SA-hIL-21修饰磁珠的合成及其生物学功能的研究

过继性免疫效应细胞疗法是一种安全、疗效较好的肿瘤免疫疗法,而体外扩增免疫细胞是过继性免疫效应细胞疗法的一个重要环节.为了探索一种高效的促进人外周血淋巴细胞增殖的方法,我们通过发酵罐工艺生产SA-hIL-21融合蛋白,随后通过DEAE SFF阴离子交换层析柱分离纯化和柱上复性该蛋白,再将SA-hIL-21融合蛋白锚定到磁珠上,最后比较hIL-21蛋白标准品、游离SA-hIL-21融合蛋白、SA-hIL-21融合蛋白修饰磁珠促进人外周血淋巴细胞增殖的效率.本实验成功获得了高锚定率的SA-hIL-21修饰磁珠,并发现其促进人外周血淋巴细胞增殖明显优于hIL-21蛋白标准品,为后续体外大规模培养外周血中某种或多种免疫细胞奠定了基础.

锚定修饰磁珠的SA-hIL2/7/21体外扩增人外周血T细胞的实验研究

目的为探究一种新的T细胞体外扩增方式,探索并比较了SA-hIL2、SA-hIL7、SA-hIL21 3种细胞因子在游离与锚定修饰磁珠2种情况下,对T细胞的增殖以及表型特征的影响。方法利用本实验室大肠杆菌原核表达系统制备的SA-hIL2/7/21融合蛋白锚定修饰磁珠后体外扩增T细胞,随后CFSE标记流式细胞术分别测定细胞的增殖程度以及初始记忆T细胞表面标志的表达。结果锚定修饰磁珠的SA-hIL2、SA-hIL7、SA-hIL21促增殖效果显著优于游离的SA-hIL2、SA-hIL7、SA-hIL21,并且前者可促进CD8^+CD45RO^+以及CD62L-CCR7-(TEM)表达,但降低CD8^+CD45RO-和CD62L^+CCR7^+(TCM)的表达。结论与游离组扩增T细胞相比,锚定修饰磁珠组一方面促进T细胞增殖的能力更强;另一方面可使T细胞表型由TCM向TEM转变。