丹参提取液在精液体外处理中的作用研究

在精液体外处理中 ,加入丹参提取液 ,能有效的增加精子的活力 ,提高精子质量。与对照组比较 ,经统计学处理P <0 0 1,有显著性差异。提示丹参提取液在精液体外处理中 ,能有效的增加精子的活力 ,提高精子质量。

丹参愈伤组织培养中激素浓度的优化研究

目的:优化丹参愈伤组织继代培养中激素浓度的最佳组合。方法:以丹参种子为外植体,以无菌苗下胚轴诱导的初代愈伤组织为材料,以愈伤组织净增鲜重为指标,利用二次正交旋转组合设计方法进行数学模拟,建立数学模型,利用响应面法进行激素浓度组合寻优。结果:丹参愈伤组织继代培养中激素浓度的最佳组合为6-BA 1.514 mg/L+NAA 2.059 mg/L+2,4-D 2.137 mg/L;愈伤组织的净增殖鲜重为35.66 g。

婆罗双树样基因4对肝癌细胞侵袭转移和上皮间质转化的影响

目的:探讨婆罗双树样基因4(SALL4)对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)侵袭转移和上皮间质转化(EMT)的影响。方法:构建过表达和靶向干扰SALL4的稳定HCC细胞株,Transwell小室实验检测肝癌细胞的迁移侵袭能力,实时荧光定量PCR和Western blot检测SALL4和EMT相关分子的mRNA和蛋白表达水平。结果:Transwell小室迁移侵袭实验证明,SALL4增强肝癌细胞迁移侵袭能力,SALL4过表达Huh7细胞E-cadherin mRNA和蛋白水平均降低,而Vimentin mRNA和蛋白水平均增加;反之,与对照组比较,转染SALL4-siRNA的HepG2细胞E-cadherin mRNA和蛋白水平均增加,而Vimentin mRNA和蛋白水平均降低。随着SALL4表达上调,Huh7细胞的Twist、Snail、Slug mRNA水平显著升高,反之,干扰SALL4基因表达的HepG2细胞Twist、Snail、Slug mRNA水平下降。结论:SALL4对肝癌细胞侵袭转移能力和EMT有重要影响,可能成为靶向EMT控制肝癌侵袭转移的策略之一。

胃癌患者血清SALL4的水平及其对胃癌细胞迁移能力的影响

目的研究SALL4在胃癌患者与健康人群血清中含量差异,并探讨SALL4分子在胃癌进展中的作用。方法选择2016年3月～2018年4月在成都市第三人民医院治疗的47例胃癌患者和参加体检的29例健康志愿者。采用酶联免疫吸附测定方法检测血清中SALL4含量;采用Real-time PCR和Western blot分析SALL4在多种胃癌细胞株和胃黏膜细胞株中的mRNA水平和蛋白水平表达情况;通过siRNA干扰研究SALL4对胃癌细胞迁移和侵袭能力的影响;Western blot分析上皮间质转化(EMT)相关分子表达情况。结果 SALL4在胃癌患者血清中的含量显著高于健康志愿者,差异有高度统计学意义(P <0.0001)。SALL4在多种胃癌细胞株中mRNA水平和蛋白水平的表达情况均高于胃黏膜细胞株。干扰SALL4表达后,胃癌细胞的迁移能力和侵袭能力均显著降低,差异有统计学意义(P <0.05)。SALL4表达降低可导致E-cadherin表达上调,snail、β-catenin和Wnt3a表达下调。结论SALL4与胃癌进展相关,可能通过诱导胃癌细胞EMT进程,促进细胞迁移和侵袭。

复方丹参注射液对老龄小鼠SOD和LPO的影响

本文采用改良的邻苯三酚自氧化法和TBA比色法测定了复方丹参注射液对老龄小鼠红细胞、心、肝、肾中SOD活性和LPO含量。结果表明:复方丹参注射液能显著提高老龄小鼠红细胞、心、肝、肾中SOD活性(P<0.01)。在同一老龄小鼠中也相应降低LPO含量(P<0.01)。剂量组间无显著差异。有抗衰老作用。

婆罗双树样基因4在人前列腺癌细胞和组织中的表达及其与临床预后之间的关系

目的:评估婆罗双树样基因4(SALL4)在人前列腺癌细胞系和前列腺癌组织中的表达情况,并明确其表达水平和临床病理学参数间的关系。方法:用免疫荧光技术、RT-PCR和Western blotting检测SALL4在LNCaP、DU145、PC-3细胞系和RWPE-1正常前列腺上皮细胞系中的表达。同时用免疫组化方法检测SALL4在前列腺增生及前列腺癌组织中的表达,并探讨其与Gleason评分等临床病理参数的关系。结果:SALL4蛋白在细胞中主要表达于胞浆,在3种前列腺癌细胞株中SALL4蛋白表达水平要明显高于正常前列腺上皮细胞RWPE-1(P<0.05),而SALL4mRNA表达水平在4种细胞系中无明显差异(P>0.05)。免疫组化结果显示SALL4在前列腺癌组织中的表达水平明显高于增生和正常前列腺组织(P<0.01)。SALL4蛋白表达水平与Gleason评分、前列腺癌临床分期、预后及组织前列腺特异抗原(PSA)表达密切相关,而与患者年龄、治疗前血清总PSA水平、前列腺体积及组织雄激素受体表达无明显相关性。结论:SALL4蛋白在前列腺癌中高表达,提示其在前列腺癌的发生、发展过程中可能起重要作用,有可能成为诊断前列腺癌新的肿瘤标志物及评估其恶性程度、进展和预后的参考指标。

SALL4、CD30、D2-40和glypican-3在卵巢生殖细胞肿瘤中的表达及应用

目的探讨SALL4、CD30、D2-40和glypican-3在卵巢生殖细胞肿瘤(OGCTs)中的表达及其在诊断及鉴别诊断中的价值。方法应用免疫组化方法(En Vision法)检测SALL4、CD30、D2-40和glypican-3蛋白在55例原发性卵巢生殖细胞肿瘤中的表达,包括16例无性细胞瘤、10例胚胎性癌、12例卵黄囊瘤、1例绒毛膜癌、16例畸胎瘤(其中6例为未成熟性,10例为成熟性)。另选取10例正常卵巢组织及5例卵巢透明细胞癌作为对照。结果SALL4在无性细胞瘤(16/16)、胚胎性癌(10/10)和卵黄囊瘤(12/12)中均呈弥漫强(+),在绒毛膜癌(1/1)、未成熟畸胎瘤(3/6)和成熟性畸胎瘤中(2/10)局灶(+)。CD30在胚胎性癌(8/10)中(+),在无性细胞瘤、绒毛膜癌、卵黄囊瘤和畸胎瘤中均(-)。D2-40在无性细胞瘤(16/16)呈弥漫强(+),在胚胎性癌(3/10)中局灶(+),在卵黄囊瘤、绒毛膜癌和畸胎瘤中均(-)。glypican-3在卵黄囊瘤(11/12)中弥漫(+),在绒毛膜癌(1/1)和胚胎性癌(2/10)局灶(+),在无性细胞瘤和畸胎瘤中均(-)。10例正常卵巢组织和5例卵巢透明细胞癌均未见SALL4、CD30、D2-40和glypican-3的表达。结论 SALL4是诊断OGCTs较好的抗体,CD30、D2-40和glypican-3分别是诊断胚胎性癌、无性细胞瘤及卵黄囊瘤较好的抗体,特别有助于与透明细胞癌的鉴别。

miR-497调控SALL4-RIPK1轴促进肝癌MHCC97L细胞坏死

目的:探讨miR-497促进肝癌MHCC97L细胞坏死作用机制。方法:(1)质粒转染miR-497,经H2O2诱导后,Annexin V-FITC/PI双染流式分析肝癌细胞凋亡和坏死;(2)过表达miR-497和SALL4后,western blot分析RIPK1蛋白表达情况;(3)293T细胞共转染miR-497和p MIR-SALL4-Luc质粒后,荧光素酶实验检测其荧光素强度。结果:(1)过表达miR-497,经H2O2诱导后,活细胞明显下降,而细胞坏死增加;(2)western blot分析得出过表达miR-497和SALL4的MHCC97L细胞内的RIPK1蛋白表达均上调;(3)荧光素酶实验证实了miR-497直接靶向SALL4。结论:miR-497通过调控SALL4-RIPK1轴促使肝癌MHCC97L细胞坏死。

牛磺酸和丹参提取液对小鼠心肌的保护作用

目的 探讨牛磺酸 (Tau)和丹参提取液 (Ts)对运动所致心脏衰竭小鼠心肌耐受力的影响。方法 第一阶段 :将小鼠随机分为安静、运动衰竭、牛磺酸运动衰竭、丹参运动衰竭 4组 ,分别观测Tau和Ts对小鼠游泳时间和心肌酶的影响。第二阶段 :应用不同浓度的Tau和Ts的混合液进行实验 ,方法同一阶段。结果 第一阶段 :Tau运动衰竭组、Ts运动衰竭组较单独运动衰竭组游泳时间有显著延长 ,磷酸肌酸激酶 (CPK)活力也明显降低 (P <0 .0 5 ) ;第二阶段 ,高浓度Tau与中浓度Ts对小鼠的游泳能力影响最大。结论 Tau、Ts都能提高受试小鼠的运动耐力 ,减少对心肌的损伤 ,Tau、Ts的混合液优于单独用药 ,且以Tau84 0mg/kg、Ts32 0mg/kg为最佳组合。

高效液相色谱法同时测定荔枝草提取物中迷迭香酸、高车前苷、高车前素及芹菜素含量

目的建立同时测定荔枝草提取物中迷迭香酸、高车前苷、高车前素及芹菜素含量的高效液相色谱(HPLC)法。方法色谱柱为Phenomenex C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.1%磷酸水(A)-甲醇(B),梯度洗脱(0~8 min时15%B^38%B,8~17 min时38%B^56%B,17~28 min时56%B^82%B,28~35 min时82%B^95%B),检测波长为335 nm,流速为1 mL/min,柱温为35℃。结果迷迭香酸、高车前苷、高车前素及芹菜素质量浓度分别在2.812 5~112.500 0,6.745~269.800,3.615~144.600,4.88~195.20 mg/L范围内与峰面积线性关系良好。荔枝草提取物中迷迭香酸、高车前苷、高车前素及芹菜素含量分别为6.186,18.253,9.665,11.162 mg/g。结论该方法准确,可靠,重复性好,可用于荔枝草提取物的质量评价与控制。

RT-PCR检测SALL4在卵巢生殖细胞肿瘤中的表达

目的研究SALL4与卵巢生殖细胞肿瘤的关系,探讨卵巢生殖细胞肿瘤的发生机制及相关基因的功能,寻找卵巢生殖细胞肿瘤早期检测、诊断的新指标。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测40例卵巢生殖细胞肿瘤、40例卵巢非生殖细胞肿瘤中SALL4的表达,分析SALL4与卵巢生殖细胞肿瘤的关系。结果 SALL4在正常卵巢组织中均无表达,在卵巢生殖细胞肿瘤中的阳性表达率90.00﹪(36/40)显著高于卵巢非生殖细胞肿瘤17.50﹪(7/40),两者比较差异有统计学意义(P﹤0.01)。结论 SALL4在正常卵巢组织中无表达,在卵巢非生殖细胞肿瘤中极低表达,而在卵巢生殖细胞肿瘤中高表达,提示SALL4可能是一种新的卵巢生殖细胞肿瘤早期检测、评估恶性程度及预后的肿瘤标记物。

SALL4在儿童卵黄囊瘤中表达的研究

目的研究分析一种新的肿瘤标志物SALL4在儿童卵黄囊瘤（yolk sac tumor，YST）的表达情况及临床意义。方法收集儿童卵黄囊瘤病理标本21例（含有穿刺标本8例）。选取成熟畸胎瘤（mature teratoma，MT）10例、未成熟畸胎瘤（immature teratoma，IMT）5例、无性细胞瘤1例进行对照研究。应用免疫组织化学方法检测SALL4在上述肿瘤中的表达情况，并就SALL4与甲胎蛋白（alpha fetoprotein，AFP）在YST的表达情况进行比较。结果①SALIA在21例儿童YST全部表达，且每例都有较高的阳性表达强度；②在儿童YST中，SALL4的阳性表达强度强，为6例（＋＋）、15例（＋＋＋），而AFP在YsT的表达相对较弱，分别为2例（一）、5例（＋）、9例（＋＋）、5例（＋＋＋），SALL4表达强度比AFP更强（P〈0．01）；在儿童YST中，SALL4与AFP的表达强度之间进行相关性分析，发现两者无明显相关性（P〉0．05）；③8例穿刺标本中，SALL4染色3例（＋＋）、5例（＋＋＋），AFP染色1例（一）、2例（＋）、4例（＋＋）、1例（＋＋＋），两者比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论①在儿童常见生殖细胞肿瘤（GCT）中，SALIA可能作为YsT相对敏感的新一代瘤标；②在免疫组化染色分析中，SALIA比AFP在儿童YST中阳性表达强度更高；但SALIA与AFP的表达强度之间无明显相关性；③SALL4免疫组化染色可帮助儿童YST的诊断，尤其针对组织量少的穿刺标本，更敏感的瘤标SALL4有助于标本的病理分子学诊断。