亲和层析Sa抗原及其抗体检测与老年类风湿关节炎

类风湿关节炎（RA）是我国常见的一种关节疾病，有报道其患病率随年龄增长而增加，随着我国人口老龄化，RA在老年人中的每年新发患者可达十几万人。因此，重视老年类风湿关节炎（EORA）的早期诊断对改善患者的生活质量及减轻家庭和社会负担都很有意义。

Sa抗原的提取和纯化

目的：提取和纯化Ｓａ抗原。方法：应用ＤＥ５２离子层析法。结果：Ｓａ抗原的分子量是５０ＫＤ，存在于０．２０ｍｏｌ／Ｌ Ｎａｃｌ ＴＢＳ洗脱组分中，在－２０℃保存期为１２０天。结论：分离和纯化的Ｓａ抗原可应用于免疫印迹检测抗Ｓａ抗体。

Sa抗原的提取及抗Sa抗体的检测

目的制备Ｓａ抗原，建立抗Ｓａ抗体的检测方法，测定自身免疫性结缔组织疾病中抗Ｓａ抗体的阳性率。方法从人胎盘中提取Ｓａ抗原，用阴离子交换法进一步纯化，采用免疫印迹法，检测抗Ｓａ抗体。结果抗Ｓａ抗体与类风湿因子、抗ＲＡ３３、抗Ｒｏ（ＳＳＡ）、抗Ｌａ（ＳＳｂ）、抗ＲＮＰ、抗Ｓｍ、抗Ｊｏ－１和抗Ｓｃｌ－７０抗体等自身抗体无交叉反应。抗Ｓａ抗体在各组患者中的阳性率分别为：类风湿性关节炎（ＲＡ）３１．９％（６１／１９１），干燥综合征３．０％（２／６７），系统性红斑狼疮４．３％（２／４６），而白塞病（６６例）、多发性肌炎／皮肌炎（６０例）、其他自身免疫性结缔组织病（６６例）与正常人（４０例）中均为０。抗Ｓａ抗体对ＲＡ的特异性为９８．６％。

旋毛虫成虫与肌幼虫表面抗原的比较分析

目的比较大理猪源旋毛虫(Trichinela spiralis)成虫与肌幼虫表面抗原(Surface antigen,SA)的蛋白组分差异,并进一步分析其免疫反应性,为分离和筛选出免疫原性和免疫反应性强的旋毛虫抗原成分提供依据。方法采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),对成虫和肌幼虫SA蛋白成分进行分析,并进一步采用蛋白印迹(Western-blot)对其免疫反应性分析比较。结果旋毛虫成虫SA显示4条主要蛋白染色条带,分子量分别为50kDa、48kDa、40kDa和34kDa,旋毛虫肌幼虫SA显示10条主要蛋白染色条带,分别为105kDa、99kDa、80kDa、63kDa、55kDa、48kDa、35kDa、28kDa、24kDa和21kDa。;Western-blot检测结果表明,旋毛虫成虫SA出现4条反应条带,其分子量分别为50kDa、48kDa、40kDa和34kDa,旋毛虫肌幼虫SA出现7条反应条带,分子量分别为105kDa、99kDa、80kDa、55kDa、48kDa、35kDa和28kDa,其中48kDa和35kDa显色明显。结论旋毛虫成虫SA与肌幼虫SA都含有分子量为48kDa的蛋白组分,且两种抗原组分均具有较强的免疫反应性。