胡椒碱等6种中药单体促进黑素瘤Cloudman S91细胞株黑素合成的研究

目的研究胡椒碱、原儿茶醛、白果内脂等6种中药单体对小鼠黑素瘤细胞黑素合成的影响,初步探讨不同的中药单体影响黑素合成的作用机制。方法培养的黑素瘤CloudmanS91细胞分别以系列浓度的6种中药单体作用72h,测定细胞黑素含量、酪氨酸酶活性并与体外蘑菇酪氨酸酶活性直接测定方法(多巴速率氧化法)测定的结果进行比较。结果6种单体均能促进CloudmanS91细胞的黑素量生成。胡椒碱、原儿茶醛、白果内脂在最佳促进浓度均较100μmol/L的8-甲氧补骨脂素作用明显(P<0.05),其中0.5mmol/L胡椒碱对黑素含量促进作用最为明显。在实验浓度(0.01～1.00mmol/L)胡椒碱可促进酪氨酸酶活性,体外可直接增加蘑菇酪氨酸酶的活性;原儿茶醛对酪氨酸酶活性无明显影响,体外可直接促进蘑菇酪氨酸酶的活性;白果内脂对酪氨酸酶活性起促进作用,体外对蘑菇酪氨酸酶的活性无影响。结论中药单体胡椒碱、原儿茶醛、白果内脂可明显促进黑素瘤细胞黑素的合成,原儿茶醛的作用可能不依赖于酪氨酸酶的活化作用。

顺铂诱导小鼠黑素瘤Cloundman S91细胞株凋亡的研究

目的:探讨顺铂CDDP对小鼠黑素瘤CloundmanS91细胞株的作用。方法:采用四甲基偶氮唑蓝MTT还原法检测CDDP对S91细胞株存活率的影响,吖啶橙染色观察凋亡细胞形态,流式细胞仪分析凋亡细胞周期,末端脱氧核苷转移酶TdT介导的脱氧尿苷三磷酸dUTP末端标记法TUNEL原位观察,计算细胞平均凋亡指数。结果:S91细胞经CDDP处理后,存活率降低,并与药物浓度呈正相关;荧光显微镜下可见明显的凋亡细胞;细胞周期G1期前出现凋亡峰。CDDP浓度在10、20、30μmol/L时,细胞平均凋亡指数分别为11.5%、19.8%、33.7%。结论:10～30μmol/L的CDDP诱导S91黑素瘤细胞凋亡。