肛瘘术后病人血清钙结合蛋白S100A8、促红细胞生成素表达与创面愈合、肛门功能的关系

目的 探究肛瘘术后病人血清钙结合蛋白S100A8(S100A8)、促红细胞生成素(EPO)表达与创面愈合、肛门功能的关系。方法 以2020年5月至2022年3月河北中医学院第二附属医院收治的96例肛瘘病人为研究对象,所有病人均接受肛瘘手术治疗。对比治疗前后病人血清S100A8、EPO水平及肛门失禁Wexner评分,比较不同血清S100A8、EPO水平病人疗效、创面愈合时间、14 d创面愈合率及Wexner评分;Pearson相关性分析血清S100A8、EPO与创面愈合时间、14 d创面愈合率及Wexner评分的相关性;多因素logistic回归分析肛瘘术效果的影响因素。结果 术后,病人血清S100A8较术前明显降低[(65.34±6.21)μg/L比(83.15±8.92)μg/L,P<0.05],EPO水平较术前明显升高[(52.36±5.67)U/L比(33.67±4.86)U/L,P<0.05],Wexner评分较术前明显降低[(9.74±2.22)分比(21.02±5.31)分,P<0.05]。术后血清S100A8低表达者较高表达者疗效更优(P<0.05),EPO高表达者较低表达者疗效更优(P<0.05)。术后血清S100A8高表达者较低表达者创面愈合时间更长(P<0.05),14 d创面愈合率更低(P<0.05),Wexner评分更高(P<0.05),血清S100A8与创面愈合时间呈正相关,与创面愈合率呈负相关,与Wexner评分呈正相关(均P<0.05)。术后血清EPO高表达者较低表达者创面愈合时间更短(P<0.05),14 d创面愈合率更高(P<0.05),Wexner评分更低(P<0.05),血清EPO与创面愈合时间呈负相关,与创面愈合率呈正相关,与Wexner评分呈负相关(均P<0.05)。多因素logistic回归分析显示,S100A8高表达、EPO低表达是影响肛瘘术后效果的危险因素。结论 肛瘘术后病人血清S100A8、EPO与病人创面愈合时间、14 d创面愈合率、Wexner评分显著相关,能够反应病人创面愈合及肛门功能情况。

iTRAQ技术筛选差异蛋白S100A8在特发性膜性肾病中的表达及意义

目的应用同位素标记相对与绝对定量蛋白组学(isobaric tags for relative and absolute quantification,iTRAQ)技术鉴定和筛选特发性膜性肾病(idiopathic membranous nephropathy,IMN)患者外周血中的差异蛋白,验证IMN患者差异蛋白S100A8表达水平及其意义。方法收集IMN组、非膜性肾病组(not-idiopathic membranous nephropathy,NIMN)和健康对照组的外周血标本,结合生物信息学分析获得差异表达蛋白。采用蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)及酶联免疫吸附方法(ELISA法)检测S100A8蛋白在3组的表达,分析其表达与IMN的关系。结果①通过iTRAQ方法并结合生物信息学分析筛选出S100A8作为目标蛋白;②S100A8在30例IMN患者中表达增高,与NIMN组差异有统计学意义(P<0.001);③ROC曲线显示S100A8蛋白对IMN有高诊断价值。结论检测S100A8蛋白的表达对诊断IMN具有一定价值,S100A8可能是IMN的候选生物标志物。

重症肺炎支原体肺炎患儿血清IL-17A、S100A8、S100A9表达及在预后判断中的意义

目的探讨血清白细胞介素(IL)-17A、钙结合蛋白S100A8及S100A9在重症肺炎支原体肺炎(SMPP)患儿中的表达及在预后判断中的意义。方法选取2019年3月至2021年3月该院诊治的116例SMPP患儿为SMPP组。根据小儿危重病例评分将SMPP患儿分为非危重组(43例),危重组(40例),极危重组(33例)。根据入院治疗28 d的预后情况将SMPP患儿分为预后良好组(82例)和预后不良组(34例)。以同期该院的60例体检健康儿童为对照组。检测各组血清IL-17A、S100A8、S100A9、降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平,采用Pearson相关分析血清IL-17A、S100A8、S100A9水平与PCT、CRP、IL-6、TNF-α的相关性,采用多因素Logistic回归分析影响SMPP患儿预后不良的因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析各指标对SMPP患儿预后不良的预测价值。结果SMPP组血清IL-17A、S100A8、S100A9、PCT、CRP、IL-6、TNF-α水平明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。SMPP患儿血清IL-17A、S100A8、S100A9水平与PCT、CRP、IL-6、TNF-α均呈正相关(P<0.05)。极危重组血清IL-17A、S100A8、S100A9水平高于危重组及非危重组,差异均有统计学意义(P<0.05)。血清IL-17A、S100A8、S100A9水平升高是影响SMPP患儿预后不良的独立危险因素。血清IL-17A、S100A8、S100A9联合预测SMPP患儿预后不良的曲线下面积(AUC)为0.895,高于血清IL-17A、S100A8、S100A9单独检测的AUC(0.833、0.764、0.810),差异均有统计学意义(Z=3.780、6.723、5.012,P<0.05)。3项指标联合检测的灵敏度和特异度分别为0.891、0.755。结论SMPP患儿血清IL-17A、S100A8、S100A9水平升高,与SMPP病情严重程度有关,3项指标联合检测对评估SMPP预后不良具有较高的预测价值。

S100A8、S100A9蛋白在急性肺损伤新生儿血清中的动态变化及意义

目的探讨S100A8、S100A9蛋白在急性肺损伤(ALI)新生儿血清中的动态变化。方法选择该院2011年1月至2013年12月收治的ALI患儿30例(ALI组)、湿肺患儿30例(湿肺组)及同期产科出生的健康新生儿30例(对照组),采取酶联免疫吸附测定(ELISA)法分别检测各组对象S100A8及S100A9蛋白的动态变化。结果ALI组在发病第1、3、7天血清S100A8、S100A9蛋白均明显高于湿肺组及对照组,差异有统计学意义(P<0.01),ALI组S100A8蛋白在发病第1天升高最为明显[(187.29.±29.71)pg/mL],S100A9蛋白在发病第3天升高最为明显[(280.01±42.29)pg/mL],差异有统计学意义(P<0.01),第7天时二者均有不同程度下降。湿肺组S100A8、S100A9蛋白较对照组升高,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论S100A8、S100A9蛋白参与了新生儿ALI的发病,对新生儿ALI早期诊断、治疗及预后有着一定的潜在临床应用价值。

亲和纯化技术联合质谱鉴定与S100A8和S100A9相互作用的蛋白

目的:利用亲和纯化技术联合质谱分析筛选鉴定与S100A8和S100A9相互作用的蛋白,为探讨S100A8和S100A9在结肠炎相关性结肠癌发生发展中的作用机制提供线索。方法:构建含有S100A8和S100A9 CDS区和Flag亲和标签的真核表达载体p3×Flag-CMV-S100A8和p3×Flag-CMV-S100A9,将其转染至HEK293细胞中,48 h后收集蛋白。运用标签分离纯化S100A8和S100A9蛋白,液相质谱/质谱分析技术(liquid chromatography mass spectrometry/mass spectrometry,LC-MS/MS)鉴定S100A8和S100A9的相互作用蛋白,通过生物信息学的方法(GO分析)归纳分析相互作用蛋白,免疫共沉淀实验鉴定S100A8和S100A9的相互作用蛋白。结果:通过标签纯化联合质谱分析成功鉴定出PKM,NPM1,e IF5A等14个与S100A8相互作用的蛋白,鉴定出14-3-3ε,PKM等6个与S100A9相互作用的蛋白。对所鉴定的相互作用蛋白进行生物信息学分析,发现与S100A8和S100A9相互作用的蛋白参与糖代谢、细胞黏附、正向调控NF-κB转录因子活性、抗凋亡等在内的生物信号通路,并利用免疫共沉淀证实PKM2与S100A8和S100A9发生相互作用,14-3-3ε与S100A9发生相互作用。结论:利用免疫共沉淀结合质谱技术筛选鉴定的S100A8和S100A9相互作用蛋白PKM2和14-3-3ε,可能为阐明S100A8和S100A9在结肠炎相关性结肠癌发生发展中的作用机制提供重要线索。

2型糖尿病患者血清Lp-PLA2、IL-18、S100A8水平变化及与糖尿病足溃疡的关系

目的分析血清脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)、白细胞介素(IL)-18、钙结合蛋白S100A8(S100A8)水平与糖尿病足溃疡(DFU)的关系。方法收集2019年1月至2021年3月于广州市番禺区中医院随诊的183例2型糖尿病(T2DM)患者的临床资料,按是否并发DFU分为T2DM组(101例)和DFU组(82例)。比较两组一般资料、Lp-PLA2、IL-18、S100A8等生化指标。探讨DFU发病的危险因素。结果DFU组空腹血糖、糖化血红蛋白水平高于T2DM组,糖尿病病程长于T2DM组(P<0.05)。DFU组Lp-PLA2、IL-18、S100A8、C反应蛋白、IL-1β、肿瘤坏死因子-α、白细胞计数、中性粒细胞百分比高于T2DM组(P<0.05)。logistic回归分析显示,IL-1β(OR=1.766,95%CI:1.332~2.343,P<0.001)、Lp-PLA2(OR=1.824,95%CI:1.294~2.571,P<0.001)、IL-18(OR=2.083,95%CI:1.367~3.175,P<0.001)、S100A8(OR=1.941,95%CI:1.211~3.112,P<0.001)升高均是DFU发病的危险因素。结论血清Lp-PLA2、IL-18、S100A8水平的升高与DFU的发病密切相关,可据此对高危DFU患者进行早期预防、诊治。

电刺激迷走神经对感染性休克大鼠钙结合蛋白S100A8表达的影响

目的：通过建立感染性休克大鼠模型，探索电刺激迷走神经对感染性休克大鼠血浆中钙结合蛋白 S100A8表达水平的影响。方法：雄性成年 SD 大鼠30只，采用盲肠结扎穿孔法（CLP）建立感染性休克模型，将30只大鼠随机分为6组：①假电针正常组；②电针正常组；③假电针 CLP 组；④电针 CLP 组；⑤迷切假电针 CLP 组；⑥迷切电针 CLP 组。③～⑥组动物均行颈总动脉置管，连续监测平均动脉压；采用 ELISA 法检测各组大鼠的血浆钙结合蛋白 S100A8。结果：CLP 组手术后平均动脉压呈进行性下降，手术后12 h 时血浆钙结合蛋白 S100A8水平显著升高（P ＜0．01）；与 CLP 组比较，电刺激组动物平均动脉压下降程度较低（P ＜0．01）；迷切电针 CLP 组与迷切假电针 CLP 组相比，大 鼠 平 均 动 脉 压 下 降 程度较低，血浆钙结合蛋白S100A8水平显著下降（P ＜0．01）。结论：电刺激迷走神经可以缓解盲肠结扎穿孔导致的大鼠感染性休克所引发的进行性动脉压下降，降低血浆钙结合蛋白 S100A8水平，对于治疗休克有辅助作用。

钙结合蛋白S100A8/A9对宫颈癌细胞系CasKi细胞F-肌动蛋白的影响

目的探讨钙结合蛋白S100A8/A9复合物对人宫颈癌上皮细胞癌细胞系CasKi细胞骨架及表面超微结构的影响。方法应用20μg/ml S100A8/A9复合物作用于CasKi细胞,对细胞骨架F-肌动蛋白进行染色,应用快速共聚焦荧光显微镜观察细胞骨架的改变。在生理条件下,应用原子力显微镜(atomic force microscopy,AFM)对活体细胞进行高分辨成像,观察细胞表面超微结构及应力纤维。结果S100A8/A9复合物作用24 h后宫颈癌细胞系CasKi细胞的F-肌动蛋白排列出现紊乱,主要分布于细胞的周边,细胞中央F-肌动蛋白含量明显减少。CasKi细胞经过20μg/ml S100A8/A9蛋白复合物处理前细胞核部位F-肌动蛋白光密度为92.42±5.16,经过S100A8/A9 72 h处理后,F-肌动蛋白的光密度降为57.67±3.70,两者相比较差异具有显著的统计学意义(t=5.268,P=0.000)。AFM成像显示S100A8/A9复合物作用后细胞边缘卷曲,高度增加,伪足减少,细胞膜下应力纤维结构遭到破坏。结论S100A8/A9蛋白复合物可以对宫颈癌细胞系CasKi细胞表面的超微结构及应力纤维产生影响,并且这种影响主要是通过肌动蛋白的重新分布实现的。

S100A8/A9蛋白与炎症相关疾病的研究进展

S100A8和S100A9蛋白是重要的炎症反应蛋白,在炎症过程中刺激白细胞(WBC)的募集,同时对细胞因子(CK)的分泌施以诱导,起到调节炎症反应的关键作用,对于诸多疾病可作为候选生物标志物,并且在治疗炎症相关疾病方面,可将其当做评估指标与作用靶点。

不同通气方式对肺叶切除术患者S100A8蛋白表达的影响

目的探讨血清钙结合蛋白Calgranulin A(S100A8)在不同通气方式下行肺叶切除术的表达。方法选择行肺叶切除术肺癌患者20例,根据采用不同通气方式,分为单肺通气组和双肺通气组,每组10例。记录两组患者的手术时间、麻醉时间、总输液量、氧合指数、苏醒时间、拔管时间、吸痰次数、有无肺炎、有无肺不张、术后住院时间、有无死亡等情况。采用Western blot分别在手术前(T0)、手术结束时(T1)、术后24 h(T2)和术后48 h(T3)检测两组患者血清中S100A8的表达。结果单肺通气组和双肺通气组患者手术时间、麻醉时间、总输液量、苏醒时间、拔管时间、吸痰次数、肺炎发生情况、肺不张发生情况、死亡发生情况等比较差异均无统计学意义(P>0.05)。单肺通气组氧合指数较双肺通气组低[(296.20±77.64)mmHg vs(319.20±30.23)mmHg,t=2.189,P=0.042)],术后住院时间增加[(7.80±1.87)d vs(6.20±1.48)d,t=2.121,P=0.048]。术前单肺通气组和双肺通气组S100A8表达量差异无统计学意义(P>0.05)。重复方差分析显示,不同通气方式S100A8表达组间差异有统计学意义(F=310.76,P<0.001),随时间变化的趋势不同(F=24.85,P=0.025),组间与时间点存在交互作用(F=18.85,P=0.001)。结论行开胸肺叶切除术肺癌患者采用单肺通气较双肺通气的术中氧合指数降低,且S100A8表达升高,可能与其更易发生呼吸机相关性肺损伤有关。

S100A8蛋白在口腔鳞癌中的表达及临床意义

采用免疫组化法和免疫印迹法检测S100A8蛋白在30例正常口腔组织及35例口腔鳞癌组织中的表达。35例OSCC组织中S100A8蛋白阳性表达率为68.5%,在正常组织中的表达率为36.7%(P<0.05),S100A8可能参与OSCC的发生与发展。

微创血肿清除术后IL-6、GFAP、S100A8/A9水平与自发性脑出血患者功能预后的关系及其预测价值

目的:分析白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)、钙结合蛋白S100A8/A9与微创血肿清除术后自发性脑出血(spontaneous intracerebral hemorrhage,sICH)患者功能预后的关系及其预测价值。方法:选取2016年1月至2018年12月杨凌示范区医院118例接受微创血肿清除术的基底节区sICH患者,根据发病1个月后的改良Rankin指数(modified Rankin scale,mRS)评分情况分为预后良好组(n=66)与预后不良组(n=52)。微创血肿清除术前及次日,检测患者血清中IL-6、GFAP、S100A8/A9水平。随后比较两组患者术前、术后IL-6、GFAP、S100A8/A9水平的差异,采用二元logistic回归分析上述指标与患者功能预后的关系,采用Spearman秩相关分析上述指标与mRS评分的相关性,采用受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析上述指标对sICH患者功能预后的预测价值并采用Hanley&McNei检验对各指标的AUC进行比较。结果:预后不良组患者术前血清中IL-6、GFAP、S100A8/A9水平与预后良好组差异均无统计学意义(P>0.05);术后血清中IL-6、GFAP、S100A8/A9水平均显著高于预后良好组,差异均有统计学意义(P<0.05)。二元logistic回归分析显示:术后IL-6、GFAP、S100A8/A9水平均为影响患者功能预后的独立因素(P<0.05)。Spearman秩相关分析显示:术后IL-6、GFAP、S100A8/A9水平均与mRS评分呈显著正相关(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,术后IL-6、GFAP、S100A8/A9水平及联合预测因子在预测微创血肿清除术后sICH患者功能预后中的AUC分别为0.817、0.770、0.819、0.928,差异均有统计学意义(P<0.05),且采用联合预测因子进行预测的AUC及敏感度(80.8%)和特异度(92.4%)均最高。结论:微创血肿清除术后sICH患者的IL-6、GFAP、S100A8/A9水平可能影响其功能预后;联合应用术后IL-6、GFAP、S100A8/A9可用于该类患者功能预后的预测,值得临床推荐使用。

鼻塞持续气道正压辅助通气治疗新生儿重症湿肺的效果及对肺功能和血清S100A8、S100A9蛋白水平的影响

目的观察鼻塞持续气道正压辅助通气治疗新生儿重症湿肺的效果及对肺功能和血清S100钙结合蛋白A8(S100A8)、S100钙结合蛋白A9(S100A9)水平的影响。方法选取我院2015年5月～2018年2月收治的80例新生儿重症湿肺患儿为对象,采用随机数字表法将其分为对照组和实验组各40例,对照组采用常规治疗,实验组采用鼻塞持续气道正压辅助通气治疗。比较两组的临床疗效、肺功能[(FEVl)、(FEVl/FVC)、PEF)]及血清S100A8、S100A9蛋白水平变化。结果治疗前两组患儿的FEVl、FEVl/FVC、PEF值和血清S100A8、S100A9蛋白水平相较,差异无统计学意义(P> 0.05),治疗后实验组的FEVl、FEVl/FVC、PEF均高于对照组,血清S100A8、S100A9蛋白水平均低于对照组,差异有统计学意义(P <0.05);实验组总有效率为87.50%,明显高于对照组的70.00%,差异有统计学意义(P <0.05)。结论鼻塞持续气道正压辅助通气治疗新生儿重症湿肺的疗效显著,能够有效的缓解肺功能,降低血清S100A8、S100A9蛋白水平,值得进一步推广使用。

钙结合蛋白及相关蛋白在脊柱侧凸患者椎间盘终板软骨中的表达

目的观察钙结合蛋白S100A8、热休克蛋白(heat shock protein,HSP)90和钙调蛋白(calmodulin,CaM)基因在特发性脊柱侧凸(idiopathic scoliosis,IS)患者和先天性脊柱侧凸(congenital scoliosis,CS)患者椎间盘终板内的表达。方法收集经临床和影像学诊断为特发性脊柱侧凸的前路脊柱手术患者的椎间盘终板和先天性脊柱侧凸患者的椎间盘终板各4例,用TRIzol法提取终板软骨中的总蛋白,采用Western blot技术分析和对比椎间盘终板中S100A8、HSP90和CaM基因的表达。结果 S100A8在特发性脊柱侧凸和先天性脊柱侧凸患者中的表达有显著性差异,而CaM和HSP90则没有明显差别。结论 S100A8基因在特发性脊柱侧凸发生发展过程中起到一定的作用,需对该基因的表达和调控做进一步研究。

S100A8/S100A9在视网膜退行性疾病中的作用及机制研究进展

S100蛋白家族属于损伤相关分子模式(DAMP),其在机体先天免疫反应中发挥着重要的炎症调节作用。其中S100A8/S100A9蛋白在众多疾病中发挥着广泛的抗菌、抗感染功能,并促进机体免疫及炎症反应的发生发展。在各类视网膜退行性疾病中,S100A8/S100A9蛋白在转录及翻译阶段均明显上调,可促进眼部组织炎症因子的激活、巨噬细胞和中性粒细胞等免疫细胞的激活与募集,促进眼部炎症发生发展。文章旨在阐述S100A8/S100A9蛋白的生物学功能及其在视网膜退行性疾病如糖尿病视网膜病变、年龄相关性黄斑变性和缺血性视网膜病变中的作用及可能的机制。

钙结合蛋白S100A8在扩张皮肤中的实验研究

目的探究扩张皮肤中钙结合蛋白S100A8的分布特征及其在皮肤扩张过程中的作用。方法构建大鼠头部皮肤扩张模型,利用免疫荧光染色、qPCR、Western blotting等方法检测皮肤中S100A8的分布及表达水平。随后,体外实验对人角质形成细胞拉伸,模拟扩张皮肤在机械应力下的状态,利用qPCR、酶联免疫吸附测定等实验检测细胞中及其上清液中S100A8的含量。应用S100A8重组蛋白或角质形成细胞拉伸后的上清液对人成纤维细胞增殖、迁移、胶原蛋白合成进行检测。结果大鼠扩张表皮层S100A8表达水平较高(P<0.01);角质形成细胞经体外拉伸后分泌大量S100A8(P<0.05,P<0.01);重组蛋白S100A8能促进成纤维细胞的增殖、迁移及胶原合成(P<0.05,P<0.01),并且角质形成细胞拉伸后的上清液也能促进成纤维细胞胶原合成(P<0.01)。结论机械应力能上调扩张表皮层中S100A8的表达,并通过旁分泌作用促进成纤维细胞增殖、迁移及胶原合成。

钙卫蛋白对口腔鳞状细胞癌细胞侵袭迁移的影响及机制

目的观察钙卫蛋白(S100A8/A9蛋白)对口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)细胞迁移能力和侵袭能力的影响,并探求其潜在的相关机制。方法CCK8法检测浓度不同的S100A8/A9蛋白处理细胞24 h后的增殖活性,确定合适浓度后,进行划痕和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭情况。蛋白质印迹法检测细胞内PI3K/AKT信号通路表达情况,并用免疫荧光染色检测p-akt在OSCC细胞中的表达分布情况。RT-qPCR检测各组细胞中与侵袭迁移相关的MMP-2 mRNA和MMP-9 mRNA的表达情况。结果在不同浓度的S100A8/A9蛋白作用下,OSCC细胞增殖活性呈浓度依赖性(P<0.05)。划痕实验、Transwell实验显示S100A8/A9组细胞迁移和侵袭数多于空白组(P<0.001)。抑制剂组细胞迁移和侵袭数明显少于S100A8/A9组和空白组(P<0.001)。蛋白质印迹实验和免疫荧光染色结果显示,p-akt蛋白水平在0.5~1 h内表达上调,3 h后下调(P<0.05)。RT-qPCR结果显示,抑制剂组与S100A8/A9组和空白组对比,抑制剂降低了MMP-2 mRNA和MMP-9 mRNA表达情况(P<0.001)。结论低浓度S100A8/A9蛋白通过活化P13K/AKT信号通路,促进OSCC细胞的迁移和侵袭。

神经内镜超早期微创术联合重组人促红细胞生成素治疗老年重症高血压脑出血的临床研究

目的研究神经内镜超早期微创术联合重组人促红细胞生成素(rHu-EPO)对老年重症高血压脑出血患者S100钙结合蛋白A8/A9复合物(S100A8/A9)、髓鞘碱性蛋白(MBP)水平的影响。方法以海安市人民医院2016年1月~2019年5月收治的120例高血压脑出血患者为研究对象,按照随机数表法分为观察组和对照组,每组60例。对照组采取神经内镜超早期微创术治疗,观察组在对照组的基础上联合采用rHu-EPO治疗。比较两组围术期指标、神经损伤情况、S100A8/A9、MBP水平以及并发症的发生情况。结果观察组住院时间低于对照组(P<0.05);两组患者的神经损伤各项评分均高于治疗前,且观察组高于对照组(P<0.05);两组S100A8/A9、MBP均低于治疗前,且观察组低于对照组(P<0.05);观察组患者的重症肺炎、颅内感染、消化道出血、泌尿系统感染以及下肢静脉血栓发生率均低于对照组(P<0.05)。结论应用神经内镜超早期微创术联合rHu-EPO可显著降低老年重症高血压脑出血患者S100A8/A9、MBP水平,治疗效果显著。

人S100A8重组腺病毒质粒的构建及鉴定

目的构建人S100A8(hS100A8)重组腺病毒质粒,为hS100A8的深入研究奠定基础。方法从pGST-hS100A8中扩增hS100A8片段,亚克隆至穿梭质粒pAdTrack-TOX,构建重组穿梭质粒pAdTrack-TOX-hS100A8。经酶切、PCR及测序鉴定,再经PmeⅠ酶切线性化后电转化感受态AdEasier细胞,获得重组腺病毒质粒pAdhS100A8,经PacⅠ酶切后转染至HEK293细胞进行包装,制备重组腺病毒,扩增后进行病毒滴度测定及RT-PCR和Western blot鉴定。结果重组穿梭质粒pAdTrack-TOX-hS100A8及腺病毒质粒pAdhS100A8经鉴定均构建正确;重组腺病毒AdhS100A8在HEK293中成功包装,扩增后病毒滴度为1011 IU/ml;hS100A8在HEK293细胞中成功表达。结论成功构建了hS100A8重组腺病毒质粒,为深入研究hS100A8奠定了基础。

血清孕激素受体膜成分1和钙结合蛋白S100A8/9对胎膜早破合并宫内感染的评估价值

目的探讨胎膜早破(PROM)合并宫内感染孕妇血清孕激素受体膜成分1(PGRMC1)、钙结合蛋白S100A8/9检测的临床价值。方法选择南阳医学高等专科学校第一附属医院2018年3月-2020年3月收治的PROM并绒毛膜羊膜炎(CA)感染孕妇60例纳入CA组,选择同期医院收治的PROM非CA孕妇60例作为非CA组,选择同期未发生胎膜早破的正常孕妇60名作为对照组。将CA组孕妇根据发病时是否足月及新生儿是否发生不良结局进行进一步分组,采用酶联免疫吸附法(Enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)检测其血清PGRMC1、S100A8、S100A9水平。结果 CA组PGRMC1低于非CA组及对照组,S100A8、S100A9高于非CA组及对照组(P均<0.001);非CA组PGRMC1低于对照组,S100A8、S100A9高于对照组(P均<0.001);未足月组CA产妇血清PGRMC1低于足月组,S100A8、S100A9高于足月组(P<0.05);新生儿不良结局组CA孕妇血清中PGRMC1低于新生儿结局较好组,S100A8、S100A9高于新生儿结局较好组(P<0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线分析结果显示,血清PGRMC1、S100A8、S100A9用于PROM孕妇并发CA的诊断,其曲线下面积(AUC)分别为0.823、0.734、0.728(P<0.05)。结论胎膜早破并宫内感染孕妇血清PGRMC1、S100A8/9与感染状态、是否足月及新生儿结局有关,可用于该病的临床辅助诊断。