龄、性别及有无淋巴结转移、吸烟史的腺癌、鳞癌患者S100A6表达阳性率未见差异(P>0.05)。结论 在腺癌、鳞癌组织检测中,S100A6表达阳性率上升,且在不同病理类型、分化程度、临床分期患者中也存在差异。

甲状腺癌中S100A6蛋白的表达意义

目的:探讨S100A6蛋白在甲状腺癌组织中的表达及临床意义,为临床评估病情提供有利依据。方法:选取本院2016年8月至2021年8月收治的120例甲状腺癌患者作为研究组,选取同期120例甲状腺良性结节患者作为对照组,取石蜡切片行免疫组织化学染色,检测S100A6蛋白的表达水平。结果:甲状腺良性结节与乳头状癌、髓样癌以及滤泡状癌在S100A6蛋白表达阳性率分别为12.50%、81.25%、30.00%和13.46%。由表2可见,通过两两比较发现,甲状腺良性结节与乳头状癌中,其阳性率经统计学分析有统计学意义(P<0.05);甲状腺良性结节与髓样癌的阳性率比较,经统计学分析有统计学意义(P<0.05);甲状腺良性结节与滤泡状癌阳性率比较,经统计学分析无统计学意义(P>0.05)。而甲状腺乳头状癌、髓样癌与滤泡状癌的阳性率比较,经统计学分析,有统计学意义(P<0.05)。结论:S100A6蛋白在甲状腺乳头状癌组织中高表达,可将其作为生物学的重要指标,同时S100A6蛋白也可作为甲状腺癌是否发生转移的预测指标。

S100A6通过PI3K/Akt信号通路促进人骨肉瘤细胞143B增殖和迁移

目的：研究PI3K/Akt信号通路在S100A6介导的人骨肉瘤细胞143B的增殖和迁移中的作用.方法：首先制备重组的人S100A6蛋白（recombinant human S100A6,rhS100A6）;rhS100A6与PI3K抑制剂（LY294002和wortmannin）单独或同时处理143B细胞,其中rhS100A6的终浓度为30 mg/L,LY294002和wortmannin的终浓度分别为10 μmol/L和0.5 μmol/L;采用Western blotting分析143B细胞中PI3K/Akt信号通路相关分子总Akt（total Akt,t-Akt）及磷酸化Akt（phosphorylation of Akt,p-Akt）蛋白的表达变化,MTT检测细胞增殖,Transwell检测细胞迁移.结果：（1）成功制备rhS100A6蛋白,rhS100A6显著增强143B细胞的增殖和迁移能力（P〈0.05）;（2）rhS100A6上调143B细胞中Akt的磷酸化;（3）与rhS100A6组相比,rhS100A6与LY294002或wortmannin联合处理组143B细胞的p-Akt减少（P〈0.05）,细胞的增殖和迁移能力降低,在不同时点细胞的增殖率下降10.3%～69.7%,细胞迁移率下降37.9%～41.6%,差异均有统计学意义（P〈0.05）.结论：S100A6促进人骨肉瘤细胞143B增殖和迁移的作用至少部分是通过激活PI3K/Akt信号通路实现的.

S100A6基因沉默对人食管癌Eca109细胞增殖活性和迁移能力的影响

目的观察S100A6基因沉默对人食管癌Eca109细胞增殖活性及迁移能力的影响。方法查找人S100A6mRNA序列,设计针对其编码区的siRNA序列;根据siRNA序列设计合成shRNA并构建shRNA重组表达载体;用阳离子脂质体转染重组质粒至Eca109细胞,于转染后48h,采用real-time PCR法检测细胞中S100A6mRNA表达量,蛋白质印迹法检测细胞中S100A6蛋白表达量;MTT法检测细胞增殖活性,绘制细胞生长曲线;通过细胞划线法检测基因沉默对于肿瘤细胞迁移能力的影响。结果成功构建了针对S100A6基因的shRNA真核表达载体;通过脂质体转染的方法可在Eca109细胞内高效沉默S100A6,细胞转染后48h,与未转染细胞比较,S100A6 mRNA表达量降低,且差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),蛋白表达量检测结果与mRNA检测结果一致;S100A6基因沉默可明显抑制对数生长期Eca109细胞增殖活性,与未转染细胞比较,差异有统计学意义(P<0.01);S100A6基因沉默可明显抑制对数生长期Eca109细胞迁移能力。结论通过shRNA表达载体途径可在Eca109细胞中有效沉默S100A6基因,S100A6基因沉默能够显著抑制Eca109细胞增殖活性及迁移能力。

外源性S100A6对人骨肉瘤细胞株U2OS的增殖、凋亡及β-catenin表达的影响

目的:探讨外源性S100A6对骨肉瘤细胞株U2OS的生物学作用及其可能机制。方法:MTT法检测S100A6对U2OS细胞增殖的影响及浓度依赖性,台盼蓝拒染法计数活细胞检测S100A6对U2OS增殖作用的时间依赖性,Hoechst染色检测细胞凋亡,Westernblot法及免疫细胞化学法检测细胞内β-catenin的表达变化。结果:S100A6作用3d时,浓度为30、100、300和1000μg/ml的重组S100A6(GST-S100A6)组的OD值分别比相应浓度的GST对照组的OD值减少20.5%、23.7%、32.2%和36.8%,P<0.05;蛋白浓度为100μg/ml时,GST-S100A6组的细胞数在前2d与GST组相似,第3、4、5d的细胞数分别降低到GST组的59%、46%、48%,P<0.05;GST-S100A6干预3d后细胞凋亡率增高3.16倍,P<0.01;免疫细胞化学法测得经GST-S100A6处理3d后β-catenin的平均光密度值比GST组增加22.9%,P<0.01;经携带S100A6基因的重组腺病毒(Ad-S100A6)处理3d后,Westernblot法检测细胞中β-catenin的校正灰度值为1.4204±0.1999,比对照组(Ad-GFP组,0.9996±0.1000)显著增高,P<0.01。结论:外源性S100A6能够抑制U2OS细胞的增殖、促进其凋亡和增加U2OS细胞中β-catenin水平。

肿瘤相关蛋白质S100A6结构和功能的分析与预测

目的:分析S100A6蛋白分子结构和功能,预测其在肿瘤发生发展过程中可能的分子机制。方法:利用计算机软件,生物信息学工具,查询国际通用的生物信息学数据库,对S100A6氨基酸序列、二级结构域功能域、酶切位点、转录后修饰、亚细胞定位、跨膜结构域、分子功能、蛋白质相互作用等进行分析,并对其生物学功能进行分析和预测。结果:S100A6蛋白为酸性、小分子、稳定性蛋白质、亲水性评估-0.289;该蛋白的二级结构显示为非球状蛋白质,存在两个结构域及两个钙结合区域,没有跨膜区域;该蛋白为非信号肽类型的分泌蛋白,有16个酶切位点,亚细胞定位于核膜、胞质和细胞膜;有10个蛋白质与S100A6蛋白质存在直接的相互作用关系,存在3个磷酸化位点、可能存在2个赖氨酸糖化作用位点、可能存在乙酰化作用,没有糖基化位点。该蛋白质的功能区域存在4个自然突变位点。该蛋白存在钙传感器、介导细胞内钙信号释放,并与其它蛋白相互作用,间接的重组肌动蛋白细胞骨架及在细胞能动性上发挥作用,S100A6蛋白可能调控细胞周期及细胞分化,同时可能刺激Ca2+依赖的胰岛素释放,刺激催乳素分泌及胞外分泌。结论:S100A6蛋白是钙周期蛋白,很可能在肿瘤发生发展过程中对诱导细胞分化及信号转导方面发挥十分重要的作用。

人S100A6-GST融合蛋白的原核表达和纯化

目的:制备人S100A6-GST融合蛋白,为研究人S100A6((hS100A6)蛋白的功能奠定基础。方法:从pHAHA-hS100A6中双酶切获取hS100A6基因,亚克隆至原核表达载体pGST-moluc,构建pGST-moluc-hS100A6,转化BL21后,IPTG诱导重组菌表达hS100A6蛋白,SDS-PAGE及WesternBlot鉴定表达产物,Glutathion-Sepharose4B球珠分离纯化。结果:重组菌株表达出与理论预测值相符的一个约36ku的hS100A6融合蛋白,纯化后的融合蛋白的产量为3mg/L菌液,纯度约92%。结论:成功构建了hS100A6-GST原核表达质粒,在大肠杆菌中表达纯化后得到较高浓度的hS100A6-GST融合蛋白,为hS100A6蛋白功能的研究打下了基础。

S100A6基因对胃癌细胞生物学特性的影响

目的探讨S100A6基因对于胃癌细胞增殖状态、细胞周期、凋亡状态等生物学特性及成瘤、浸润转移能力等恶性表型的影响。方法将S100A6基因插入载体pcDNA3.1构建PC-S100A6真核表达载体。以脂质体介导转染MKN45胃癌细胞建立稳定转染细胞系(MKN-S100A6),而后使用流式细胞仪、生长曲线法、平板克隆形成实验法、细胞迁徙实验法等方法分析稳定表达株相关生物学特性与恶性表型的变化。同时设立空载体转染组和空白细胞组为对照。结果与转染pcDNA3.1空载体及空白MKN45胃癌细胞相比,转染PC-S100A6载体的稳定表达细胞株生长显著加快,前5日细胞计数差异有统计学意义(P<0.05),后两组之间亦无显著差异,细胞周期检测显示PC-S100A6转染组处于G2-M期的细胞比例显著高于未处理的MKN45细胞和转染pcDNA3.1空载体的MKN45细胞(P<0.05),而处于S期的细胞比例显著低于其他两组(P<0.05),其他各期细胞比例差异均无统计学意义。流式细胞仪法检测细胞凋亡结果显示各组细胞的凋亡比例均为0.8%左右,统计学检验差异无统计学意义(P>0.05)。平板克隆形成实验结果显示PC-S100A6转染组平均克隆形成率显著高于其他两组(P<0.05),细胞迁徙实验结果提示PC-S100A6转染组穿膜率显著高于其他两组(P<0.05)。结论S100A6基因可能具有促进细胞生长增殖及分裂作用,同时可影响细胞周期,增加处于分裂期细胞的比例,可能具有促进细胞分裂作用,但对细胞凋亡的影响作用较小。S100A6基因可能加强胃癌细胞侵袭转移能力。总之该基因对维持细胞恶性表型有一定意义。

S100A6上调人乳腺癌细胞系MCF-7中β-catenin及其机制

目的探讨钙细胞周期蛋白S100A6对人乳腺癌细胞系MCF-7中β-catenin的影响及其机制。方法分别用表达S100A6及其siRNA的重组腺病毒AdS100A6与AdsiS100A6处理MCF-7细胞,RT-PCR、Western blot和免疫细胞化学检测β-catenin、E-钙黏蛋白(E-cadherin)和磷酸化糖原合酶激酶3β(p-GSK3β)表达或分布的变化。结果在MCF-7细胞中,S100A6可以上调β-catenin的蛋白表达水平(P<0.01),但对其mRNA表达无显著性影响;S100A6对E-cadherin的mRNA表达、蛋白质表达水平及分布均无显著性影响;S100A6可以提高β-catenin降解复合体的主要成员GSK3β磷酸化水平(P<0.01)。结论 S100A6上调β-catenin的可能机制是通过促进GSK3β磷酸化失活,而不是通过调节E-cadherin实现的。

人S100A6对人骨肉瘤细胞系β-catenin的作用

目的研究人S100A6对人骨肉瘤细胞系MG63和U2OS中β-catenin的作用。方法分别用携带人S100A6及其siRNA基因的重组腺病毒AdS100A6和AdSiS100A6感染MG63和U2OS,分别使细胞中S100A6表达上调和下调;RT-PCR、蛋白印迹和免疫细胞化学法分别检测细胞中β-catenin mRNA和蛋白表达。结果上调骨肉瘤细胞系MG63和U2OS中S100A6后,β-catenin mRNA和蛋白表达均增加(P<0.05),蛋白的增加以胞核更明显。下调S100A6则使细胞中β-catenin mRNA及蛋白表达减少(P<0.05),蛋白的减少也以胞核更甚。结论增加Wnt信号途径活性可能是S100A6参与肿瘤发生发展的机制之一。

外源性重组S100A6蛋白对5株转化细胞系的增殖、迁移能力及β-catenin水平的影响

目的:探讨S100A6对5种转化细胞系株(HEK293、9HTE、CHO、MEF和C3H10T1/2)的增殖、迁移能力和β-catenin水平的影响。方法:通过转化质粒pMoluc-GST-hS100A6到大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达重组S100A6蛋白,为后续实验提供材料;MTT法检测细胞增殖,细胞划痕和Transwell法检测细胞迁移,免疫细胞化学法及Western-blotting检测β-catenin表达水平。结果:①通过IPTG诱导表达,从大肠杆菌中收获了高纯度重组S100A6(GST-S100A6);②外源性重组S100A6对作为阳性对照的肿瘤细胞系——人骨肉瘤细胞143B的增殖及迁移均有抑制作用(P<0.05),而对5株转化细胞系的增殖及迁移均无显著影响(P>0.05);③免疫细胞化学法和Western-blotting一致揭示重组S100A6可上调5株转化细胞系的β-catenin水平(P<0.05)。结论:S100A6对5株转化细胞系的增殖、迁移无明显影响,但可上调此5株转化细胞系Wnt/β-catenin水平。

S100A6在卵巢上皮性癌中的表达及临床意义

目的:探讨钙结合蛋白S100A6(calcyclin,Cacy)在卵巢上皮性癌中的表达及临床意义。方法:采用免疫组化技术检测60例卵巢癌病理组织标本中S100A6的蛋白表达情况,分析S100A6与卵巢癌的发生发展的关系,探讨S100A6与卵巢上皮性癌临床病理因素之间的相关性。结果:S100A6表达水平与病理类型无关(P>0.05),与细胞分化程度有关,低分化的卵巢癌患者中S100A6高表达比例为66.7%,而在高分化的卵巢癌患者中S100A6高表达比例为15.4%,有统计学差异(P<0.05)。S100A6表达水平与手术分期有关,随着手术分期的增加,S100A6表达水平也随之明显上升,有统计学差异(P<0.05)。同时我们还发现,S100A6表达水平和腹水、淋巴结转移有关。在出现腹水和淋巴结转移的卵巢癌患者中,S100A6高表达的比例明显增加,有统计学意义(P<0.001)。结论:S100A6表达和与卵巢癌的发生发展、侵袭转移和不良预后密切相关,有可能成为临床评价病情进展和随访的参考指标。

hS100A6抑制卵巢癌细胞HO8910和HO8910 PM增殖、促进凋亡并上调其Wnt/β-catenin活性

目的研究hS100A6(human S100A6)对人卵巢癌细胞系(低转移系HO8910和高转移系HO8910 PM)增殖、凋亡和Wnt/β-catenin信号途径的影响。方法通过MTT以及台盼蓝染色检测细胞增殖的变化;Hoechst检测细胞凋亡的变化;提取细胞总蛋白及核蛋白Western blot检测hS100A6对β-catenin的影响。结果 MTT及台盼蓝染色结果显示hS100A6抑制HO8910细胞和HO8910 PM细胞的增殖(P<0.05),Hoechst染色结果显示hS100A6同时促进这两系细胞的凋亡(P<0.05);Western blot显示hS100A6增加β-catenin的水平并促进其发生核转位。结论 hS100A6能抑制人卵巢癌细胞系HO8910和HO8910 PM增殖,促进其凋亡,同时激活Wnt/β-catenin信号途径。

血清S100A6检测对卵巢上皮性癌的诊断价值

目的 探讨血清S100A6对卵巢上皮性癌的诊断及疾病进展临床诊断的指导价值.方法 采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测40例卵巢上皮性癌患者、20例卵巢良性肿瘤患者及20例正常体检者血清中S100A6的浓度.结果 卵巢癌与良性卵巢肿瘤,正常对照患者相比,S100A6血清浓度显著升高,差异具有统计学意义（t=2.66,P＜0.01）.中晚期（Ⅲ＋Ⅳ期）卵巢癌患者S100A6血清浓度显著高于早期（Ⅰ＋Ⅱ期）卵巢癌患者（t=4.68,P＜0.001）.与高分化和中分化相比,低分化的卵巢癌患者S100A6血清浓度显著升高,差异有统计学意义（t=2.49,P＜0.05）.出现淋巴结转移的卵巢癌患者中S100A6血清浓度显著高于淋巴结无转移的卵巢癌患者（t=4.02,P＜0.01）.S100A6血清平均浓度与病理类型无关（t=1.8,P＞0.05）.结论 血清S100A6的血清浓度与卵巢癌病情发展相关,S100A6有望成为监测卵巢上皮性癌病情发展的分子标志物.

S100A6 siRNA对卵巢癌细胞生物学行为的影响

目的探讨S100A6蛋白表达对卵巢癌细胞生物学行为的影响。方法以卵巢癌细胞A2780为研究对象，利用RNA干扰技术特异性降低S100A6表达水平后，分别用实时定量PCR和Western blot检测S100A6 siRNA对S100A6表达水平的抑制效率。用流式细胞术检测S100A6 siRNA转染前后A2780细胞的细胞周期变化，用Transwell试验观察S100A6siRNA转染前后侵袭能力的变化，用MTT法检测S100A6 siRNA对A2780细胞顺铂敏感性的影响。结果S100A6siRNA转染组细胞中S100A6 mRNA和蛋白表达水平与S100A6 siRNA呈浓度、时间依赖性明显下调，抑制效率可达63．75％～80．68％。在与空白对照组和阴性对照siRNA组相比，S100A6 siRNA出现了G0／G1期比例升高，S期比例降低，差异有统计学意义（X^2=6．211，P=0．045）。Transwell试验表明，6．25、12．5nmol／LS100A6 siRNA分别转染48h后，A2780细胞芽膜细胞数目分别为78±7．51和27±8．24，与阴性对照组（91±5．78）相比，穿膜细胞显著减少，差异有统计学意义（X^2=3．898，P=0.048）。MTT法测定S100A6 siRNA转染后A2780细胞对顺铂敏感性的影响结果显示，S100A6 siRNA引起顺铂对A2780细胞的抑制率增加（X^2=9．609，P=0．022），而空白对照组和阴性对照siRNA组之间无明显差异。对顺铂半数致死剂量（IC50）的计算结果显示，分别转染6．25、12．5nmol／LS100A6 siRNA的A2780细胞对顺铂IC50值分别为13．42μmol／L和11．32μmoL／L，与空白对照组和阴性对照siRNA组相比均显著降低，差异有统计学意义（X^2=5．566，P=0．018）。结论S100A6 siRNA转染卵巢癌A2780细胞后，引起A2780细胞GO／G1期阻滞，侵袭能力降低，同时对顺铂的敏感性有所增强，可能是卵巢癌靶向治疗的候选基因。

降低S100A6基因表达对胃癌细胞生物学特性影响的研究

目的:初步探讨S100A6基因对于胃癌细胞生长、增殖状态,细胞周期,凋亡状态等生物学特性及成瘤、浸润转移能力等恶性表型的影响。方法:S100A6基因的RNAi载体通过脂质体介导法转染S100A6基因高表达SGC7901细胞,后经G418压力筛选法获得稳定转染的细胞系,经过RT-PCR法、免疫细胞化学法及Western-bloting法证实。对稳定表达株进行鉴定,而后使用流式细胞仪、生长曲线法、平板克隆形成实验法、细胞迁徙实验等方法分析稳定表达株相关生物学特性与恶性表型的变化,每种检测实验均设立RNAi载体稳定转染细胞组、IMG800空载体稳定转染细胞组和空白SGC7901细胞组。结果:稳定的S100A6基因RNAi细胞系经过RT-PCR法、免疫细胞化学法及Western-bloting法证实,mRNA抑制率可达75%左右,蛋白产物的抑制率达85%左右。与转染IMG800空载体及空白SGC7901胃癌细胞相比转染S100A6 RNAi载体的稳定表达细胞株生长减慢,各时间点细胞计数显著低于对照组(P<0.05);后两组之间亦无显著差异,细胞周期检测显示S100A6 RNA干扰组G0-G1期比例显著高于对照组,而G2-M及S期比例显著低于对照组(P<0.05),其它各期细胞比例均无显著差异。平板克隆形成实验结果显示S100A6 RNA干扰组克隆形成率显著低于对照组(P<0.05);,细胞迁徙实验结果提示S100A6 RNA干扰组穿膜率显著低于对照组(P<0.05)。结论:S100A6基因可能具有促进细胞生长增殖作用,同时可影响细胞周期,增加处于分裂期细胞的比例可能具有促进细胞分裂作用,并可促进胃癌细胞侵袭转移。降低S100A6基因表达可能抑制胃癌细胞的恶性生物学行为。

RNPC1、S100A6蛋白在肺腺癌中的表达及与临床病理特征的关系

目的探讨RNPC1、S100A6蛋白在肺腺癌中的表达及与临床病理特征的关系。方法选取2015年1月至2018年3月我院保存的肺腺癌组织标本81例,同时选取癌旁组织作为对照,采用免疫组化染色法检测RNPC1、S100A6蛋白表达。结果肺腺癌组织RNPC1和S100A6蛋白阳性表达率分别为70.37%和81.49%,明显高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05);RNPC1表达与肺腺癌患者吸烟、TNM分期、分化程度和淋巴结转移有关(P<0.05);S100A6蛋白表达与肺腺癌患者吸烟、TNM分期和淋巴结转移有关(P<0.05);RNPC1与S100A6蛋白表达呈正相关(rs=0.595,P<0.05)。结论肺腺癌组织中RNPC1和S100A6蛋白表达上调,与患者病理特征有关,可能在肺腺癌发生发展中有一定作用。

S100A6 siRNA的构建及鉴定

目的利用小片段干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)抑制S100A6蛋白的表达,为研究CacyBP/SIP核转位机制提供有利的工具。方法设计S100A6的siRNA序列,用脂质体LipofectamineTM 2000将siRNA转染至人结肠癌SW480细胞中,在荧光显微镜下观察转染效率,用Real-time PCR及Western blot方法检测S100A6在人结肠癌SW480细胞内的mRNA和蛋白表达。结果构建了3对S100A6-siRNA,荧光显微镜下检测转染人结肠癌SW480细胞成功;RT-PCR证明了在SW480细胞内S100A6的mRNA表达显著降低(P<0.05);Western blot证明了SW480细胞内S100A6蛋白表达显著降低(P<0.05);与S100A6si-1、S100A6si-3组相比,S100A6si-2组对S100A6的mRNA和蛋白抑制效果最明显(P<0.05)。结论成功构建了S100A6-siRNA,为CacyBP/SIP核转位机制研究提供了有利的工具。