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RNA干涉抑制存活素表达并诱导HeLa S3细胞凋亡的研究 被引量:2
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作者 王瑞瑛 梅柱中 +6 位作者 董燕 钱俊杰 赵国伟 田宝磊 董申 罗贵民 孙志贤 《吉林大学学报(理学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期691-695,共5页
选择3个(S1,S2,S3)靶向存活素基因的siRNA序列,构建相应的RNA干涉载体pTet-U6-S1,pTet-U6-S2,pTet-U6-S3,将它们分别转染HeLa S3细胞,采用RT-PCR和W estern印迹检测分析转染对HeLa S3细胞内源存活素表达的影响,结果表明,针对存活素3’... 选择3个(S1,S2,S3)靶向存活素基因的siRNA序列,构建相应的RNA干涉载体pTet-U6-S1,pTet-U6-S2,pTet-U6-S3,将它们分别转染HeLa S3细胞,采用RT-PCR和W estern印迹检测分析转染对HeLa S3细胞内源存活素表达的影响,结果表明,针对存活素3’端非编码区序列的干涉载体pTet-U6-S3转染细胞后,存活素的mRNA水平和蛋白水平均明显下调,抑制水平高于S1序列.与对照相比,S1,S2和S3片段对存活素mRNA的抑制率分别是20%,12.5%和40%,对存活素蛋白的抑制率分别是39.2%,17.0%和58.6%.流式细胞术检测结果表明,抑制存活素表达后,HeLa S3细胞凋亡比例显著提高. 展开更多
关键词 存活素 RNA干涉 凋亡 HELA s3细胞
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阿帕替尼联合紫杉醇对人宫颈癌HeLa S3细胞裸鼠移植瘤的抑制作用 被引量:6
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作者 许玲玲 吴洪斌 杨帅龙 《中国药师》 CAS 2019年第10期1815-1819,共5页
目的:研究阿帕替尼联合紫杉醇对人宫颈癌He La S3细胞裸鼠移植瘤的抑制作用及可能的作用机制。方法:将HeLa S3细胞接种于裸鼠右肩背部皮下,建立人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤模型。将建模成功的40只裸鼠随机分为4组:模型组,阿帕替尼组(200 mg&... 目的:研究阿帕替尼联合紫杉醇对人宫颈癌He La S3细胞裸鼠移植瘤的抑制作用及可能的作用机制。方法:将HeLa S3细胞接种于裸鼠右肩背部皮下,建立人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤模型。将建模成功的40只裸鼠随机分为4组:模型组,阿帕替尼组(200 mg·kg^-1)、阿帕替尼联合紫杉醇低(200 mg·kg^-1+10 mg·kg^-1)、高(200 mg·kg^-1+20 mg·kg^-1)剂量组,每组10只。各给药组按剂量腹腔注射给药,模型组腹腔注射等量生理盐水,1次/d,连续给药14 d。检测裸鼠移植瘤体积和瘤质量,计算抑瘤率;采用TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡指数(AI),Western blot法检测瘤组织内含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)-3、caspase-9、细胞色素C(Cyto C)蛋白表达情况。结果:与模型组比较,阿帕替尼组裸鼠的移植瘤体积、瘤质量均显著降低,抑瘤率、细胞AI、caspase-3、caspase-9、Cyto C蛋白表达量均显著增加(P<0.01);与阿帕替尼组比较,阿帕替尼联合紫杉醇组裸鼠的移植瘤体积、瘤质量显著降低,抑瘤率、细胞AI、caspase-3、caspase-9、Cyto C蛋白表达量显著增加(P<0.01),且高低剂量组间差异有统计学意义(P<0.01)。结论:阿帕替尼联合紫杉醇对人宫颈癌细胞株移植瘤有明显的抑制作用,且优于单独使用阿帕替尼。 展开更多
关键词 宫颈癌:HeLa s3细胞 阿帕替尼 紫杉醇 移植瘤
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悬浮培养HEK-293 N3S细胞生产重组腺病毒Ad-GFP的实验研究 被引量:5
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作者 田博 吴彬 +5 位作者 张群伟 毕建进 王澜 朱宝珍 耿越 吴祖泽 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期915-918,共4页
利用5L生物反应器悬浮培养HEK-293N3S细胞生产携带绿色荧光蛋白基因的重组腺病毒(recombinant adenovirus-greenfluorescent protein,Ad-GFP),为规模化生产腺病毒基因药物建立一种稳定可行的生产工艺。复苏的种子细胞进行逐级放大最... 利用5L生物反应器悬浮培养HEK-293N3S细胞生产携带绿色荧光蛋白基因的重组腺病毒(recombinant adenovirus-greenfluorescent protein,Ad-GFP),为规模化生产腺病毒基因药物建立一种稳定可行的生产工艺。复苏的种子细胞进行逐级放大最后接入5L搅拌式生物反应器中,采用含5%胎牛血清(FBS)的DMEM/F12培基灌流培养293N3S细胞,当细胞密度达到(2-4)×10^6个/mL时感染Ad-GFP,48h后收获细胞,经两步氯化铯超速离心获得纯化的Ad-GFP。采用紫外分光光度计比色法和高压液相色谱法(HPLC)测定病毒颗粒数和纯度,采用组织培养半数感染剂量(TCID50)法检测腺病毒的感染滴度。连续培养10-12d,细胞密度可达到(2-4)×106个/mL左右,纯化的Ad-GFP感染滴度和颗粒数分别为1.0×10^11IU/mL和1.68×10^12VP/mL,比活性为6.0%,A260/A280比值为1.33,产品纯度达到99.2%。建立了5L生物反应器悬浮培养293N3S细胞生产重组腺病毒Ad-GFP的生产工艺,对携带其他基因的重组腺病毒药物生产具有一定的指导意义。 展开更多
关键词 悬浮培养 重组腺病毒 HEK-293N3s细胞 生物反应器
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SENSITIZATION OF ACNU KILLING EFFECTS ON HeLa S3 CELLS BY MGMT ANTI SENSERNA TRANSFECTION 被引量:4
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作者 季守平 由英 +3 位作者 吴英 陈建敏 杨军 章扬培 《Chinese Medical Sciences Journal》 CAS CSCD 1998年第1期14-19,共6页
O6 -methylguanine- DNA- methyltransferase (MGMT ) plays a very important role in the cellular resis- tance to nitrosoureas drugs. Inhibition of MGMT might be a useful approach in tumor chemotherapy. In this study, the... O6 -methylguanine- DNA- methyltransferase (MGMT ) plays a very important role in the cellular resis- tance to nitrosoureas drugs. Inhibition of MGMT might be a useful approach in tumor chemotherapy. In this study, the depletion of MGMT activity by retroviral-mediated antisense RNA transfection were reported. Three retroviral vectors expressing MGMT antisense RNA were constructed and transfected into HeLa S3 cells. The difference of MGMT mRNA, MGMT activity as well as cellular resistance to ACNU before and after transfection were observed. It was found that antisense RNA targeting 5’region and whole length of MGMT mRNA could partially deplete MGMT activity and enhance killing effects of ACNU. However, 3’ region antisense RNA had no effect on MGMT modulation. 展开更多
关键词 MGMT ACNU antisense RNA
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金花茶种子对激素相关性肿瘤体外抑制作用的实验研究 被引量:20
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作者 韩立春 史丽颖 +4 位作者 于大永 唐前 唐玲 冯宝民 王永奇 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期3146-3148,共3页
目的观察金花茶种子不同提取物对激素相关性肿瘤体外抑制作用。方法采用噻唑蓝比色法(MTT)检测金花茶种子不同提取物对人宫颈癌HeLa S3细胞和人前列腺癌PC3细胞增殖的影响。结果金花茶种子乙醇提取物、正丁醇部分和水溶部分都显示了较... 目的观察金花茶种子不同提取物对激素相关性肿瘤体外抑制作用。方法采用噻唑蓝比色法(MTT)检测金花茶种子不同提取物对人宫颈癌HeLa S3细胞和人前列腺癌PC3细胞增殖的影响。结果金花茶种子乙醇提取物、正丁醇部分和水溶部分都显示了较强的抑制人宫颈癌HeLa S3细胞和人前列腺癌PC3细胞增殖的作用,其IC50分别为85.88,67.62,55.71μg/ml和63.06,56.20,68.53μg/ml,且抑制作用和样品浓度呈量效关系。结论金花茶种子乙醇提取物的正丁醇部分和水溶部分在体外对激素相关性肿瘤具有抑制作用,为其抗癌活性的有效部位。 展开更多
关键词 金花茶 宫颈癌 前列腺癌 HELA s3细胞 PC3细胞
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一种提取荔枝胚中总RNA的方法 被引量:14
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作者 张以顺 向旭 +1 位作者 傅家瑞 黄上志 《植物生理学通讯》 CSCD 北大核心 2004年第2期226-228,共3页
用改良的Tris-硼酸法和3S柱式细胞及组织总RNA抽提试剂盒V2.0提取3个荔枝品种胚中的总RNA,经纯度和甲醛变性胶分析,其A260/A280值在1.91~2.02之间,基本完整,未检出明显降解.
关键词 荔枝 总RNA 提取 Tris-硼酸法 3s柱式细胞
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